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果被分离物质亲脂性较强,应选用吸附性较强(高活度)的吸附剂和极性较小的 展开剂。 在实际工作中,由于吸附剂、被分离物质及展开剂三者之间,前两者的性 质在一定条件下是固定的,因此,选择合适的展开剂是提高薄层分离效率的关键 为了达到良好的分离效果,消除斑点的拖尾现象,并使斑点轮廓清晰,展开剂通 常采用两种或两种以上有机溶剂组成的混合溶剂系统。这种混合溶剂系统由“基 础溶剂”(即底剂)和“洗脱溶剂”(即推进剂)组成。底剂通常用极性小的溶剂, 如丙酮、乙醇、甲醇、乙酸乙酯等。由于展开系统极性过强或过弱,均会影响色 谱分离效果,展开剂极性过强,绝大多数组分被推至前沿重叠;而过弱则绝大多 数组分留在原点附近而不能分离。因此。使用时,需通过调节底剂和推进剂的比 例来改变展开剂的极性,使被分离物质得到更好的分离效果。通常希望展开后, 被测组分的比移值(即试样斑点中心至原点距离与溶剂前沿至原点的距离的比值, Rate of flow,简写Rf)在02~0.8分离。 三、薄层色谱操作步骤 薄层色谱操作一般包括制板、点样、展开、显色、定性、定量等几个步骤。 ()薄层板的制备 常用玻璃板作为载板,预先必须清洗干净,并且晾干。制备时根据玻板的大 小和所需薄层的厚度,按每100cm称取1.0~1.5g置研钵中,加2~3倍量水,适当 硏磨,调成匀浆,迅速倒于干洁的玻板上,用玻棒将吸附剂铺平,振动玻板,使 吸附剂均匀分布,然后先自然晾干再根据需要进行活化。 薄层制备时的注意事项: 1、吸附剂的加液量必须适宜,加液量过多,吸附剂不易形成凝胶,固化时 间延长,且容易留下波纹状痕印或斑迹。加液量过少,凝胶化过速容易堆积过厚, 不仅涂布不匀,而且易造成薄层龟裂或皱褶。 2、研磨时,不宜过于剧烈,以免产生气泡,造成薄层上有麻点 3、调制匀浆时间应适宜,一般研磨时间以1~2min为宜。时间过长会使凝胶 水分溢出,结构破坏,并在研钵上自行固化,以致无法涂布 第8页共17页第 8 页 共 17页 - - 果被分离物质亲脂性较强,应选用吸附性较强(高活度)的吸附剂和极性较小的 展开剂。 在实际工作中,由于吸附剂 、被分离物质及展开剂三者之间,前两者的性 质在一定条件下是固定的,因此,选择合适的展开剂是提高薄层分离效率的关键。 为了达到良好的分离效果,消除斑点的拖尾现象,并使斑点轮廓清晰,展开剂通 常采用两种或两种以上有机溶剂组成的混合溶剂系统。这种混合溶剂系统由“基 础溶剂”(即底剂)和“洗脱溶剂”(即推进剂)组成。底剂通常用极性小的溶剂, 如丙酮、乙醇、甲醇、乙酸乙酯等。由于展开系统极性过强或过弱,均会影响色 谱分离效果,展开剂极性过强,绝大多数组分被推至前沿重叠;而过弱则绝大多 数组分留在原点附近而不能分离。因此。使用时,需通过调节底剂和推进剂的比 例来改变展开剂的极性,使被分离物质得到更好的分离效果。通常希望展开后, 被测组分的比移值(即试样斑点中心至原点距离与溶剂前沿至原点的距离的比值, Rate of flow,简写 Rf)在 0.2~0.8 分离。 三、薄层色谱操作步骤 薄层色谱操作一般包括制板、点样、展开、显色、定性、定量等几个步骤。 ㈠ 薄层板的制备 常用玻璃板作为载板,预先必须清洗干净,并且晾干。制备时根据玻板的大 小和所需薄层的厚度,按每 100cm 称取 1.0~1.5g 置研钵中,加 2~3 倍量水,适当 研磨,调成匀浆,迅速倒于干洁的玻板上,用玻棒将吸附剂铺平,振动玻板,使 吸附剂均匀分布,然后先自然晾干再根据需要进行活化。 薄层制备时的注意事项: 1、吸附剂的加液量必须适宜,加液量过多,吸附剂不易形成凝胶,固化时 间延长,且容易留下波纹状痕印或斑迹。加液量过少,凝胶化过速容易堆积过厚, 不仅涂布不匀,而且易造成薄层龟裂或皱褶。 2、研磨时,不宜过于剧烈,以免产生气泡,造成薄层上有麻点。 3、调制匀浆时间应适宜,一般研磨时间以 1~2min 为宜。时间过长会使凝胶 水分溢出,结构破坏,并在研钵上自行固化,以致无法涂布
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