【原理】原理同酸溶血试验利用患者自己血清中的补体和葡萄糖，经孵育使糖分解酸化，使补体敏感细胞溶解 阴性 阳性见于PNH 遗传性球形红细胞增多症 目身免设性溶血性贫 本试验用 ①高铁血红蛋白还原试验 原理】G-6-PD在 路 蓝（递气体)'和高铁血红蛋白还原酶的作用下使言铁血红蛋白暗棕色)还原为血红蛋白红色 在美 试验时先将亚硝酸钠与血液(Hb)混合形成高铁血红蛋白，在提供足量的葡萄糖的条件下孵育，再测定标本中残余的高铁 血红蛋白量 光电色 和参考红色 还原率>75% 细胞化学洗脱法： 空影细胞<2% ②化物 【原理】先使Hb与空气充分混合形成氧合血红蛋白(Hb02),抗坏血酸钠与Hb02反应过程中可产生过氧化室(H202), 氰化钠能抑 胞过化里海以保护H2○2不微吸，从而与还原型合洗日(GH)作用产生化型合洗日 还原成GSH,若红细胞中提供NADPHE的璃（如G6-PD)缺乏则 02P 【正常 标木红性 【临床意义】阳性（标本呈棕色），本试验是较为敏感的筛选试验 阳性为 杂合 谷胱甘肽过氧化酶缺陷等 ③硝基四氨唑蓝试验 【正常结果和参考值】 定性（纸片法） 紫自 定量（分光光度计比色 6.7-20.5NBT单位 【原理】G6及 剂中 0中m有收峰 酸盐(G6P)转变为6-磷酸葡萄糖(6GP),又使NADP生成NADPH,后者在紫外线 【正常结果和参考值】 :2.8-7.3U1gH 【临床意义 G-6-PD缺陷症患者无荧光点<2.8IU/gHb .6 IU/gH 【原理】PK在糖酵解途径中催化磷酸烯式丙酮酸(PEP)转为丙酮酸，再由乳酸脱室酶(LDH)催化，将其转为乳酸，同 时促使NADH变为NAD.NADH在紫外线下发生荧光，在324nm处有一吸收峰，而NAD没有 正常结果和 专值】 点消铁 【临床意义】阳性(60min取液点样仍有荧光可见)或定量<10ugHb者 L于传性PK缺格征 某些获得性PK缺陷（如粒细胞白血病，骨髓增殖异常综合症） (三)珠蛋白合成异常 ①血红蛋白电泳(hemoglolin electrophoresis)【原理】原理同酸溶血试验 利用患者自己血清中的补体和葡萄糖，经孵育使糖分解酸化，使补体敏感细胞溶解 【正常结果】阴性 【临床意义】 阳性见于PNH 遗传性球形红细胞增多症 自身免疫性溶血性贫血 (阳性率比PNH为低) 本试验用于PNH筛选试验 （二）红细胞酶缺陷 ①高铁血红蛋白还原试验 【原理】G-6-PD在戊糖旁路中使6-磷酸葡萄糖变成6-磷酸葡萄糖酸，同时催化氧化型辅酶II（NADP）形成还原型辅酶II （NADPH），再使氧化型谷胱甘肽（GSSG）形成还原型谷胱甘肽（GSH）。NADPH是高铁血红蛋白还原酶的辅酶，在美 蓝（递氢体）和高铁血红蛋白还原酶的作用下使高铁血红蛋白（暗棕色）还原为血红蛋白（红色） 试验时先将亚硝酸钠与血液（Hb）混合形成高铁血红蛋白，在提供足量的葡萄糖的条件下孵育，再测定标本中残余的高铁 血红蛋白量 【正常结果和参考值】 目测法：阴性（标本呈红色） 光电比色法：还原率>75% 细胞化学洗脱法：空影细胞<2% ②氰化物——抗坏血酸盐试验 【原理】先使Hb与空气充分混合形成氧合血红蛋白（HbO2），抗坏血酸钠与HbO2反应过程中可产生过氧化氢（H2O2）， 氰化钠能抑制细胞过氧化氢酶以保护H2O2不被破坏，从而与还原型谷胱甘肽（GSH）作用产生氧化型谷胱甘肽 （GSSG），后者需要还原型辅酶II（NADPH）使其再还原成GSH，若红细胞中提供NADPH的酶（如G-6-PD）缺乏则 GSH减少，H2O2储积，氧化HbO2成为棕色的高铁血红蛋白 【正常结果】阴性 （标本呈鲜红色） 【临床意义】阳性（标本呈棕色），本试验是较为敏感的筛选试验 阳性为 G-6-PD缺陷症纯合子型、杂合子型 戊糖旁路中G-6-PD以外的酶缺陷 GSH缺乏症 谷胱甘肽过氧化酶缺陷等 ③硝基四氮唑蓝试验 【正常结果和参考值】 定性（纸片法）：紫色 定量（分光光度计比色法）： 6.7-20.5NBT单位 ④G6PD的荧光点及紫外分光法测定 【原理】G-6-PD使试剂中葡萄糖6-磷酸盐（G6P）转变为6-磷酸葡萄糖（6GP），又使NADP生成NADPH，后者在紫外线 激发下发生荧光，在340nm有一吸收峰 【正常结果和参考值】 荧光点法：有荧光点 紫外线分光光度计法：2.8-7.3 IU/gHb 【临床意义】 G-6-PD缺陷症患者无荧光点 <2.8IU/gHb 杂合子型为0.6-2.8IU/gHb 纯合子型为<0.6 IU/gHb ⑤丙酮酸激酶的荧光点及紫外分光法测定 【原理】PK在糖酵解途径中催化磷酸烯式丙酮酸（PEP）转为丙酮酸，再由乳酸脱氢酶（LDH）催化，将其转为乳酸，同 时促使NADH变为NAD。NADH在紫外线下发生荧光，在324nm处有一吸收峰，而NAD没有 【正常结果和参考值】 荧光点法：阴性（荧光点消失） 紫外分光法：10.0-20.1u/gHb 【临床意义】阳性（60 min取液点样仍有荧光可见）或定量<10u/gHb者 见于遗传性PK缺陷症 某些获得性PK缺陷（如粒细胞白血病，骨髓增殖异常综合症） （三）珠蛋白合成异常 ①血红蛋白电泳（hemoglolin electrophoresis） 【原理】是利用各种血红蛋白（包括正常和异常Hb）等电点不同的原理，血红蛋白在一定pH缓冲液中带不同电荷。缓冲液 pH大于等电点则Hb带负电荷，反之则带正电荷。将除去杂质（细胞膜，基质蛋白及脂溶性物质）的Hb液点样于置于电泳仪