[EJo 若酶催化单底物反应机理为E+SE+ P,则V=k]S],也就是V与旧及[S]都 成正比,但实际情况不是这样,这个结果符合以H为催化剂的情况。 若假设底物和酶先形成ES复合物,再由ES转化成产物,其机理可写成 e+ s ks ES—>E+P 并假设第一步可迅速平衡,第二步较慢,是限速步骤。根据这些假设可推导出动力学方程式: =12l5S1,在此式中,ⅴ与成正比,而与S成双曲线关系,符合实际情况,故假设 k。+[S 的机理正确 533单底物—单产物反应 533.1酶—一底物复合物的存在 经过电子显微镜观察、ⅹ光衍射和动力学方法研究,证实了确实有ES复合物存在 5332平衡学说( Henri, Michaelis和 Menten方程) 1902年Heni和 Brown提出了S+EES- →E+P学说:1913年 Michaelis和 Menten完善了这个理论,他们的第一步是快速可逆的平衡,第二步慢,为限速反应。 E+S-→ E+P 在推导动力学方程时,有几点假设:①第一步迅速平衡,第二步慢,即k2((k-1;②[S]) [E],[S]))[ES]:③酶以E和ES两种状态存在 设v为E与S结合的速度,V为ES解离的速度,则 V=k([E]-[ES])([S]-[ES]),V=k-1ES],∵平衡时Ⅴr=Vr, ∴k([E]o-[ES])([S]-[ES])=k-1|ES],又∵:[S]》[ES],[S]-[ESl≈S],5 若酶催化单底物反应机理为 E＋S E＋ P，则 V = k [E][S]，也就是 V 与[E]及[S]都 成正比，但实际情况不是这样，这个结果符合以 H+为催化剂的情况。 若假设底物和酶先形成 ES 复合物，再由 ES 转化成产物，其机理可写成 E ＋ S ES E＋P 并假设第一步可迅速平衡，第二步较慢，是限速步骤。根据这些假设可推导出动力学方程式： [ ] [ ] [ ] 2 0 k S k E S V s + = ，在此式中，V 与[E]0 成正比，而与[S]成双曲线关系，符合实际情况，故假设 的机理正确。 5.3.3 单底物——单产物反应 5.3.3.1 酶——底物复合物的存在 经过电子显微镜观察、x 光衍射和动力学方法研究，证实了确实有 ES 复合物存在。 5.3.3.2 平衡学说（Henri, Michaelis 和 Menten 方程） 1902年Henri和Brown提出了S＋E ES — →E＋P 学说；1913 年 Michaelis 和 Menten 完善了这个理论，他们的第一步是快速可逆的平衡，第二步慢，为限速反应。 E＋S −−− − −−−→ 1 1 k k ES E＋P 在推导动力学方程时，有几点假设：①第一步迅速平衡，第二步慢，即 k2〈〈 k－1；②[S] 〉〉 [E]，[S] 〉〉[ES]；③酶以 E 和 ES 两种状态存在。 设 Vf为 E 与 S 结合的速度，Vr为 ES 解离的速度，则 Vf＝k1 ( [E]0－[ES] )( [S]－[ES] )， Vr＝k－1 [ES]， ∵ 平衡时 Vf＝Vr ， ∴ k1 ( [E]0－[ES] )( [S]－[ES] )＝k－1 [ES] ， 又∵ [S] 〉〉[ES]， [S]－[ES]≈[S]