充分混匀后，于沸水浴中加热2Omin。自来水冷却后，测定OD心m。以RNA含量为 横坐标，ODom为纵坐标，绘制标准曲线。 2.样品的测定 取样品溶液2.5mL,加入地衣酚试剂2.5mL,如前述方法测定OD6m,从标准曲线查 出RNA含量。 五、计算 样品中RNA浓度(gmL)样品测得的RNA(g 2.5(ml) (吕浪需) 实验七三种腺苷酸分离鉴定一醋酸纤维素薄膜电泳法 一、目的 掌握醋酸纤维素薄膜电泳法分离带电颗粒原理：观察核苷酸类物质的紫外吸收现象 二、原理 带申粒子在申场中向若与其自身带相反由荷的电极移动的现象，称为申泳。控制申泳 条件（如pH等），使混合试样中的不同组分带有不同的净电荷，各组分在电场中移动的速 度或方向各不相同，从而达到分离各组分的目的，这就是电泳分析法。以醋酸纤维素薄膜 作支持物进行电泳分析的方法称为醋酸纤维素薄膜电泳法。 在pH4.8电泳缓冲液条件下，带有不同量磷酸基团的AMP、ADP、ATP解离之后， 带有负电荷量的领序为：ATP>ADP>AMP,它们在电场中移动速度不同，从而得到分离 又利用核苷酸类物质的碱基具有紫外吸收性质，将分离后的电泳醋酸薄膜放在紫外灯下 可见暗红色斑点，参照标准样品在同样条件下的电泳情况，对混合试样分离后的各组分进 行鉴定。 21 21 充分混匀后，于沸水浴中加热 20min。自来水冷却后，测定 OD670nm。以 RNA 含量为 横坐标，OD670nm为纵坐标，绘制标准曲线。 2．样品的测定 取样品溶液 2.5mL，加入地衣酚试剂 2.5mL，如前述方法测定 OD670nm，从标准曲线查 出 RNA 含量。 五、计算 样品测得的 RNA（μg） 样品中 RNA 浓度（μg/mL）= 2.5（mL） （吕淑霞） 实验七 三种腺苷酸分离鉴定 醋酸纤维素薄膜电泳法 一、目的 掌握醋酸纤维素薄膜电泳法分离带电颗粒原理；观察核苷酸类物质的紫外吸收现象。 二、原理 带电粒子在电场中向着与其自身带相反电荷的电极移动的现象，称为电泳。控制电泳 条件（如 pH 等），使混合试样中的不同组分带有不同的净电荷，各组分在电场中移动的速 度或方向各不相同，从而达到分离各组分的目的，这就是电泳分析法。以醋酸纤维素薄膜 作支持物进行电泳分析的方法称为醋酸纤维素薄膜电泳法。 在 pH4.8 电泳缓冲液条件下，带有不同量磷酸基团的 AMP、ADP、ATP 解离之后， 带有负电荷量的顺序为：ATP＞ADP＞AMP，它们在电场中移动速度不同，从而得到分离。 又利用核苷酸类物质的碱基具有紫外吸收性质，将分离后的电泳醋酸薄膜放在紫外灯下， 可见暗红色斑点，参照标准样品在同样条件下的电泳情况，对混合试样分离后的各组分进 行鉴定