1274 张东,等.组蛋白去乙酰化酶抑制剂协同紫杉醇对人肺癌细胞株抑制作用及机制 6 图5各组细胞核形态的变化( Hoechst33342×20) Figure 5 Nuclear morphology of each group of cells stained with Hoechst 33342(X20) A, H1299 cells control (H1299 cells nuclei are round and oval, and a small number of them half-moon B, H1299 cells treated with TSA for 12 h ( H1299 cell nuclei show horseshoe-like changes accompanied by multi-core and death of the phenomenon, such as vacuolar degeneration C, H1299 cells treated with TAX for 24 h (H1299 cell nuclei show horseshoe-like changes accompanied by multi-core and death of the phenomenon, such as vacuolar degeneration, a small number of apoptotic bodies ): D, H1299 cells treated with TF(H1299 cell nuclei show horseshoe-like changes: accompanied by multi-core and death of the phenomenon uch as vacuolar degeneration, a small number of apoptotic bodies); E, H322 cells control (H322 cells show round nuclei, including a small number of oval-shaped nuclei): F, H322 cells treated with TSA for 12 h(a small amount of H322 cell nuclei fragmentation and a small number of apoptotic bodies are shown G, H322 cells treated with TAX for 24 h (more H322 cell nuclei fragmentation, dissolution, and more apoptotic bodies are shown ) H, H322 cells treated with TF (more H322 cell nuclei fragmentation, dissolution, and more apoptotie bodies are shown) 3讨论 这一结果提示联合用药会因细胞特性的不同而产 生不同效果。 化疗是治疗肿瘤的主要方法,但由于耐药率 HDAC抑制剂通过引起细胞周期阻滞和诱 的上升,化疗的有效率一直不尽如人意。近年的研导细胞凋亡达到抑制肿瘤生长的目的。不同 究发现,HDAC抑制剂可以通过抑制信号转导网HDAC抑制剂作用于不同细胞,会出现不同的细 络,影响细胞增殖及细胞对化疗药物的敏感性口。胞周期改变。 Blagosklonny等的研究显示,TSA HDAC抑制剂联合化疗可能会减少化疗的耐药率,和丁酸导致A549细胞阻滞于G1期,而DP则导致 提高化疗的有效率。 Fino等口应用HDAC抑制剂A549细胞周期阻滞于G2/M期。本研究结果显示, LAQ824与多种化疗药物同时作用于乳腺癌细胞,TSA导致H1299和H322细胞周期阻滞于G1期, 发现LAQ824可以增强紫杉醇、吉西他滨等化疗药较单独用药更为复杂的是,联合用药后的细胞周 物诱导的细胞凋亡,提高乳腺癌细胞对化疗药物期改变。TSA与紫杉醇联合应用后,在H1299细胞 的敏感性。 Imanishi等的研究显示,HDAC抑制剂维持或增加了G1期阻滞,而在H322细胞则出现 都可以增加紫杉醇致肿瘤细胞死亡作用。本研究G2及S期的阻滞;紫杉醇主要在G2期发挥功能 结果显示,HDAC抑制剂TSA与紫杉醇联合应用,G1期阻滞相对减少了紫杉醇作用的靶细胞数,因 能提高紫杉醇对肺腺癌细胞HI29及H322的抑此G1期的细胞阻滞可能会影响紫杉醇的药物敏感 制率,使紫杉醇对两种细胞的ICs明显下降,提高性。在本研究中,我们所检测的细胞周期变化是 对这两种细胞的抑制敏感性。但联合用药后紫杉36h内的早期变化,结合细胞生长抑制曲线的结 醇对两种细胞的ICo下降程度却不同,对H322细果,早期G1期的阻滞并不会降低紫杉醇的细胞生 胞的ICs下降约7倍,而对H1299细胞下降2倍,长抑制能力,因为HDAC抑制剂诱导G1期的阻! " # $ % & ’ ( 图 ) 各组细胞核形态的变化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’# (C22 ,+::. /8+;/+A B5/- K!N ?*8 2D - !<*8+ (C22 ,+:: @7,:+5 ?8;6<+@/;/5*@# A5..*:7/5*@# ;@A <*8+ ;=*=/*/5, I*A5+. ;8+ .-*B@"$ (# (C22 ,+::. /8+;/+A B5/- K& !<*8+ (C22 ,+:: @7,:+5 ?8;6<+@/;/5*@# A5..*:7/5*@# ;@A <*8+ ;=*=/*/5, I*A5+. ;8+ .-*B@"O 张 东!等P 组蛋白去乙酰化酶抑制剂协同紫杉醇对人肺癌细胞株抑制作用及机制 ! 讨 论 化疗是治疗肿瘤的主要方法# 但由于耐药率 的上升#化疗的有效率一直不尽如人意% 近年的研 究发现#($!# 抑制剂可以通过抑制信号转导网 络# 影响细胞增殖及细胞对化疗药物的敏感性&2’ % ($!# 抑制剂联合化疗可能会减少化疗的耐药率# 提高化疗的有效率% &75@* 等&C’ 应用 ($!# 抑制剂 Q!RS21 与多种化疗药物同时作用于乳腺癌细胞# 发现 Q!RS21 可以增强紫杉醇(吉西他滨等化疗药 物诱导的细胞凋亡# 提高乳腺癌细胞对化疗药物 的敏感性% T<;@5.-5 等&1’ 的研究显示#($!# 抑制剂 都可以增加紫杉醇致肿瘤细胞死亡作用% 本研究 结果显示#($!# 抑制剂 KL! 与紫杉醇联合应用# 能提高紫杉醇对肺腺癌细胞 (F2GG 及 (C22 的抑 制率#使紫杉醇对两种细胞的 T#)E 明显下降#提高 对这两种细胞的抑制敏感性% 但联合用药后紫杉 醇对两种细胞的 T#)E 下降程度却不同#对 (C22 细 胞的 T#)E 下降约 U 倍#而对 (F2GG 细胞下降 2 倍# 这一结果提示联合用药会因细胞特性的不同而产 生不同效果% ($!# 抑 制 剂 通 过 引 起 细 胞 周 期 阻 滞 和 诱 导 细 胞 凋 亡 达 到 抑 制 肿 瘤 生 长 的 目 的 % 不 同 ($!#抑制剂作用于不同细胞# 会出现不同的细 胞周期改变% ":;6*.M:*@@> 等&)’ 的研究显示#KL! 和丁酸导致 !)1G 细胞阻滞于 ’F 期#而 $V 则导致 !)DG 细胞周期阻滞于 ’2 W X 期% 本研究结果显示# KL! 导致 (F2GG 和 (C22 细胞周期阻滞于 ’F 期# 较单独用药更为复杂的是# 联合用药后的细胞周 期改变% KL! 与紫杉醇联合应用后#在 (F2GG 细胞 维持或增加了 ’F 期阻滞# 而在 (C22 细胞则出现 ’2 及 L 期的阻滞$ 紫杉醇主要在 ’2 期发挥功能# ’F 期阻滞相对减少了紫杉醇作用的靶细胞数#因 此 ’F 期的细胞阻滞可能会影响紫杉醇的药物敏感 性% 在本研究中# 我们所检测的细胞周期变化是 CY - 内的早期变化# 结合细胞生长抑制曲线的结 果# 早期 ’F 期的阻滞并不会降低紫杉醇的细胞生 长抑制能力# 因为 ($!# 抑制剂诱导 ’F 期的阻 !"#$ C M Y K