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每一个组分在流出曲线上,都有一个相对应的色谱峰。 如横坐标以时间()表示,那么从进样开始到柱后出现某组分的浓度极大值(即ob段)》 所需要的时间,称为保留时间()。b段称为调整保 以t表 t'R=tR 。其中 称为死时间,即从进样到惰性组分流出曲线浓度极大点的时间 ,如图中oa所表 如果横坐标以体积(V)表示,则色谱峰最高处所对应的体积即b段称为保留体积(以 Vg表示,相应的oa段称为死体积(V),b段为调整保留体积V”=VR一Vu。 保留体积与保留时间两者之间有以下关系: 式心为 司样,VM=F 谱柱内载气的平均流速,即每mm载气流出体积的平均值:单位为mmm。 在一定实验条件中,保留体积或保留时间为某一组分的特性。 在色谱流出曲线中,GH叫基线,GeefH为某组分的峰面积(A)、cd为峰高(h),ef为 峰半高宽度简称半峰宽(Y12)。 楼分定的实约条件下峰面或蜂高为来一组分浓度合量的特征,因此,色瑞流出国 要依据。利用它可以解决以下问题 (1)色谱峰的位置(即保留时间或保留体积)决定于物质的性质,是色谱定性的依据。 (2)色谱峰的高度或面积是组分浓度或含量的量度,是色谱定量的依据。 (3)利用色谱峰的位置与其宽度,可以对色谱柱分离的情况进行评价。 (三)塔板理论 1.塔板理论假定为了研究谱峰的形状,建立起一种半经验式的理论 一塔板理论 用于描述物质在两相间的分配状况和评价柱的效能。塔板理论是把柱子假想成由许多塔板细 成,在每个理论塔板里,组分在气液相间达成一次平衡,经过多次分配平衡后,使组分彼此 分离。为简化起见,塔板理论有如下假设: ()在每块板上气液平衡是瞬间建立的。 2)载气是脉冲式进入色谱柱进行冲洗的,每次恰好为一个板体积 (3)所有组分开始都集中在第零块塔板上,且不考虑纵向扩散。 (4)在所有塔板上,分配系数是常数,也即和组分的量无关。 2.理论塔板数在上述理想情况下,可以认为进人柱子内的样品成分在载气中是呈“正 态分布”的,因而,在记录纸上出现的色谱蜂应为高斯(Guss)曲线。所以色谱峰常用与高 斯曲线宽度相关的某一标准偏差。表示。图4一3表明在不同高度位置上蜂宽度与0的关系。 1.000 ”wg-234 0 0.234 0.01 一理 图4~3用高斯曲线表示的色谢峰 每一个组分在流出曲线上,都有一个相对应的色谱峰。 如横坐标以时间(t)表示,那么从进样开始到柱后出现某组分的浓度极大值(即 ob 段) 所需要的时间,称为保留时间(tR)。ab 段称为调整保留时间,以 t’R表示,t’R=tR—tM。其中, tM称为死时间,即从进样到惰性组分流出曲线浓度极大点的时间,如图中 oa 所表示。 如果横坐标以体积(V)表示,则色谱峰最高处所对应的体积即 ab 段称为保留体积(以 VR表示),相应的 oa 段称为死体积(VM),ab 段为调整保留体积 V’R=VR-VM。 保留体积与保留时间两者之间有以下关系: VR=FC·tR, 同样,VM=FC·tM 式中,FC为色谱柱内载气的平均流速,即每 min 载气流出体积的平均值:单位为 ml/min。 在一定实验条件中,保留体积或保留时间为某一组分的特性。 在色谱流出曲线中,GH 叫基线,GeefH 为某组分的峰面积(A)、cd 为峰高(h),ef 为 峰半高宽度简称半峰宽(Y1/2)。 在一定的实验条件下,峰面积或峰高为某一组分浓度合量的特征,因此,色谱流出曲线 是色谱分析的主要依据。利用它可以解决以下问题: (1)色谱峰的位置(即保留时间或保留体积)决定于物质的性质,是色谱定性的依据。 (2)色谱峰的高度或面积是组分浓度或含量的量度,是色谱定量的依据。 (3)利用色谱峰的位置与其宽度,可以对色谱柱分离的情况进行评价。 (三) 塔板理论 1.塔板理论假定 为了研究谱峰的形状,建立起一种半经验式的理论——塔板理论, 用于描述物质在两相间的分配状况和评价柱的效能。塔板理论是把柱子假想成由许多塔板组 成,在每个理论塔板里,组分在气液相间达成一次平衡,经过多次分配平衡后,使组分彼此 分离。为简化起见,塔板理论有如下假设: (1)在每块板上气液平衡是瞬间建立的。 (2)载气是脉冲式进入色谱柱进行冲洗的,每次恰好为一个板体积. (3)所有组分开始都集中在第零块塔板上,且不考虑纵向扩散。 (4)在所有塔板上,分配系数是常数,也即和组分的量无关。 2.理论塔板数 在上述理想情况下,可以认为进人柱子内的样品成分在载气中是呈“正 态分布”的,因而,在记录纸上出现的色谱峰应为高斯(Gauss)曲线。所以色谱峰常用与高 斯曲线宽度相关的某一标准偏差σ表示。图 4—3 表明在不同高度位置上峰宽度与σ的关系
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