第2期 严敏等：杂交玉米水稻和辣椒种子品种真实性和纯度的室内快速鉴定 7 同时具有父，母本的特征带B、MB1和MB2,因 此均为真实的杂交种子 MMBI- FMBI- MMB2- FMB2 MMB3一子里单第鞋里县写 箭头所指为其他品种的种子 B1AB2:母本特征带1和2：MB12和MB3:父本特任待图3杂交玉米粤优1号5种子蛋白质超薄等电聚焦电泳图 12和3 FMBI ,FMB marker band I and 2 Fig 3 图1 maize(cv.Yueyou 1) 电聚焦电泳图谱 seeds of hybnid capsicu FMB- MMB2 箭头所指为其他品种的种子 BB:母本特征带8B1MB2:父本特征带1和 。染交水华优种于蛋白质超等电聚焦电法 图洁 MRI NMB2-mle hind 1 and 2 Fig.4 U'ILIEF electrophoregram of proteins from F seeds of hybrid 图2杂交玉米组合89的斯及父母本种子蛋白质超薄等 nce(cv.Huayougui 99) 电聚焦电泳图谱 Fig.2 UILIEF clectrophoregram of proxteins fiom parental and 5 3 蛋白质是基因表达的直接产物，能够反映不同 有时在无法得到父母本种子的情况下，也可以 基因型之间的差异，区别不同的品种，从而可以用 通过观察F,种子蛋白质超薄等电聚焦电泳图谱的 鉴定杂交种子的品种直实性和纯度.本试验利用和 致性来鉴定杂交种 子的纯度。如果所测种子的纯 子蛋白质超薄等电聚焦电泳技术对杂交玉米、水程 度为100%.则它们的蛋白质带型应完全一致.如种 和辣椒种子进行品种真实性和纯度鉴定，取得了较 子不纯，则会出现不同的带型.从图3可看出有2粒 好的结果.超薄等电聚焦电泳技术是根据不同蛋白 种子的蛋白质带刑与大数种子的蛋白质带刑不 质具有不同的等电点的原理来区分各类蛋白质，具 同，可以初步判定为其他品种的种子 从图4可看出 有分辨率高的优点)，采用超薄等点聚焦电泳技术 有1粒种子的蛋白质带型与大多数种子的蛋白质带 从样品的制备到凝胶脱色只需约5h,因而半个工作 型不同，可以初步判定为其他品种的种子。据此，测 日就可以得到鉴定结果 由于采用水平平板电 定200粒（农作物种子检验规程中规定鉴定纯度时 操作简便，且可以同时点几十个样，加上凝胶超薄 所需要的种子数)种 后，发现杂交玉米粤优 所需药品很少所以成本较低因面该技术值得在 种子中有10粒的带型与其他种子不同，杂交水稻华 品种真实性和种子纯度鉴定上推厂 运用 优桂99下：种子中有22粒的带型与其他种子不同 得出杂交玉米粤优1号F,种子的纯度为95%杂交 参考文献 水稻华优桂99F,种子的纯度为89% C1995-2005 Tsinghua Tongfang Optical Dise Co..Lid All rights reserved同时具有父、母本的特征带 FMB、MMB1 和 MMB2 ,因 此均为真实的杂交种子. FMB1、FMB2 :母本特征带 1 和 2 ;MMB1、MMB2 和 MMB3 :父本特征带 1、2 和 3 FMB1 ,FMB2 : female marker band 1 and 2 ; MMB1 ,MMB2 和 MMB3 :male marker band 1 ,2 and 3 图 1 杂交辣椒组合 1 ×3 的 F1 及父母本种子蛋白质超薄等 电聚焦电泳图谱 Fig. 1 UTLIEF electrophoregram of proteins from parental and F1 seeds of hybrid capsicum FMB :母本特征带 ;MMB1、MMB2 :父本特征带 1 和 2 FMB :female marker band ; MMB1 ,MMB2 :male marker band 1 and 2 图 2 杂交玉米组合 8 ×9 的 F1 及父母本种子蛋白质超薄等 电聚焦电泳图谱 Fig. 2 UTLIEF electrophoregram of proteins from parental and F1 seeds of hybrid maize 有时 ,在无法得到父母本种子的情况下 ,也可以 通过观察 F1 种子蛋白质超薄等电聚焦电泳图谱的 一致性来鉴定杂交种子的纯度. 如果所测种子的纯 度为 100 % ,则它们的蛋白质带型应完全一致 ,如种 子不纯 ,则会出现不同的带型. 从图 3 可看出有 2 粒 种子的蛋白质带型与大多数种子的蛋白质带型不 同 ,可以初步判定为其他品种的种子. 从图 4 可看出 有 1 粒种子的蛋白质带型与大多数种子的蛋白质带 型不同 ,可以初步判定为其他品种的种子. 据此 ,测 定 200 粒(农作物种子检验规程中规定鉴定纯度时 所需要的种子数) 种子后 ,发现杂交玉米粤优 1 号 F1 种子中有 10 粒的带型与其他种子不同 ,杂交水稻华 优桂 99 F1 种子中有 22 粒的带型与其他种子不同 , 得出杂交玉米粤优 1 号 F1 种子的纯度为 95 % ,杂交 水稻华优桂 99 F1 种子的纯度为 89 %. 箭头所指为其他品种的种子 Cultivars other than Yueyou 1 are indicated by ↑ 图 3 杂交玉米粤优 1 号 F1 种子蛋白质超薄等电聚焦电泳图 谱 Fig. 3 UTLIEF electrophoregram of proteins from F1 seeds of hybrid maize (cv. Yueyou 1) 箭头所指为其他品种的种子 Cultivar other than Huayougui 99 is indicated by ↑ 图 4 杂交水稻华优桂 99 F1 种子蛋白质超薄等电聚焦电泳 图谱 Fig. 4 UTLIEF electrophoregram of proteins from F1 seeds of hybrid rice (cv. Huayougui 99) 3 讨论 蛋白质是基因表达的直接产物 ,能够反映不同 基因型之间的差异 ,区别不同的品种 ,从而可以用以 鉴定杂交种子的品种真实性和纯度. 本试验利用种 子蛋白质超薄等电聚焦电泳技术对杂交玉米、水稻 和辣椒种子进行品种真实性和纯度鉴定 ,取得了较 好的结果. 超薄等电聚焦电泳技术是根据不同蛋白 质具有不同的等电点的原理来区分各类蛋白质 ,具 有分辨率高的优点[8 ] . 采用超薄等点聚焦电泳技术 , 从样品的制备到凝胶脱色只需约 5 h ,因而半个工作 日就可以得到鉴定结果[6 ] . 由于采用水平平板电泳 , 操作简便 ,且可以同时点几十个样 ,加上凝胶超薄 , 所需药品很少 ,所以成本较低. 因而 ,该技术值得在 品种真实性和种子纯度鉴定上推广运用. 参考文献 : [1 ] ROSTA K. Variety determination in rice ( Oryza sativa L) 第 2 期 严 敏等 :杂交玉米、水稻和辣椒种子品种真实性和纯度的室内快速鉴定 7 © 1995-2005 Tsinghua Tongfang Optical Disc Co., Ltd. All rights reserved