加入。最下面两排是计算出的每管中蛋白质的量(微克)和测得的吸光度值。 Folin-酚试剂法实验表格 管号 12345678910 标准蛋白质00.10.2040.60.81.0 (250ug/ml) 未知蛋白质 0.40.6 (约250ug/m) 蒸馏水 1.00.90.80.60.40.200.80.60.4 试剂甲 5.05.05.0505.05.05.05.05.050 试剂乙 0.50.50.50.50.50.50.50.50.50.5 每管中蛋白质 的量(pg) 吸光度值(A700 2.样品的测定:取1毫升样品溶液(其中约含蛋白质20~250微克),按上述方法 进行操作,取1毫升蒸馏水代替样品作为空白对照。通常样品的测定也可与标准曲线的 测定放在一起,同时进行。即在标准曲线测定的各试管后面,再增加3个试管。如上表 中的8、9、10试管。 根据所测样品的吸光度值,在标准曲线上査出相应的蛋白质量,从而计算出样品溶 液的蛋白质浓度 注意,由于各种蛋白质含有不同量的酪氨酸和苯丙氨酸,显色的深浅往往随不同的 蛋白质而变化。因而本测定法通常只适用于测定蛋白质的相对浓度(相对于标准蛋白 质)。 四、改良的简易F。n酚试剂法 (一)试剂 1.试剂甲:碱性铜试剂溶液中,含05 N Naoh、10%Na2CO30.1%酒石酸钾和0.05% 硫酸铜,配制时注意硫酸铜用少量蒸馏水溶解后,最后加入。 2.试剂乙:与前面的基本法相同。临用时加蒸馏水稀释8倍。 3.标准蛋白质溶液:同基本法 (二)操作步骤 测定标准曲线与样品溶液的操作方法与基本法相同。只是试剂甲改为1毫升,室温 放置10分钟后,试剂乙改为4毫升。在55℃恒温水浴中保温5分钟。用流动水冷却后175 加入。最下面两排是计算出的每管中蛋白质的量（微克）和测得的吸光度值。 Folin—酚试剂法实验表格： 管号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 标准蛋白质 0 0.1 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 （250g/ml） 未知蛋白质 0.2 0.4 0.6 （约 250g/ml） 蒸馏水 1.0 0.9 0.8 0.6 0.4 0.2 0 0.8 0.6 0.4 试剂甲 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 试剂乙 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 每管中蛋白质 的量（g） 吸光度值（A700） 2. 样品的测定：取 1 毫升样品溶液（其中约含蛋白质 20~250 微克），按上述方法 进行操作，取 1 毫升蒸馏水代替样品作为空白对照。通常样品的测定也可与标准曲线的 测定放在一起，同时进行。即在标准曲线测定的各试管后面，再增加 3 个试管。如上表 中的 8、9、10 试管。 根据所测样品的吸光度值，在标准曲线上查出相应的蛋白质量，从而计算出样品溶 液的蛋白质浓度。 注意，由于各种蛋白质含有不同量的酪氨酸和苯丙氨酸，显色的深浅往往随不同的 蛋白质而变化。因而本测定法通常只适用于测定蛋白质的相对浓度（相对于标准蛋白 质）。 四、改良的简易 Folin—酚试剂法 （一）试剂 1. 试剂甲：碱性铜试剂溶液中，含 0.5N NaOH、10%Na2CO3、0.1%酒石酸钾和 0.05% 硫酸铜，配制时注意硫酸铜用少量蒸馏水溶解后，最后加入。 2. 试剂乙：与前面的基本法相同。临用时加蒸馏水稀释 8 倍。 3. 标准蛋白质溶液：同基本法。 （二）操作步骤 测定标准曲线与样品溶液的操作方法与基本法相同。只是试剂甲改为 1 毫升，室温 放置 10 分钟后，试剂乙改为 4 毫升。在 55℃恒温水浴中保温 5 分钟。用流动水冷却后