正丁醇,不会使组织收缩和变硬,不必经过透明剂直接浸蜡。 (三)透明 脱水后组织中水分被透明剂所代替称透明。常用的脱水剂如乙醇等不能溶解石蜡与之相混合,因此在浸蜡之前 必须使用一种既可以同乙醇又能同石蜡相混合的媒剂,以便使石蜡渗入到组织中去,当组织中全部为媒剂取代时, 光线可以透过,组织呈现不同程度的透明状态,此现象就称透明,所用媒剂为透明剂。实质上透明仅是一种过程而 非目的,其所以出现透明现象是因其折光系数改变的缘故。组织一旦呈现透明状态,说明脱水剂已被媒剂所取代 就可以将组织浸入溶解的石蜡进行浸蜡。透明剂很多,常用的有:二甲苯,苯,甲苯,氯仿,香桕油等 1.二甲苯( xylene)是最为常用的一种透明剂,易挥发、无色透亮液体,长期接触对呼吸道黏膜有刺激作 用,它能与乙醇,丙酮相混合,又是石蜡的溶剂。在透明过程中,能使组织发生硬化、收缩、变脆,且作用迅速 因此,组织在二甲苯中时间不宜过长,一般是达到组织的透明为止,一般需0.5-1h 2.甲苯( toluene)性质同二甲苯,优点是对组织块收缩较小,但透明较慢,一般需60h左右,也易变脆。有时 用以代替二甲苯 3.苯( benzene)与二甲苯相似,它较甲苯和二甲苯的作用稍缓,对组织收缩较少,不易变脆,一般需60h左 右,但苯较二甲苯毒性大,挥发快,易燃,吸入能引起中毒,故应注意安全使用。 4.氯仿( chloroform)即三氯甲烷。也是一种很好的透明剂,它的作用缓和,透明能力比二甲苯、苯差,透明时 间12-24h,组织在此液内不易变硬变脆,这一点较苯,二甲苯和甲苯优良。但氯仿比重较大,折光率较小,组织在 氯仿中不易呈现二甲苯那样的透明现象,所以组织要比实际需要浸渍更长一些时间保证完全渗透和置换出酒精。 5.To型生物制片透明剂是近年来针对二甲苯挥发性大,对人体有害而研制的一种替代透明剂,认为I0的优点是 无毒,对组织软硬适中,收缩性小,制片后染色效果好。 透明时间的长短因组织的大小而异。例如脑组织和有血块的组织,应缩短在二甲苯内留置时间,而一些肌肉组 织和胃肠组织则应该稍延长在二甲苯内留置时间,最好先投入乙醇和透明剂等量混合液半小时,再入透明剂,并更 换一次透明剂,待组织完全透明后进行浸蜡,一般需要0.5h至2-3h。脂肪组织由于其结构不同透明最快,但是这 并不能说明组织中脱水剂已完全被透明剂取代,因脂肪组织本身折光率与透明剂(二甲苯)相近,所以应在透明剂 中多浸一段时间使脂肪组织尽可能为透明剂所溶解,才有利于石蜡的侵入。 (四)浸腊 组织经透明后,移入熔化的石蜡内浸渍,石蜡逐渐浸λ组织间隙,取代透明剂,这一过程叫浸蜡。其目的是以 石蜡置换出组织中的二甲苯,使较软的组织块变成有一定硬度的组织蜡块,以便切成薄片。浸蜡的方法是将组织块 经过二甲苯透明后,立即投入到溶化的石蜡中去,浸蜡时组织必须经过数次纯石蜡(石蜡1、2、3),使剩余透明 剂完全去除 石蜡根据熔点不同分软蜡和硬蜡,软蜡熔点低,硬蜡熔点高,一般切片所有软蜡的熔点为42-45℃,45 50℃,硬蜡熔点为52-54℃,56-60℃,现在也有62一64℃的硬蜡。使用时应根据组织类型以及制片时的温度和气 候而异。夏季采用高熔点的石蜡,冬季则采用低熔点的石蜡。组织较硬时,用硬蜡,反之,用软蜡。浸蜡需要能 够保持于54-60℃温箱内进行,一般箱内温度略高于石蜡解点2-3℃即可。 组织浸蜡时间也应视组织种类大小和结构不同而异,基本上与组织固定时间成正比。也要考虑组织的种类, 骨、皮肤和中枢神经系统等致密组织要比软组织如肝肾等需要加倍时间;含血多的组织,肌肉和纤维束在蜡内易过 硬而发脆,故浸蜡时间应缩短:疏松组织,脂眆,消化道组织等浸蜡时间可以适当延长一些。为了尽可能排除透明 剂,浸蜡可以分两级或三级进行。以熔点较低的软石蜡作为第一步(石蜡1),然后再换为熔点较高的石蜡作为第 二步(石蜡2),第三步(石蜡3)。浸蜡时间1一4h,或更长 五)包埋正丁醇，不会使组织收缩和变硬，不必经过透明剂直接浸蜡。  (三)透明 脱水后组织中水分被透明剂所代替称透明。常用的脱水剂如乙醇等不能溶解石蜡与之相混合，因此在浸蜡之前 必须使用一种既可以同乙醇又能同石蜡相混合的媒剂，以便使石蜡渗入到组织中去，当组织中全部为媒剂取代时， 光线可以透过，组织呈现不同程度的透明状态，此现象就称透明，所用媒剂为透明剂。实质上透明仅是一种过程而 非目的，其所以出现透明现象是因其折光系数改变的缘故。组织一旦呈现透明状态，说明脱水剂已被媒剂所取代， 就可以将组织浸入溶解的石蜡进行浸蜡。透明剂很多，常用的有：二甲苯，苯，甲苯，氯仿，香柏油等。  1.二甲苯（xylene） 是最为常用的一种透明剂，易挥发、无色透亮液体，长期接触对呼吸道黏膜有刺激作 用，它能与乙醇，丙酮相混合，又是石蜡的溶剂。在透明过程中，能使组织发生硬化、收缩、变脆，且作用迅速， 因此，组织在二甲苯中时间不宜过长，一般是达到组织的透明为止，一般需0.5-1h。  2.甲苯（toluene）性质同二甲苯，优点是对组织块收缩较小，但透明较慢，一般需60h左右，也易变脆。有时 用以代替二甲苯。  3.苯（benzene） 与二甲苯相似，它较甲苯和二甲苯的作用稍缓，对组织收缩较少，不易变脆，一般需60h左 右，但苯较二甲苯毒性大，挥发快，易燃，吸入能引起中毒，故应注意安全使用。  4.氯仿(chlorofoem)即三氯甲烷。也是一种很好的透明剂，它的作用缓和，透明能力比二甲苯、苯差，透明时 间12-24h，组织在此液内不易变硬变脆，这一点较苯，二甲苯和甲苯优良。但氯仿比重较大，折光率较小，组织在 氯仿中不易呈现二甲苯那样的透明现象，所以组织要比实际需要浸渍更长一些时间保证完全渗透和置换出酒精。  5.TO型生物制片透明剂是近年来针对二甲苯挥发性大，对人体有害而研制的一种替代透明剂，认为TO的优点是 无毒，对组织软硬适中，收缩性小，制片后染色效果好。  透明时间的长短因组织的大小而异。例如脑组织和有血块的组织，应缩短在二甲苯内留置时间，而一些肌肉组 织和胃肠组织则应该稍延长在二甲苯内留置时间，最好先投入乙醇和透明剂等量混合液半小时，再入透明剂，并更 换一次透明剂，待组织完全透明后进行浸蜡，一般需要0.5h至2-3h。 脂肪组织由于其结构不同透明最快，但是这 并不能说明组织中脱水剂已完全被透明剂取代，因脂肪组织本身折光率与透明剂（二甲苯）相近，所以应在透明剂 中多浸一段时间使脂肪组织尽可能为透明剂所溶解，才有利于石蜡的侵入。  （四）浸腊 组织经透明后，移入熔化的石蜡内浸渍，石蜡逐渐浸入组织间隙，取代透明剂，这一过程叫浸蜡。其目的是以 石蜡置换出组织中的二甲苯，使较软的组织块变成有一定硬度的组织蜡块，以便切成薄片。浸蜡的方法是将组织块 经过二甲苯透明后，立即投入到溶化的石蜡中去，浸蜡时组织必须经过数次纯石蜡（石蜡1、2、3），使剩余透明 剂完全去除。  石蜡根据熔点不同分软蜡和硬蜡，软蜡熔点低，硬蜡熔点高，一般切片所有软蜡的熔点为42－45℃，45－ 50℃，硬蜡熔点为52－54℃，56－60℃，现在也有62－64℃的硬蜡。使用时应根据组织类型以及制片时的温度和气 候而异。夏季采用高熔点的石蜡，冬季则采用低熔点的石蜡。 组织较硬时，用硬蜡，反之，用软蜡。浸蜡需要能 够保持于54－60℃温箱内进行，一般箱内温度略高于石蜡解点2－3℃即可。  组织浸蜡时间也应视组织种类大小和结构不同而异，基本上与组织固定时间成正比。也要考虑组织的种类， 骨、皮肤和中枢神经系统等致密组织要比软组织如肝肾等需要加倍时间；含血多的组织，肌肉和纤维束在蜡内易过 硬而发脆，故浸蜡时间应缩短；疏松组织，脂肪，消化道组织等浸蜡时间可以适当延长一些。为了尽可能排除透明 剂，浸蜡可以分两级或三级进行。以熔点较低的软石蜡作为第一步（石蜡1），然后再换为熔点较高的石蜡作为第 二步（石蜡2），第三步(石蜡3)。浸蜡时间1－4h，或更长。  （五）包埋