55 样品去壳去皮粉碎后，称取 20g 粉碎过筛样品，置于 250ml 具塞锥形瓶中， 加 30ml 正乙烷或石油醚和 100ml 甲醇水溶液，在瓶塞上涂上一层水，盖严防漏。 振荡 30min，静置片刻，以叠成折叠式的快速定性滤纸过滤于分液漏斗中，等 下层甲醇水溶液分清后，放出甲醇水溶液于另一具塞锥形瓶中。取 20.0ml 甲醇 水溶液提取液（相当于 4g 样品）置于另一个 125ml 分液漏斗中，加 20mlCHCl3， 振摇 2min，静置分层（如出现乳化则可滴加甲醇使其分层），放出 CHCl3层，经 盛有约10g先用CHCl3湿润的无水硫酸钠的慢速定量滤纸过滤于50ml蒸发皿中， 分液漏斗中再加 5mlCHCl3重复振摇提取，CHCl3层一并滤于蒸发皿中，最后用少 量 CHCl3洗滤器，洗液并于蒸发皿中。将蒸发皿放在通风橱内于 65℃水浴上通 风挥干，然后放在冰箱内冰却 2－3min 后，准确加入 1ml 苯－乙腈混合液（或 将 CHCl3用浓缩蒸馏器减压吹干蒸干，然后再准确加入 1ml 苯－乙腈混合液）。 用带橡皮头的滴管的管尖将残渣充分混合，如果有苯的结晶析出，则将蒸发皿 取下，继续溶解、混合，晶体则立即消失，再用此滴管吸取上清液转移于 2ml 具塞试管中。 2．样品的测定（单向展开法） （1）薄层板的制备：称取约 3g 硅胶 G，加入相当于硅胶量 2－3 倍左右的 水，用力研磨 1－2min 至成糊状后立即倒入涂布器内，推成 5×20cm，厚度约 0.25mm 的簿层板三块。在空气中干燥大约 15min 后，放入 100℃烘箱内活化 2h， 取出在干燥器中保存。一般可保存 2－3d，若放置时间较长，可再进行干燥活 化后使用。 （2）点样：将簿层板边缘附着的吸附剂刮净，在距薄层板下端 3cm 处做一 个基线，然后在基线上用微量注射器滴加样液。一块板可滴加 4 个点，点距边 缘和点间距约为 1cm，点直径约为 3mm。要求在同一块板上滴加点的大小应一致， 可用吹风机冷风边吹边加。滴加的样点如下： 第一点：10μl、0.04μg/mlAFTB1标准使用液。 第二点：20μl 样品溶液。 第三点：20μl 样液＋10μl 0.04μg/mlAFTB1标准使用液。 第四点：20μl 样液＋10μl 0.2μg/mlAFTB1标准使用液。 （3）展开与观察：加入 10ml 无水乙醚于展开槽内，预展 12cm，取出挥干。 再于另一展开槽内加入 10ml 丙酮：三氯甲烷（8：92）溶剂，展开 10－12cm， 取出在紫外光下观察结果，方法如下： ①第一点滴加 10μlAFTB1标准使用液，其中含 AFTB10.04μg/ml（最低检出 量 5μg/kg）。可作为检验薄层板好坏及色谱是否合适，能检出最低检出量。如果 展开后此点无荧光，则说明薄层板或色谱条件存在问题。 ②第三点和第四点上滴加了样液和 AFTB1标准液，可使样液中的 AFTB1荧光 点和标液 AFTB1荧光点重叠。加以认证。 第三点是用来检验最低检出量在样液中是否能正常呈现，如果第一点呈阳 性，第三点呈阴性则说明样品的提取存在问题，可能存在荧光猝灭剂，应重新55 样品去壳去皮粉碎后，称取 20g 粉碎过筛样品，置于 250ml 具塞锥形瓶中， 加 30ml 正乙烷或石油醚和 100ml 甲醇水溶液，在瓶塞上涂上一层水，盖严防漏。 振荡 30min，静置片刻，以叠成折叠式的快速定性滤纸过滤于分液漏斗中，等 下层甲醇水溶液分清后，放出甲醇水溶液于另一具塞锥形瓶中。取 20.0ml 甲醇 水溶液提取液（相当于 4g 样品）置于另一个 125ml 分液漏斗中，加 20mlCHCl3， 振摇 2min，静置分层（如出现乳化则可滴加甲醇使其分层），放出 CHCl3层，经 盛有约10g先用CHCl3湿润的无水硫酸钠的慢速定量滤纸过滤于50ml蒸发皿中， 分液漏斗中再加 5mlCHCl3重复振摇提取，CHCl3层一并滤于蒸发皿中，最后用少 量 CHCl3洗滤器，洗液并于蒸发皿中。将蒸发皿放在通风橱内于 65℃水浴上通 风挥干，然后放在冰箱内冰却 2－3min 后，准确加入 1ml 苯－乙腈混合液（或 将 CHCl3用浓缩蒸馏器减压吹干蒸干，然后再准确加入 1ml 苯－乙腈混合液）。 用带橡皮头的滴管的管尖将残渣充分混合，如果有苯的结晶析出，则将蒸发皿 取下，继续溶解、混合，晶体则立即消失，再用此滴管吸取上清液转移于 2ml 具塞试管中。 2．样品的测定（单向展开法） （1）薄层板的制备：称取约 3g 硅胶 G，加入相当于硅胶量 2－3 倍左右的 水，用力研磨 1－2min 至成糊状后立即倒入涂布器内，推成 5×20cm，厚度约 0.25mm 的簿层板三块。在空气中干燥大约 15min 后，放入 100℃烘箱内活化 2h， 取出在干燥器中保存。一般可保存 2－3d，若放置时间较长，可再进行干燥活 化后使用。 （2）点样：将簿层板边缘附着的吸附剂刮净，在距薄层板下端 3cm 处做一 个基线，然后在基线上用微量注射器滴加样液。一块板可滴加 4 个点，点距边 缘和点间距约为 1cm，点直径约为 3mm。要求在同一块板上滴加点的大小应一致， 可用吹风机冷风边吹边加。滴加的样点如下： 第一点：10μl、0.04μg/mlAFTB1标准使用液。 第二点：20μl 样品溶液。 第三点：20μl 样液＋10μl 0.04μg/mlAFTB1标准使用液。 第四点：20μl 样液＋10μl 0.2μg/mlAFTB1标准使用液。 （3）展开与观察：加入 10ml 无水乙醚于展开槽内，预展 12cm，取出挥干。 再于另一展开槽内加入 10ml 丙酮：三氯甲烷（8：92）溶剂，展开 10－12cm， 取出在紫外光下观察结果，方法如下： ①第一点滴加 10μlAFTB1标准使用液，其中含 AFTB10.04μg/ml（最低检出 量 5μg/kg）。可作为检验薄层板好坏及色谱是否合适，能检出最低检出量。如果 展开后此点无荧光，则说明薄层板或色谱条件存在问题。 ②第三点和第四点上滴加了样液和 AFTB1标准液，可使样液中的 AFTB1荧光 点和标液 AFTB1荧光点重叠。加以认证。 第三点是用来检验最低检出量在样液中是否能正常呈现，如果第一点呈阳 性，第三点呈阴性则说明样品的提取存在问题，可能存在荧光猝灭剂，应重新