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大 3、黏粒文库 构建过程与载体构建过程相似:两臂DNA片段的制备, 供体DNA片段的制备,两DNA的连接和重组DAN分子的 包装。 ·单COS质粒载体和双COS质粒载体构建基因组文库。 为提高文库质量,可采取以下措施: 1.双酶切载体产生不同末端以避免其自身形成串状体 2.供体DNA脱磷酸化以避免供体DNA间的连接导致重排 3.载体和供体DNA末端修饰以避免上述两种情形发生 载体DNA Xhol or Sall酶切 补CT 连接 重组 DNA 供体DNA S3AI部分酶切 补AG 1717 3、黏粒文库 ▪ 构建过程与λ载体构建过程相似: 两臂DNA片段的制备, 供体DNA片段的制备,两DNA的连接和重组DAN分子的 包装。 ▪ 单COS质粒载体和双COS质粒载体构建基因组文库。 为提高文库质量,可采取以下措施: 1. 双酶切载体产生不同末端以避免其自身形成串状体 2. 供体DNA脱磷酸化以避免供体DNA间的连接导致重排 3. 载体和供体DNA末端修饰以避免上述两种情形发生 载体DNA XhoI or SalI酶切 补CT 连接 重组 DNA 供体DNA Sau3AI部分酶切 补AG
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