【结果】芽胞呈绿色,菌体为红色。 4.镀银染色 【材料】 菌株:钩端螺旋体培养物 试剂 (1)固定液:冰醋酸1m1,甲醛2ml,蒸馏水100m1 (②)媒染液:鞣酸5g,石炭酸lg,蒸馏水10σm。硝酸银溶液:硝酸银5g,蒸馏水100ml (3)用前取银溶液20m1,逐滴加入100g/L氢氧化铵,至产生棕色沉淀,轻摇后溶解,微 呈乳白色 器材:玻片、接种环等 【方法】 涂片:取玻片一张,放盐水2-3环,取钩端螺旋体一环,混匀作成涂片,于空气中待自然干燥 (不可用火固定); 染色:滴加固定液于已干燥标本上经1-2分钟固定,用水冲洗:加媒染剂,加温至有蒸汽出 现,作用0.5min,水洗;加硝酸银染液微加温,染色0.5min,水洗待干,镜检。 【结果】螺旋体染成棕褐色/黑褐色 四、显微镜的使用和原理 光学显微镜的物镜有低倍、高倍和油镜3种。微生物学实验室经常使用油镜,因此油镜 的使用必须熟练掌握 (一)油镜头的识别:油镜头上一般刻有90x、100×、0il或在镜头的下缘划有一黑圈 (二)油镜使用法 1.对光:用低倍镜对光,检查染色标本时光线宜强,要抬高集光器,放大光圈。 2.观察标本 (1)滴加香柏油一小滴于染色标本片上,将标本置载物台上,移置待检部分于接物镜下 (②)将油镜头移至中央对准标本,观察者的头偏向镜筒左侧,眼睛从旁观察,并缓慢向 下转动粗调节器,使镜筒下降,直至镜头浸于镜油中,但不要碰到玻璃片。然后将眼睛移至 目镜,一面观察,一面向上徐徐转动粗调节器,至视野中看到模糊物像,再换用细调节器调 到物像清晰为止。 (3)观察标本时应两眼同时张开,左眼观察,右眼用于绘图并记录结果7 【结果】芽胞呈绿色,菌体为红色。 4.镀银染色 【材料】 菌株：钩端螺旋体培养物 试剂： （1）固定液：冰醋酸 1ml，甲醛 2ml，蒸馏水 100ml。 （2）媒染液：鞣酸 5g，石炭酸 1g，蒸馏水 100ml。硝酸银溶液：硝酸银 5g，蒸馏水 100ml。 （3）用前取银溶液 20ml，逐滴加入 100g/L 氢氧化铵，至产生棕色沉淀，轻摇后溶解，微 呈乳白色。 器材：玻片、接种环等 【方法】 涂片：取玻片一张,放盐水 2-3 环,取钩端螺旋体一环,混匀作成涂片,于空气中待自然干燥 (不可用火固定)； 染色：滴加固定液于已干燥标本上经 1-2 分钟固定，用水冲洗；加媒染剂，加温至有蒸汽出 现，作用 0.5min ，水洗；加硝酸银染液微加温，染色 0.5min，水洗待干，镜检。 【结果】螺旋体染成棕褐色/黑褐色 四、显微镜的使用和原理 光学显微镜的物镜有低倍、高倍和油镜 3 种。微生物学实验室经常使用油镜，因此油镜 的使用必须熟练掌握。 （一）油镜头的识别：油镜头上一般刻有 90×、100×、0il 或在镜头的下缘划有一黑圈。 （二）油镜使用法 1．对光：用低倍镜对光，检查染色标本时光线宜强，要抬高集光器，放大光圈。 2．观察标本 (1) 滴加香柏油一小滴于染色标本片上，将标本置载物台上，移置待检部分于接物镜下。 (2) 将油镜头移至中央对准标本，观察者的头偏向镜筒左侧，眼睛从旁观察，并缓慢向 下转动粗调节器，使镜筒下降，直至镜头浸于镜油中，但不要碰到玻璃片。然后将眼睛移至 目镜，一面观察，一面向上徐徐转动粗调节器，至视野中看到模糊物像，再换用细调节器调 到物像清晰为止。 (3) 观察标本时应两眼同时张开，左眼观察，右眼用于绘图并记录结果