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表3琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶和被分离物质的分子量 商品名型 分离物质的分子量 Sepharose 6B 4×10 4B 102×107 104×10 Bio-Gel P.2 200-1800 P-4 800-4000 P-6 100-6000 P-10 1500-20000 P.30 2500-40000 P.60 3000-60000 P-100 5000-100000 P.150 15000-150000 P-200 30000-200000 P.300 60000-400000 2) (4) B? 图6混合蛋白质溶液凝胶过滤示意图 A.小分子由于扩散作用滞留于凝胶颗粒内部:大分子被排阻在凝胶 颗粒外面,在颗粒之间迅速通过。 B.(1)蛋白质混合物上柱: (2)洗脱开始,小分子扩散进入凝胶颗粒内:大分子被排阻于颗 粒之外: (3)小分子被滞留,分子向下移动时,大分子分开, (4)大分子完全分开: (5)大分子流程较短,已洗脱出层析柱,小分子仍在行进中。 五、亲和层析((affinity chromatography) 亲和层析法是分离蛋白质的一种极为有效的方法。它经常只需经过一步处理即可使某种 待提纯的蛋白质从很复杂的蛋白质混合物中分离出来,并且纯度很高。这种方法是根据某些 蛋白质具有的生物学性质,与另一种称为配体(ligand)的分子能特异而非共价地结合。如 表 3 琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶和被分离物质的分子量 商品名 型 分离物质的分子量 Sepharose 6B 4×106 4B 104~2×107 2B 104~4×107 Bio-Gel P-2 200~1800 P-4 800~4 000 P-6 1 000~6 000 P-10 1 500~20 000 P-30 2 500~40 000 P-60 3 000~60 000 P-100 5 000~100 000 P-150 15 000~150 000 P-200 30 000~200 000 P-300 60 000~400 000 五、亲和层析 (affinity chromatography) 亲和层析法是分离蛋白质的一种极为有效的方法。它经常只需经过一步处理即可使某种 待提纯的蛋白质从很复杂的蛋白质混合物中分离出来,并且纯度很高。这种方法是根据某些 蛋白质具有的生物学性质,与另一种称为配体(ligand)的分子能特异而非共价地结合。如 A B 图 6 混合蛋白质溶液凝胶过滤示意图 A. 小分子由于扩散作用滞留于凝胶颗粒内部;大分子被排阻在凝胶 颗粒外面,在颗粒之间迅速通过。 B.(1)蛋白质混合物上柱; (2)洗脱开始,小分子扩散进入凝胶颗粒内;大分子被排阻于颗 粒之外; (3)小分子被滞留,分子向下移动时,大分子分开; (4)大分子完全分开; (5)大分子流程较短,已洗脱出层析柱,小分子仍在行进中
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