华中农业大学创建国家精品课程——细胞工程 004-7 Carrel(1911)发现了鸡胚浸出液对于某些细胞的生长具有很强的促进效应,还把无 菌技术引到了组织培养技术中。作为他的技术标志是,他在不含抗菌素的培养条件下使 鸡胚心脏细胞维持生存了34年,先后继代3400次,证明动物细胞有可能在体外无限地 生长。 1914年, Thomson创立了另一条完全不同的体外组织培养途径一器官培养法,以后 又被 Strangeways和Fe|所发展。 1940年, Earle建立了可以无限传代的一个CH小鼠的结缔组织细胞系一L系。二是 1951年,Gay建立了第一个人体细胞系一人体宫颈癌Hla细胞系 三.细胞融合技术的建立和杂交瘤技术的诞生 1958年, Okada发现紫外灭活的仙台病毒可引起艾氏腹水瘤细胞彼此融合。由于仙台 病毒能稳定地诱发细胞融合而引起了许多科学家的兴趣,60年代, Harris(1965)诱导不 同的动物体细胞融合获得成功并能存活下来。 Lifflefield(1964)根据亲本细胞的酶缺陷型, 利用HAT选择性培养基能使亲本细胞死亡而只留下异型融合细胞,并能不断地增殖, 从此形成了细胞融合到杂种细胞选择、培养的一整套技术。使这一技术在此后广泛地应用 于遗传学、病毒学、免疫学、细胞学等多种学科的研究工作中 1975年,免疫学家 Kohler和 Milstein利用仙台病毒诱导绵羊红细胞免疫的小鼠脾细 胞与小鼠骨髓瘤细胞融合,选择到能分泌单一抗体的杂种细胞。该杂种细胞具有在小鼠 体内和体外培养条件下大量繁殖的能力,并能长期地分泌单克隆抗体,从而建立了小鼠 淋巴细胞杂交瘤技术。这一技术的诞生把细胞融合技术从实验阶段推向了应用研究阶段 促进了动物细胞工程的蓬勃发展 四.动物克隆技术的建立 l891, Heape等人首次报道了家兔胚胎移植成功的结果,他们把安哥拉家兔胚胎移 植给比利时兔,得到了4只安哥拉家兔 本世纪30年代以后,先后在羊、猪、牛等动物的胚胎移植上获得成功。经过几十年的 不断完善和充实,已成为一项比较成熟的繁殖生物学技术。 首例克隆动物成功的报道是在1962年,英国学者 Grudon把非洲爪蟾小肠上皮细胞 的核注入同种或异种非洲爪蟾未受精卵(经紫外线照射杀死卵细胞核)中,约有1%的重 组卵发育成为成熟蛙 这一成功开创了由体细胞培育动物个体的新型实验途径,其贡献在于:实验证明了华中农业大学创建国家精品课程——细胞工程学 2004-7 主讲教师：柳俊博士、教授 今。 Carrel (1911)发现了鸡胚浸出液对于某些细胞的生长具有很强的促进效应，还把无 菌技术引到了组织培养技术中。作为他的技术标志是，他在不含抗菌素的培养条件下使 鸡胚心脏细胞维持生存了 34 年，先后继代 3400 次，证明动物细胞有可能在体外无限地 生长。 1914 年，Thomson 创立了另一条完全不同的体外组织培养途径－器官培养法，以后 又被 Strangeways 和 Fell 所发展。 1940 年，Earle 建立了可以无限传代的一个 C3H 小鼠的结缔组织细胞系－L 系。二是 1951 年，Gay 建立了第一个人体细胞系－人体宫颈癌 Hela 细胞系 三. 细胞融合技术的建立和杂交瘤技术的诞生 1958 年, Okada 发现紫外灭活的仙台病毒可引起艾氏腹水瘤细胞彼此融合。由于仙台 病毒能稳定地诱发细胞融合而引起了许多科学家的兴趣，60 年代，Harris(1965)诱导不 同的动物体细胞融合获得成功并能存活下来。Lifflefield(1964)根据亲本细胞的酶缺陷型， 利用 HAT 选择性培养基能使亲本细胞死亡而只留下异型融合细胞，并能不断地增殖， 从此形成了细胞融合到杂种细胞选择、培养的一整套技术。使这一技术在此后广泛地应用 于遗传学、病毒学、免疫学、细胞学等多种学科的研究工作中。 1975 年，免疫学家 Kohler 和 Milstein 利用仙台病毒诱导绵羊红细胞免疫的小鼠脾细 胞与小鼠骨髓瘤细胞融合，选择到能分泌单一抗体的杂种细胞。该杂种细胞具有在小鼠 体内和体外培养条件下大量繁殖的能力，并能长期地分泌单克隆抗体，从而建立了小鼠 淋巴细胞杂交瘤技术。这一技术的诞生把细胞融合技术从实验阶段推向了应用研究阶段， 促进了动物细胞工程的蓬勃发展。 四. 动物克隆技术的建立 1891，Heape 等人首次报道了家兔胚胎移植成功的结果，他们把安哥拉家兔胚胎移 植给比利时兔，得到了 4 只安哥拉家兔。 本世纪 30 年代以后，先后在羊、猪、牛等动物的胚胎移植上获得成功。经过几十年的 不断完善和充实，已成为一项比较成熟的繁殖生物学技术。 首例克隆动物成功的报道是在 1962 年，英国学者 Grudon 把非洲爪蟾小肠上皮细胞 的核注入同种或异种非洲爪蟾未受精卵(经紫外线照射杀死卵细胞核)中，约有 1％的重 组卵发育成为成熟蛙。 这一成功开创了由体细胞培育动物个体的新型实验途径，其贡献在于：实验证明了 4