[教学内容]化学因素对微生物的影响 实验二十五 [目的要求]了解某一抗生素的抗菌范围,学习抗菌谱试验的基本方法。 [实验原理]生物之间的关系从总体上可分为互生、共生、寄生、拮抗等,微生物之间的拮抗现象是普遍存在于自然界的,许多微生物在 命活动过程中能产生某种特殊代谢产物如抗生素,具有选择性地抑制或杀死其它微生物的作用,不同抗生素的抗菌谱是不同的,某些 亢生素只对少数细菌有抗菌作用。[教学内容]生物因素对微生物的影响 实验二十六 [目的要求]1.了解细菌接合导致传遗重组的基本原理。2.学习细菌接合实验的基本方法 [实验原理]细菌接合是指供体菌与受体菌的完整细胞在直接接触时供体菌的DNA向受体菌单向传递而导致基因重组的现象。大肠杄菌的 接合配对是由致育因子(F因子)的存在所决定的 本实验采用的供体菌是大肠杄菌野生型Hfr菌株,对链霉素呈敏感性(Strs),受体菌为大肠杆菌营养缺陷型突变体(Thr-Leu-Thi-),需 要苏氨酸,亮氨酸和硫胺素,对链霉素呈抗性(Strr)。短期接合配对以后,在含有链霉素和硫胺素的基本培养基上只能分离到苏氨酸和亮 氨酸的重组子(Thr+Leu+Thi-),硫胺素标记位于转移染色体的末端,在短期配对过程中因配对中断难以转移到受体细胞,因此硫胺素是 Thr+Leu+Th-重组子的必须生长因子 [教学内容]细菌的接合作用 实验二十七 [目的要求]学习噬菌体效价测定的基本方法。 [实验原理]噬菌体的效价就是一毫升培养液中所含活噬菌体的数量。效价测定的方法,一般应用双层琼脂平板法。由于在含有特异宿主 细菌的琼脂平板上,噬菌体产生肉眼可见的噬菌斑,因此,能进行噬菌体的计数。但因噬菌斑计数方法其实际效率难以接近100%(般偏 低,因为有少数活噬菌体可能未引起感染),所以为了准确地表达病毒悬液的浓度(效价或滴度)一般不用病毒粒子的绝对数量而是用噬菌 斑形成单位(P1ague- forming units,简写成pfu)表示。 [教学内容]噬菌体效价的测定 实验二十八 [目的要求]学习并掌握生长谱法测定微生物营养需要的基本原理和方法 [实验原理]微生物的生长繁殖需要遹宜的营养环境,碳源、氮源、无机盐、微量元素、生长因子等都是微生物生长所必需,缺少其中 种,微生物便不能正常生长、繁殖。在实验室条件下,人们常用人工配制的培养基来培养微生物。由于不同类型微生物利用不同营养物质 的能力不同,它们在点植有不同营养物质的平板上的生长图形就会有差别,具有不同的生长谱,故称此法为生长谱法。该法可以定性、定 量地测定微生物对各种营养物质的需求,在微生物育种、营养缺陷型鉴定以及饮食制品质量检测等诸多方面具有重要用途 教学内容]生长谱法测定微生物的营养要求 实验二十九 [目的要求]1.学习水样的采取方法和水样细菌总数测定的方法。2.了解水源水的平板菌落计数的原则 [实验原理]本实验应用平板菌落计数技术测定水中细菌总数。由于水中细菌种类繁多,它们对营养和其他生长条件的要求差别很大,不 可能找到一种培养基在一种条件下,使水中所有的细菌均能生长繁殖,因此,以一定的培养基平板上生长出来的菌落,计算出来的水中细 菌总数仅是一种近似值。目前一般是采用普通肉膏蛋白胨琼脂培养基 [教学内容]水体中细菌总数的测定 实验三十 的要求] 1.了解牛乳的细菌学检查方法和质量判断标准。2.学习牛乳的巴斯德消毒法 [实验原理]从健康母牛体内刚挤出的牛奶,含有少量的正常起始微生物。但将牛奶装入未消毒的器具和在分装、运输过程中,会被很多 其他微生物甚至致病菌污染。而且牛乳含有丰富的营养物质(碳水化合物、蛋白质、脂肪、无机盐和维生素等),在其中的微生物会很快 繁殖,因此,一份牛乳样品的细菌含量可反映母牛的健康状况和牛乳生产与保藏的条件。 [教学内容]牛乳中细菌的检查 生化讲义[教学内容] 化学因素对微生物的影响 实验二十五 [目的要求] 了解某一抗生素的抗菌范围，学习抗菌谱试验的基本方法。 [实验原理] 生物之间的关系从总体上可分为互生、共生、寄生、拮抗等，微生物之间的拮抗现象是普遍存在于自然界的，许多微生物在 其生命活动过程中能产生某种特殊代谢产物如抗生素，具有选择性地抑制或杀死其它微生物的作用，不同抗生素的抗菌谱是不同的，某些 抗生素只对少数细菌有抗菌作用。[教学内容] 生物因素对微生物的影响 实验二十六 [目的要求] 1.了解细菌接合导致传遗重组的基本原理。2.学习细菌接合实验的基本方法。 [实验原理] 细菌接合是指供体菌与受体菌的完整细胞在直接接触时供体菌的 DNA 向受体菌单向传递而导致基因重组的现象。大肠杆菌的 接合配对是由致育因子(F 因子)的存在所决定的。 本实验采用的供体菌是大肠杆菌野生型 Hfr 菌株，对链霉素呈敏感性(Strs)，受体菌为大肠杆菌营养缺陷型突变体(Thr- Leu- Thi-)，需 要苏氨酸，亮氨酸和硫胺素，对链霉素呈抗性(Strr)。短期接合配对以后，在含有链霉素和硫胺素的基本培养基上只能分离到苏氨酸和亮 氨酸的重组子(Thr+ Leu+Thi-)，硫胺素标记位于转移染色体的末端，在短期配对过程中因配对中断难以转移到受体细胞，因此硫胺素是 Thr+ Leu+Thi-重组子的必须生长因子。 [教学内容] 细菌的接合作用 实验二十七 [目的要求] 学习噬菌体效价测定的基本方法。 [实验原理] 噬菌体的效价就是一毫升培养液中所含活噬菌体的数量。效价测定的方法，一般应用双层琼脂平板法。由于在含有特异宿主 细菌的琼脂平板上，噬菌体产生肉眼可见的噬菌斑，因此，能进行噬菌体的计数。但因噬菌斑计数方法其实际效率难以接近 100%(一般偏 低，因为有少数活噬菌体可能未引起感染)，所以为了准确地表达病毒悬液的浓度(效价或滴度)一般不用病毒粒子的绝对数量而是用噬菌 斑形成单位(Plague-forming units,简写成 pfu)表示。 [教学内容] 噬菌体效价的测定 实验二十八 [目的要求] 学习并掌握生长谱法测定微生物营养需要的基本原理和方法。 [实验原理] 微生物的生长繁殖需要适宜的营养环境，碳源、氮源、无机盐、微量元素、生长因子等都是微生物生长所必需，缺少其中一 种，微生物便不能正常生长、繁殖。在实验室条件下，人们常用人工配制的培养基来培养微生物。由于不同类型微生物利用不同营养物质 的能力不同，它们在点植有不同营养物质的平板上的生长图形就会有差别，具有不同的生长谱，故称此法为生长谱法。该法可以定性、 定 量地测定微生物对各种营养物质的需求，在微生物育种、营养缺陷型鉴定以及饮食制品质量检测等诸多方面具有重要用途 。[教学内容]生长谱法测定微生物的营养要求 实验二十九 [目的要求] 1.学习水样的采取方法和水样细菌总数测定的方法。2.了解水源水的平板菌落计数的原则. [实验原理] 本实验应用平板菌落计数技术测定水中细菌总数。由于水中细菌种类繁多，它们对营养和其他生长条件的要求差别很大，不 可能找到一种培养基在一种条件下，使水中所有的细菌均能生长繁殖，因此，以一定的培养基平板上生长出来的菌落，计算出来的水中细 菌总数仅是一种近似值。目前一般是采用普通肉膏蛋白胨琼脂培养基。 [教学内容]水体中细菌总数的测定 实验三十 [目的要求] 1. 了解牛乳的细菌学检查方法和质量判断标准。2.学习牛乳的巴斯德消毒法 [实验原理] 从健康母牛体内刚挤出的牛奶，含有少量的正常起始微生物。但将牛奶装入未消毒的器具和在分装、运输过程中，会被很多 其他微生物甚至致病菌污染。而且牛乳含有丰富的营养物质 (碳水化合物、蛋白质、脂肪、无机盐和维生素等)，在其中的微生物会很快 繁殖，因此，一 份牛乳样品的细菌含量可反映母牛的健康状况和牛乳生产与保藏的条件。 [教学内容] 牛乳中细菌的检查 生化讲义