一、酶促反应速度的测定 酶促反应速度，与普通化学反应一样，既可表示为单位时间内底物浓度的减少，又 可表示为单位时间内产物浓度的增加。但在反应开始， 由于生成由间物 略有差异。在实际测定中，考虑到通常底物量足够大，其减少量很少，而产物由无到有 变化较明显，测定起来较灵敏，所以多用产物浓度的增加作为反应速度的量度。酶促反 应的速度与反应进行的时间有关。以产物生成量(P)为纵坐标，以时间()为横坐标作 图，可得到酶反应过程曲线图（见图41）。 P 图41酶反应过程曲线 从图4-1中可以看出，在反应初期 因是随若反应的进行，底物浓度减少，产物浓度增加，加速反应逆向进行：产物浓度增 加会对酶产生反馈抑制：另外酶促反应系统中H值及温度等微环境变化会使部分酶变性 失活。因此，为了准确表示酶活力都要以初速度表示，酶反应的初速度越大，意味着酶 的催化活力越大。 二、底物浓度对酶促反应速度的影响 (一)底物浓度与酶促反应速度的关系 确定底物浓度(S)与酶促反应速度(V)间关系，是酶促反应动力学的核心内容。 在酶浓度、温度、pH不变的情况下，实验测得，酶反应速度与底物浓度的关系，如图4-2 中的曲线所示。 图42中可以看出：当底物的浓度很低时，V与S]呈直线关系(O段) 这时，随 着底物 是国然 时候V值审法 现为 应。V的极限值，称为酶的最大反应速度，以V表 VS]的变化关系，可用中间产物学说进行解释。在底物浓度较低时，只有少数的酶 与底物作用生成中间产物，在这种情况下，增加底物的浓度，就会增加中间产物，从而 增加酶促反应的速度：但是当底物浓度足够大时，所有的酶都与底物结合生成中间产物， 体系中己经没有游离态的酶了，在底物充分过量的条件下，继续增加底物的浓度，对于 109109 一、酶促反应速度的测定 酶促反应速度，与普通化学反应一样，既可表示为单位时间内底物浓度的减少，又 可表示为单位时间内产物浓度的增加。但在反应开始，由于生成中间产物，二者的大小 略有差异。在实际测定中，考虑到通常底物量足够大，其减少量很少，而产物由无到有， 变化较明显，测定起来较灵敏，所以多用产物浓度的增加作为反应速度的量度。酶促反 应的速度与反应进行的时间有关。以产物生成量（P）为纵坐标，以时间（t）为横坐标作 图，可得到酶反应过程曲线图（见图4-l）。 图4-1 酶反应过程曲线 从图4-1中可以看出，在反应初期，产物增加得比较快，酶促反应的速度（d[P]/dt） 近似为一个常数。随着时间延长，酶促反应的速度便逐渐减弱（即曲线斜率下降）。原 因是随着反应的进行，底物浓度减少，产物浓度增加，加速反应逆向进行；产物浓度增 加会对酶产生反馈抑制；另外酶促反应系统中pH值及温度等微环境变化会使部分酶变性 失活。因此，为了准确表示酶活力都要以初速度表示，酶反应的初速度越大，意味着酶 的催化活力越大。 二、底物浓度对酶促反应速度的影响 （一）底物浓度与酶促反应速度的关系 确定底物浓度（[S]）与酶促反应速度（V）间关系，是酶促反应动力学的核心内容。 在酶浓度、温度、pH不变的情况下，实验测得，酶反应速度与底物浓度的关系，如图4-2 中的曲线所示。 从图4-2中可以看出：当底物的浓度很低时，V与[S]呈直线关系（OA段），这时，随 着底物浓度的增加，反应速度按一定比率加快，为一级反应。当底物的浓度增加到一定 的程度后，虽然酶促反应速度仍随底物浓度的增加而不断地加大，但加大的比率已不是 定值，呈逐渐减弱的趋势（AB段），表现为混合级反应。当底物的浓度增加到足够大的 时候，V值便达到一个极限值，此后，V不再受底物浓度的影响（BC段），表现为零级反 应。V的极限值，称为酶的最大反应速度，以Vmax表示。 V-[S]的变化关系，可用中间产物学说进行解释。在底物浓度较低时，只有少数的酶 与底物作用生成中间产物，在这种情况下，增加底物的浓度，就会增加中间产物，从而 增加酶促反应的速度；但是当底物浓度足够大时，所有的酶都与底物结合生成中间产物， 体系中已经没有游离态的酶了，在底物充分过量的条件下，继续增加底物的浓度，对于