入噬菌体载体 Bam HI位点 真核基因组DNA cos 左臂 右臂cos 用BamHⅡ消化 cos cos 用限制酶部分逍化DNA； 按大小分级分离待插入 的DNA,以得到约20kb的 内部片段 片段 去除噬菌体复制所 AvvyA 不需要的内部片段 从M M M cos cos 约20kb的片段 用T4噬菌体DNA连接酶进行连接 cos左臂右臂co5M 在体外包装到入噬菌体颗粒中 利用适当的大肠杆菌菌株铺平板 16