课程代码:BIOL11003504课程名称:改变生活的生物技术姓名:罗啸学号:15307130248 色等 色谱); 生物技术应用方法:脂肪酶富集DHA条件温和、能耗低、操作成本低 产物为DHA和EPA和EA工艺 DHA和EPA可以富集在甘油酯上,在人 甘油酯 体消化道的水解速率更快,更利于人体 消化吸收 市场角度,DHA和EPA的单酰、双酰和 三酰甘油酯更“天然”而畅销; 3技术原理 从深海鱼雷脂肪组织中提炼的鱼油是含有各种脂肪酰成分的甘油三酸酯,在脂肪酶 的催化下,很容易的完成水解、醇解、酸解和酯交换反应,从而使DHA和EPA较多地 以某种形式存在,再经分离,便可达到富集和浓缩DHA和EPA的目的。 3.1水解反应 脂肪酶具有对甘油酯中不同脂肪酸的专一性;具有对三甘酯中不同位置的专 性;通常认为鱼油三甘酯中2-位上连接着EPA、DHA等高度不饱和脂肪酸。利用脂 肪酶对鱼油脂肪酸的专一性,使鱼油中EPA、DHA留存在甘油酯中,切去其他饱和 或低不饱和脂肪酸,使之成为游离酸除去,从而达到EPA、DHA在鱼油甘油酯中 的高含量。在35℃-40℃范围内、油水比1:1、酶浓度400U0g-700U/g油、缓冲 溶液pH6-pH8.5、以异辛烷作溶剂、水解16h20h、水解率控制在53%左右,经 低温脱酸分离,可制备EPA和DHA含量大于50%以上的鱼油甘油酯型产品 在35°C-40℃C范围内、油水比1:1、酶浓度 +2H2O400g70Uvg油 缓冲溶液pH6pH8.5、以异辛烷作溶剂、水 解16h-20h X-COOH+X’COOH+ 图1脂肪酶催化水解反应 3.2酯交换反应 采用酶促乙酯型和甘油酯型酯交换的方法,将乙酯型中的EPA、DHA富集到甘 油酯型当中,得到高含量EPA和DHA的甘油三酯。以K酶为催化剂,反应温度 40℃,加酶量6%,反应时间18h,底物摩尔比20:1.0;以TLIM酶为催化剂,反应 度60℃,加酶量6%,反应时间18h,底物摩尔比20:1.0。6 Yang LY, Kuksis A Myher JJ Lumenal hydrolysis of menhaden and rapeseed oils and their fatty acid methyl and ethyl esters in the rat []. Biochem Cell Biol. 1989 Apr-May, 67(4-5): 192-204 4 Larry D. Lawson, Bronwyn G. Hughes. Human absorption of fish oil fatty acids as triacylglycerols, free acids, or ethyl esters). Biochem Biophys Res Comm, 1988.152: 328s 5吴可克.酶促鱼油选择性水解制备EPA、DHA甘油酯的研究[J.中国油脂.2002(03) 李金章,王玉明,薛长湖,孙兆敏,楼乔明.脂肪酶催化乙酯甘油酯酯交换制备富含EPA和DHA的甘油 酯[.中国油脂.2011(01)课程代码：BIOL110035.04 课程名称：改变生活的生物技术 姓名：罗啸 学号：15307130248 色等 色谱）； 生物技术应用方法： 产物为 DHA 和 EPA 甘油酯 脂肪酶富集 DHA 和 EPA 工艺 条件温和、能耗低、操作成本低； DHA 和 EPA 可以富集在甘油酯上，在人 体消化道的水解速率更快 3，更利于人体 消化吸收 4； 市场角度，DHA 和 EPA 的单酰、双酰和 三酰甘油酯更“天然”而畅销； 3 技术原理 从深海鱼雷脂肪组织中提炼的鱼油是含有各种脂肪酰成分的甘油三酸酯，在脂肪酶 的催化下，很容易的完成水解、醇解、酸解和酯交换反应，从而使 DHA 和 EPA 较多地 以某种形式存在，再经分离，便可达到富集和浓缩 DHA 和 EPA 的目的。 3.1 水解反应 脂肪酶具有对甘油酯中不同脂肪酸的专一性；具有对三甘酯中不同位置的专一 性;通常认为鱼油三甘酯中 2-位上连接着 EPA、DHA 等高度不饱和脂肪酸。利用脂 肪酶对鱼油脂肪酸的专一性，使鱼油中 EPA、DHA 留存在甘油酯中,切去其他饱和 或低不饱和脂肪酸，使之成为游离酸除去，从而达到 EPA、DHA 在鱼油甘油酯中 的高含量。在 35℃—40℃范围内、油水比 1∶1、酶浓度 400U/g—700 U/g 油、缓冲 溶液 pH6—pH8.5、以异辛烷作溶剂、水解 16 h—20 h、水解率控制在 53%左右，经 低温脱酸分离，可制备 EPA 和 DHA 含量大于 50%以上的鱼油甘油酯型产品。 5 图 1 脂肪酶催化水解反应 3.2 酯交换反应 采用酶促乙酯型和甘油酯型酯交换的方法,将乙酯型中的 EPA、DHA 富集到甘 油酯型当中,得到高含量 EPA 和 DHA 的甘油三酯。以 K 酶为催化剂,反应温度 40℃ ,加酶量 6%,反应时间 18h,底物摩尔比 2.0∶1.0;以 TLIM 酶为催化剂,反应温 度 60℃ ,加酶量 6%,反应时间 18h,底物摩尔比 2.0∶1.0。 6 3 Yang LY, Kuksis A. Myher JJ. Lumenal hydrolysis of menhaden and rapeseed oils and their fatty acid methyl and ethyl esters in the rat[J]. Biochem Cell Biol. 1989 Apr-May;67(4-5):192-204. 4 Larry D. Lawson, Bronwyn G. Hughes. Human absorption of fish oil fatty acids as triacylglycerols, free acids, or ethyl esters[J]. Biochem Biophys Res Comm, 1988.152:328s 5 吴可克. 酶促鱼油选择性水解制备 EPA、DHA 甘油酯的研究[J]. 中国油脂. 2002(03) 6 李金章,王玉明,薛长湖,孙兆敏,楼乔明. 脂肪酶催化乙酯甘油酯酯交换制备富含 EPA 和 DHA 的甘油三 酯[J]. 中国油脂. 2011(01)