1998,32(4):9~12/叶筲平等 中国兽药杂志 Comparison of the Selective Culture Mediums of Aeromonas Hydrophila LING Hongli, LU Chengping * CHEN Huaiqing, MA Xiangdong College of Veterinary Medicine, Naniing Agriculture University Nanjing 210095 Abstract Each of the 121 Aeromonas hydrophila strains were cultured on each of the three selective mediums. AHM ( Aeromonas hydrophila Medium ) APM Aeromonas Pyrazinamidase Activity Medium)and RS(Rimler-Shotts Medium). The rate of detection by the three mediums was 54.,. 33% and 83. 54% respectively. The strains whose xidase were positive in AhM or RS may be preliminaryly identified as Ah. AHM and Rs ere recommended for identification of Ah strains from clinic samples key words Aeromonas hydrophila, Selective cultures, Comparison 草鱼出血病细胞培养灭活疫苗生产工艺的比较 雪平杨广智。罗毅志曹铮 浙江省淡水水产研究所,翻州313001 收稿日期:1998-03-02 233, Iq 摘妟比较了方瓶静置培养、10×20oml转管培细胞疫苗工厂化生 这的.组过几 养和细胞生物反应器做载体培养3种方法增殖细胞种生产工艺的比较研究,认为细胞生物反应 和病毒的效率,以细胞生物反应器傲载体培养法的器微载体悬浮培养增殖细胞和病毒作为疫苗 效率最高,与静置培养法相比,单位培养液细胞堆生产工艺具有明显优势。现将研充方法和结 殖量提高20~25倍,病毒增殖量TCID2o测定增加果报道如下。 1.65时数值LD测定增加145对数值。经济效益 比较,疫苗削备的培养液成本,以细胞生物反应器激 1材料和方法 载体培养法最低。已研究出以细胞生物反应器嫩戴1.1细胞和病毒采用本所建立的草鱼吻 体培养法增殖细驰和瘸毒为基本生产工艺的工厂化端组织细胞株ZC-7901和草鱼胚胎细胞CP 生产草鱼出血病细胞疫苗工艺流程 细胞株由本所建株并保存)。草鱼出血病 关词草鱼出血细胞疫生产工艺 病毒株为本所筛选的ZV-8909(由本所鉴定 和保管)。以适应培养法培养和增殖病毒口 草鱼出血病是我国淡水渔业中危害严重1.2培养液和维持液细胞生长的培养液 的病毒性鱼病,我国从70年代开始,相继研为添加10%小牛血清的199培养液,内含 究成功草鱼出血病组织疫苗和细胞疫苗免疫100uU/ml青霉素和100g/m1链霉素,pH7 防治草鱼出血病,在生产上收到了较好的效4~7.6。微载体悬浮培养液的维持液为含 果全国各地普遍推广应用。我们在建立敏感2%~5%小牛血清的培养液,其余同静置培 细胞株和筛选出免变原性强的毒株以及实验养的维持液 室制备细胞疫黄获得成功的基础上进行了1.3方瓶静置培养采用200ml玻璃方1998，32(4)：9～12／叶雪 平等 中国兽药杂志 ·9· Comparison oftheSelectiveCultureMediumsofAeromonasHydrophila LING Hongli．LU Chengping ，CHEN Huaiqing，M A Xiangdong C~llegeofVeteriaaryMedicine·NanjingAgricultureUniversity·Nanjing210095 Abstract Eachofthe 121Aeromonas drophila strainswere cuhured on each ofthethree selective mediums． AHM (Aeromonas hydrophila M edium ) ， APM (Aeromonas PyrazinamidaseActivityMedium)andRS(Rimler—ShottsM edium )．Therateofdetectionby the three mediums was 54．76 ，81．33 and 83．54 respectively．The strains whose oxidase were positive in AHM orRS may be preliminaryly identified as Ah．AH M and RS wererecom mended foridentification ofAh strainsfrom clinicsam ples． keY words Aeromonas^vdrophila，Selectivecultures，Comparison * Correspondk~ author 摘 草鱼出血病细胞培养灭活疫苗生产工艺的比较 养和 细胞生物反应器徽载体培 养 3种方 法增殖细 胞 和痛 毒 的效率 ，以细胞 生物反 应器徽 载体培 养法 的 效 率最高，与静 置培 养法相 比较 ，单位 培养液细 胞增 殖量 提 高 20～25倍 ，痛 毒增殖 量 TCID 测 定增 加 1．65对数值 ，LD 测定 增加 1．45对数值 。经济效益 比较 ．疫 苗制 备的培 养液咸丰 ，以细胞生物反应 器徽 载体 培养法最低。 已研 宽出以细胞 生物反应器馓 载 体培 养法增殖细胞和病毒为基丰 生产 工艺 的工厂化 草鱼出血病是我国淡水渔业中危害严重 的病毒性鱼病，我国从 70年代开始 ，相继研 究成功草鱼出血病组织疫苗和细胞疫苗免疫 防治草鱼出血病 ，在生产上收到 了较好的效 果 ，全国各地普遍推广应用。我们在建立敏感 细胞株和筛选 出免疫原性强的毒株以及实验 室制备细胞疫苗获得成功 的基础上 ，进行 了 I } 。 种 生产工艺的 比较研 究，认为细胞生物反应 器微载体悬浮培养增殖细胞和病毒作为疫苗 生产工艺具有明显优势。现将研究方法和结 果报道如下。 1 材料和方法 1．1 细胞和病毒 采用本所 建立的草鱼 吻 端组织细胞株 ZC一7901和草鱼胚胎细胞 CP一 80(细胞株由本所建株并保存 )。草鱼出血病 病毒株为本所筛选 的 zV一8909(由本所鉴定 和保管 )。以适应培养法培养和增殖病毒 ]。 1．2 培养液和维持液 细胞 生长的培养液 为 添加 l0 小牛 血清 的 199培养 液 ，内含 1001U／ml青霉索和 lO0~g／ml链霉紊，pH7． 4～7．6。微载体 悬浮培养液 的维持液 为含 2 ～5 小牛血清的培养液．其余同静置培 养的维持液。 1．3 方瓶 静置培养 采用 2000ml玻璃方 维普资讯 http://www.cqvip.com