羧甲基纤维素酶活力，误差要求小于±10%。 主要内容：制作还原糖-吸光度的标准曲线；测定PH对羧甲基纤维素酶活力的影响曲线及该酶的最适 pH值；测定固体曲中的羧甲基纤维素酶活力 操作要点：设计实验过程， 定酶的活性，确定最适条件。 主要仪器设备：电子天平，分光光度计；恒温水浴锅。 实验十七：DNA的提取及琼脂糖凝胶电泳(6学时) 基本要求：掌握DNA提取的方法与原理，掌握琼脂糖凝胶电泳的方法与原理。 主要内容：提取DNA,电泳检测 操作要点：DNA的提取分离过程，电泳操作，紫外观察 主要仪器设备：高速冷冻离心机、低温冰箱、紫外分光光度计、紫外灯、电泳仪、电泳槽、微量加 样器。 实验十八：SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(6学时) 基本要求：学习SDS聚丙烯酰胺 电泳技术 ,并用于蛋白质分子量的测定 主要内容： DS聚丙烯酰凝胶电泳定白质的分子量 操作要点：SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳及染色观察 主要仪器设备：垂直板电泳槽，电泳仪，染色盘，脱色摇床。 实验十九：凝胶层折法分离蛋白质(6学时) 基本要水 :掌握凝胶层大 法分离 白质的原理和方法 主要内容：凝胶层析法分离蛋白质 操作要点：凝胶层析柱的填装及分离过程 主要仪器设备：层析柱，核酸蛋白检测仪，自动部分收集器」 实验二十：醋酸纤维素薄膜电泳（4学时) 基本要求 掌握醋酸纤维素薄膜电泳操作技术 测定人血清中各种蛋白质的相对百分含量】 主要内容：醋酸纤维素薄膜电泳测定血清中各种蛋白质的相对百分含量 操作要点：醋酸纤维素薄膜电泳 主要仪器设备：解剖镊子及竹夹子，点样器，直尺，电泳仪及电泳槽，玻璃板(12×12)，光分 光光度计，吹风机，单面刀片， 实验 质粒DNA的 e 与酶切(6学时) 基本要求：学习和掌握碱裂解法提取质粒DNA的基本原理，掌握琼脂糖凝胶电泳检测质粒DNA的大 / 主要内容：携带质粒E.co的培养，碱裂解法小量制备质粒，质粒DNA的酶切及电泳检测 湿作要占·谨防核沉浪同☑，醇 一被在去 竖4SE双'￥器'学米串遂到连'149号隆驱型器 实验二十二：PCR基因扩增(6学时) 基本要求：掌握PC反应的基本原理及实验技术」 主要内容：携带重组质粒（含已知基因序列）E.co的培养，以菌体为模板进行聚合酶链式反应 PCR产物的电泳检测 操作要点：配制反应液过程中，防止外源DNA污染。 主要仪器设备：摇床，PCR扩增仪，琼脂糖凝胶电泳系统，疑胶扫描分析系统 实验二十三：大肠杆菌感受态细胞的制备与转化(6学时) 基本要求：掌握大肠杆菌感受态细胞的制备及转化的方法与技术 主要内容：大肠杆菌感受态 细胞的制备，转化方法 操作要点：感受态的制备过程尽量在低温下(0-4℃)进行。 主要仪器设备：摇床，超净工作台，制冰机，生化培养箱，高速冷动离心机，恒温水浴锅 实验二十四：哺乳动物基因组DNA的提取(6学时) 其木要求 掌握从鼠，肝中提取基因组DNA的方法 主要内容：鼠肝提取基因组DNA,所提取DNA的电泳检测及含量、纯度测定 操作要点：防止DNA酶的污染，防止基因组DNA的机械损伤。 羧甲基纤维素酶活力，误差要求小于±10％。 主要内容：制作还原糖-吸光度的标准曲线；测定PH对羧甲基纤维素酶活力的影响曲线及该酶的最适 pH值；测定固体曲中的羧甲基纤维素酶活力。 操作要点：设计实验过程，测定酶的活性，确定最适条件。 主要仪器设备：电子天平,分光光度计；恒温水浴锅。 实验十七：DNA的提取及琼脂糖凝胶电泳（6学时） 基本要求：掌握DNA提取的方法与原理，掌握琼脂糖凝胶电泳的方法与原理。 主要内容：提取DNA，电泳检测。 操作要点：DNA的提取分离过程，电泳操作，紫外观察 主要仪器设备：高速冷冻离心机、低温冰箱、紫外分光光度计、紫外灯、电泳仪、电泳槽、微量加 样器。 实验十八：SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳（6学时） 基本要求：学习SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳技术，并用于蛋白质分子量的测定。 主要内容：SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质的分子量 操作要点：SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳及染色观察 主要仪器设备：垂直板电泳槽，电泳仪，染色盘，脱色摇床。 实验十九：凝胶层析法分离蛋白质（6学时） 基本要求：掌握凝胶层析法分离蛋白质的原理和方法 主要内容：凝胶层析法分离蛋白质 操作要点：凝胶层析柱的填装及分离过程 主要仪器设备：层析柱，核酸蛋白检测仪，自动部分收集器。 实验二十：醋酸纤维素薄膜电泳（4学时） 基本要求：掌握醋酸纤维素薄膜电泳操作技术。测定人血清中各种蛋白质的相对百分含量。 主要内容：醋酸纤维素薄膜电泳测定血清中各种蛋白质的相对百分含量 操作要点：醋酸纤维素薄膜电泳 主要仪器设备：解剖镊子及竹夹子，点样器，直尺，电泳仪及电泳槽，玻璃板（12×12 m），光分 光光度计，吹风机，单面刀片。 实验二十一：质粒DNA的提取与酶切（6学时） 基本要求：学习和掌握碱裂解法提取质粒DNA的基本原理，掌握琼脂糖凝胶电泳检测质粒DNA的大 小。 主要内容：携带质粒E.coli的培养，碱裂解法小量制备质粒，质粒DNA的酶切及电泳检测 操作要点：谨防核酸沉淀同乙醇一起被弃去。 主要仪器设备：高速冷动离心机，台式冷冻离心机，琼脂糖凝胶电泳系统，摇床，凝胶扫描分析系 统 实验二十二：PCR基因扩增（6学时） 基本要求：掌握PCR反应的基本原理及实验技术。 主要内容：携带重组质粒（含已知基因序列）E.coli的培养，以菌体为模板进行聚合酶链式反应， PCR产物的电泳检测 操作要点：配制反应液过程中，防止外源DNA污染。 主要仪器设备：摇床，PCR扩增仪，琼脂糖凝胶电泳系统，凝胶扫描分析系统 实验二十三：大肠杆菌感受态细胞的制备与转化（6学时） 基本要求：掌握大肠杆菌感受态细胞的制备及转化的方法与技术。 主要内容：大肠杆菌感受态细胞的制备，转化方法 操作要点：感受态的制备过程尽量在低温下（0-4℃）进行。 主要仪器设备：摇床，超净工作台，制冰机，生化培养箱，高速冷动离心机，恒温水浴锅 实验二十四：哺乳动物基因组DNA的提取（6学时） 基本要求：掌握从鼠肝中提取基因组DNA的方法。 主要内容：鼠肝提取基因组DNA，所提取DNA的电泳检测及含量、纯度测定 操作要点：防止DNA酶的污染，防止基因组DNA的机械损伤