56 提取。 第四点主要是起定位作用。AFTB1的 Rf 值约 0.6。 ③第二点起判断作用。如果第二点(样液)在 AFTB1标准点的相应位置(Rf ≈0.6)处呈阴性,而其它各点均呈阳性,则说明样品中 AFBT1的含量在 5μg/kg (最低检出量)以下,如果第二点在其相应位置上呈阳性,则需进行确证试验。 (4)确证试验:为了证明在薄层板上样液呈现的荧光确系由 AFTB1产生的, 则在样点上滴加三氟乙酸,产生 AFTB1的衍生物,继续展开后,此衍生物的 Rf 值约为 0.1 左右。方法如下: 依次在薄层板左边滴加两个点: 第一点:10μl 0.04μg/mlAFTB1标准使用液。 第二点:20μl 样液。 在以上两点处各加一小滴三氟乙酸盖于其上,经反应 5min 后,用电吹风机 吹热风 2min,热风吹到薄层板上的温度不得高于 40℃,再于薄板右边滴加以下 两点。 第三点:10μl 0.04μg/mlAFTB1标准使用液。 第四点:20μl 样液。 同前展开后,在紫外光下观察样液是否产生与 AFTB1标准点相同的衍生物。 第三点和第四点,可作为样液与标准衍生物的空白对照。 (5)稀释定量:样液中的 AFTB1荧光点的荧光强度与 AFTB1标准点(最低检 出量)的荧光强度一致,则表示样品 AFTB1 含量在 5μg/kg;如样液中荧光强 度比最低检出量强,则根据其强度估计减少点样量或将样液稀释后再点样,直 至样液点的荧光强调与最低检出量的荧光强度一致为止,滴加样式如下: 第一点:10μg/ml AFTB1标使液。 第二点:根据具体情况点 10μl 样液。 第三点:根据具体情况点 15μl 样液。 第四点:根据具体情况点 20μl 样液。 (6)计算: X=0.0004× V m V D 2 1 (3-1) 式中:X —— 样品中 AFTB1的含量,μg/kg; V1 —— 稀释前样液的体积,ml; V2 —— 出现同样最低荧光强度时滴加样液的点样量,μl; D —— 样液的总稀释倍数; m —— 稀释前相当样品的质量,g; 0.0004 —— AFTB1的最低检出量,μg。 注意事项 1.本法的灵敏度较高,容易产生误差。如薄层板制作不平整、不均匀,点56 提取。 第四点主要是起定位作用。AFTB1的 Rf 值约 0.6。 ③第二点起判断作用。如果第二点(样液)在 AFTB1标准点的相应位置(Rf ≈0.6)处呈阴性,而其它各点均呈阳性,则说明样品中 AFBT1的含量在 5μg/kg (最低检出量)以下,如果第二点在其相应位置上呈阳性,则需进行确证试验。 (4)确证试验:为了证明在薄层板上样液呈现的荧光确系由 AFTB1产生的, 则在样点上滴加三氟乙酸,产生 AFTB1的衍生物,继续展开后,此衍生物的 Rf 值约为 0.1 左右。方法如下: 依次在薄层板左边滴加两个点: 第一点:10μl 0.04μg/mlAFTB1标准使用液。 第二点:20μl 样液。 在以上两点处各加一小滴三氟乙酸盖于其上,经反应 5min 后,用电吹风机 吹热风 2min,热风吹到薄层板上的温度不得高于 40℃,再于薄板右边滴加以下 两点。 第三点:10μl 0.04μg/mlAFTB1标准使用液。 第四点:20μl 样液。 同前展开后,在紫外光下观察样液是否产生与 AFTB1标准点相同的衍生物。 第三点和第四点,可作为样液与标准衍生物的空白对照。 (5)稀释定量:样液中的 AFTB1荧光点的荧光强度与 AFTB1标准点(最低检 出量)的荧光强度一致,则表示样品 AFTB1 含量在 5μg/kg;如样液中荧光强 度比最低检出量强,则根据其强度估计减少点样量或将样液稀释后再点样,直 至样液点的荧光强调与最低检出量的荧光强度一致为止,滴加样式如下: 第一点:10μg/ml AFTB1标使液。 第二点:根据具体情况点 10μl 样液。 第三点:根据具体情况点 15μl 样液。 第四点:根据具体情况点 20μl 样液。 (6)计算: X=0.0004× V m V D 2 1 (3-1) 式中:X —— 样品中 AFTB1的含量,μg/kg; V1 —— 稀释前样液的体积,ml; V2 —— 出现同样最低荧光强度时滴加样液的点样量,μl; D —— 样液的总稀释倍数; m —— 稀释前相当样品的质量,g; 0.0004 —— AFTB1的最低检出量,μg。 注意事项 1.本法的灵敏度较高,容易产生误差。如薄层板制作不平整、不均匀,点