四)免疫 )红细胞膜缺陷 @红细胞渗透脆性试脸(ertythrocyte osmotic fragitity test) test) T细略 ④酸溶血试验(acid hemolysis test or Ham test) ⑤蔗糖水溶血试验(sucrose lysis test) t he (SDS PAGE ①红细胞渗透脆性试验（ertythrocye osmotic fragitity test) 汗始溶血0.42-0.46%(4.2-4.6gL)(NaCL液) 完全溶血0.28-0.34%(2.8-3.4gL) (NacL液 L液)以上即为阳性。见于 专性球形红细胞增多症 V遗传性椭圆细胞增多症 偏身免性血件伴球形红细陶增多症 原ia 时作用后，以540m比色，绘制曲线，得出中间脆性(50%溶血度) ②湿孵育后渗透脆性 试验(incubated osmotic fragitity test) 果及参考值 中间脆性：0.465-0.590% (4.65-5.90gL)(NaCL液 (incubated osmotic fragitity test 血性贫血患者孵育后跪性亦增加 ③自身溶血试验及纠正试验(autohemotysis and correction test) 【原理】本试验原 育试 组的钙积细体积增大而易 【正常参考值】 48小时内不加纠正物的溶血度为<3.5% ATP的溶度 【临床意义】遗传性球形红细跑增多症自身溶血显若增强，萄萄糖和ATP都能明显纠正，其他溶血性疾病自身溶血阳性者 Daciei意称为先天性非球形细胞性溶血性贫血(Congenital nonspherocytic hemolytic anemia,CNHA),并分为两型； 者自身溶 试正常或轻度增加(3.6%)，加入萄精可使溶血纠正：哩者自身溶血显若增强(735%)加入南萄 ⑥里】本哈亦水am验连发性链眠性血红蛋白尿(PNH)患者的红细跑膜对补体非常敏感，在酸性（pH6465 条件下，经孵育能被正常人新鲜血清（含有补体）所溶解，不能被正常人灭活血清（无补体）溶解 草}阳胜见于PNH,确诊意义大 蔗糖溶血 【原理】本试验的原理与酸溶血试验相似。蔗糖溶液离子浓度低，经孵育加强补体与红细胞膜的结合，使补体敏感细胞溶 阴 40 【临床奇义 阳性见 FPNH。轻度阳性或溶血度1-5%亦可见于部分巨幼细胞性贫血，再生障碍性贫血、自身免疫性溶血性 贫血和遗传性球形红细胞增多症。此试验可做PNH的筛选试验，阴性可排除PNH,阳性应再做酸溶血试验证实 ⑥热落血试验(heat hemolysis test) （二）红细胞酶缺陷 （三）珠蛋白合成异常 （四）免疫性溶血 （一）红细胞膜缺陷 ①红细胞渗透脆性试验（ertythrocyte osmotic fragitity test） ②湿孵育后渗透脆性试验（incubated osmotic fragitity test） ③自身溶血试验及纠正试验（autohemotysis and correction test） （一）红细胞膜缺陷 ④酸溶血试验（acid hemolysis test or Ham test） ⑤蔗糖水溶血试验（sucrose lysis test） ⑥热溶血试验（heat hemolysis test） ⑦红细胞膜蛋白的十二烷基碳酸钠—聚丙烯酰胺凝胺电泳（SDS——PAGE） ①红细胞渗透脆性试验（ertythrocyte osmotic fragitity test） ①红细胞渗透脆性试验（ertythrocyte osmotic fragitity test） 【正常参考值】 开始溶血0.42-0.46%（4.2-4.6g/L）（NaCL液） 完全溶血0.28-0.34%（2.8-3.4g/L）（NaCL液） ①红细胞渗透脆性试验（ertythrocyte osmotic fragitity test） 【临床意义】患者与正常对照相差（提高）0.04g/L（NaCL液）以上即为阳性。见于 u遗传性球形红细胞增多症 v遗传性椭圆细胞增多症 w自身免疫性溶血性贫血伴球形红细胞增多症 ②湿孵育后渗透脆性试验（incubated osmotic fragitity test） 【原理】Diace 法，原理与简易法相似，但所用血液标本量更少（血：试剂=1：100）以减少血液对渗透压和离子强度的影 响。经37℃24小时孵育，以消耗红细胞的ATP和能量。此后再与磷酸盐缓冲体系配成pH7.4系列低渗盐水混合，经定温、定 时作用后，以540nm比色，绘制曲线，得出中间脆性（50%溶血度） ②湿孵育后渗透脆性试验（incubated osmotic fragitity test） 【正常结果及参考值】 曲线：乙字形，上下对称 中间脆性：0.465-0.590% （4.65-5.90g/L）（NaCL液） （incubated osmotic fragitity test） 【临床意义】所得曲线在正常曲线的右侧，或中间脆性在6.0g/L（NaCL液）以上为脆性明显增加，见于遗传性球形红细胞 增多症及遗传性椭圆形红细胞增多症。本法较简易法敏感，对轻型者尤有诊断价值。此外，丙酮酸激酶缺乏症等酶缺陷性溶 血性贫血患者孵育后脆性亦增加 ③自身溶血试验及纠正试验（autohemotysis and correction test） 【原理】本试验原理与孵育试验相似，但不加低渗盐水。观察不加纠正物（以生理盐水代替）和加纠正物（葡萄糖或 ATP）的红细胞在自身血浆中溶血程度。红细胞对阳离子的运转需要能量，经孵育的红细胞消耗能量ATP储备量减少，钠离 子在细胞内储积，细胞体积增大而易于破裂 【正常参考值】 48小时内不加纠正物的溶血度为<3.5% 加葡萄糖的溶血度为<1.0% 加ATP的溶血度为< 1.0% 【临床意义】遗传性球形红细胞增多症自身溶血显著增强，葡萄糖和ATP都能明显纠正。其他溶血性疾病自身溶血阳性者 Dacie意见称为先天性非球形细胞性溶血性贫血（Congenital nonspherocytic hemolytic anemia，CNHA），并分为两型；I 型者自身溶血试验正常或轻度增加（3-6%），加入葡萄糖可使溶血纠正；II型者自身溶血显著增强（7-35%），加入葡萄糖 不能纠正，加入ATP能纠正 ④酸溶血试验（acid hemolysis test or Ham’s test） 【原理】本试验亦称Ham试验 阵发性睡眠性血红蛋白尿（PNH）患者的红细胞膜对补体非常敏感，在酸性（pH6.4-6.5） 条件下，经孵育能被正常人新鲜血清（含有补体）所溶解，不能被正常人灭活血清（无补体）溶解 【正常结果】阴性 【临床意义】阳性见于PNH，确诊意义大！ ⑤蔗糖溶血试验（sucrose lysis test） 【原理】本试验的原理与酸溶血试验相似。蔗糖溶液离子浓度低，经孵育加强补体与红细胞膜的结合，使补体敏感细胞溶 血 【正常结果】阴性 【参考值】溶血度<1% 【临床意义】阳性见于PNH。轻度阳性或溶血度1-5%亦可见于部分巨幼细胞性贫血，再生障碍性贫血、自身免疫性溶血性 贫血和遗传性球形红细胞增多症。此试验可做PNH的筛选试验，阴性可排除PNH，阳性应再做酸溶血试验证实 ⑥热溶血试验（heat hemolysis test）