变构调节酶不遵循米氏动力学 除了酶受其它分子调节之外，变构酶促反应对底物浓度的应答也很有特征。图103是 ATCase酶促反应速度对底物Asp浓度作图的结果。这个动力学曲线与米氏方程不同，形状 像“S”。很多变构酶促动力学曲线呈S型。血红蛋白的有能够结合曲线也是S型，亚基与 氧气的结合是正协同的，即蛋白分子中一个位点与氧气结合增加这个分子其它位点的氧气结 合性能。为了理解ATCase酶促反应动力学和CTP抑制酶活性的基础，我们需要考察ATCase 结构。 ajey 111 10203040 [Aspartate],mM 图10.3 ATCase酶促反应动力学呈S曲线。天冬氨酸-氨基甲酰转移酶催化反应得产物形成 速度对底物AS即浓度作图呈S型曲线，表明一个活性位，点结合底物能够增加这个酶蛋白分 子其它位点的活性。因此这个酶是正协同酶。 ATCase含有独立的催化亚基和调节亚基 ATCase的催化位点和调节位点是什么？用汞类物质如p-羟基汞苯甲酸（只与巯基反应） 处理，能够将ATCase的催化亚基(c)与调节亚基(r)分开（图l0.4)。John Gerhart和Howard Schachman超离心研究显示，汞处理将ATCase分成两种亚基（图l0.5)。由于这两种亚基的 电荷和大小不同，因此可以用离子交换层析（有电荷差异）或蔗糖密度梯度离心（有大小差 异)分离。用沉降系数表述两种亚基，它们的大小分别是2.8S和5.8S。加入过量的巯基乙 醇，能够除去与分离亚基共价连接的P汞苯甲酸基团。因此可以研究分开亚基的功能。 HN Cysteine SH 0 HO -Hydroxy C00 HOH 图10.4半胱氨酸残基的修怖。对羟基汞苯甲酸与天冬氨酸-氨基甲酰转移酶关键的半胱氨酸 反应。变构调节酶不遵循米氏动力学 除了酶受其它分子调节之外，变构酶促反应对底物浓度的应答也很有特征。图 10.3 是 ATCase 酶促反应速度对底物 Asp 浓度作图的结果。这个动力学曲线与米氏方程不同，形状 像“S”。很多变构酶促动力学曲线呈 S 型。血红蛋白的有能够结合曲线也是 S 型，亚基与 氧气的结合是正协同的，即蛋白分子中一个位点与氧气结合增加这个分子其它位点的氧气结 合性能。为了理解 ATCase 酶促反应动力学和 CTP 抑制酶活性的基础，我们需要考察 ATCase 结构。 图 10.3 ATCase 酶促反应动力学呈 S 曲线。天冬氨酸-氨基甲酰转移酶催化反应得产物形成 速度对底物 Asp 浓度作图呈 S 型曲线，表明一个活性位点结合底物能够增加这个酶蛋白分 子其它位点的活性。因此这个酶是正协同酶。 ATCase 含有独立的催化亚基和调节亚基 ATCase 的催化位点和调节位点是什么？用汞类物质如 p-羟基汞苯甲酸（只与巯基反应） 处理，能够将 ATCase 的催化亚基（c）与调节亚基(r)分开（图 10.4）。John Gerhart 和 Howard Schachman 超离心研究显示，汞处理将 ATCase 分成两种亚基（图 10.5）。由于这两种亚基的 电荷和大小不同，因此可以用离子交换层析（有电荷差异）或蔗糖密度梯度离心（有大小差 异）分离。用沉降系数表述两种亚基，它们的大小分别是 2.8S 和 5.8S。加入过量的巯基乙 醇，能够除去与分离亚基共价连接的 p-汞苯甲酸基团。因此可以研究分开亚基的功能。 图 10.4 半胱氨酸残基的修饰。对羟基汞苯甲酸与天冬氨酸-氨基甲酰转移酶关键的半胱氨酸 反应