(2)有机化合物芳香族化合物具有共轭的不饱和结构,多能发生荧光,可以直接进行荧 光测定。可用荧光法测定氨基酸、蛋白质以研究蛋白质的结构。荧光法也是进行定性和定量 分析酶以及研究酶动力学和机理的有用工具。在医学和药学方面,荧光法是测定肾上腺素、青 霉素、苯巴比妥维生素、普鲁卡因等药物的灵敏方法。荧光免疫法也是医学研究的一种重要 手段.表46列出了一些有机化合物的荧光测定法。 表46某些有机化合物的荧光测定法 待测物 试剂 发光波长光波长 测定范困 c/(g·cm-3) 丙三醇 涔胺 蓝色0.1~2 糠醛 蒽酮 465 1.5-15 苯基水杨酸酯N,N′-二甲基甲酰胺(KOH) 4103×10-~5×106 mol- dm3 -萘酚 0.1 mol. dm NaOH 紫外 四氧嘧啶(阿脲)苯二胺 紫外(365) 485 维生素A 无水乙醇 氨基酸 氧化酶等 315 425 0.01~50 蛋白质 曙红丫 紫外 0.06-6 上腺素 420 00L~0.02 基丁胺 邻苯二醛 470 玻璃酸醇 3-乙酰氧基吲哚 0.033 青霉素 a-甲氧基-6-氯-9-(阝-氨 420 500 乙基)-氨基氮杂蒽 (四)磷光分析法 分子磷光光谱的原理巳经在41节中讨论过,其仪器和应用与分子荧光光谱也相似。主 要的差别是磷光是由第一激发单重态(S1)的最低能层,经系间跨越联迁到第一激发三重态 (T1),并经振动弛豫至最低振动能层然后跃迁回到基态时所产生的.与荧光相比,磷光具有 三个特点:(i)磷光辐射的波长比荧光长,这是因为分子的T1态能量比S态低(i)磷光的寿 命比荧光长。由于荧光是S1→S。跃迁产生的,这种跃迁是自旋许可的跃迁,因而S1态的辐射 寿命通常在10--10”s;磷光是T→S0跃迁产生的这种跃迁属自旋禁阻的跃迁,其速率 常数要小得多,因而辐射寿命要长,大约在10-4~10s;fi)磷光的寿命和辐射强度对于重原 子和顺磁性离子是极其敏感的 1.低温礴光 由于激发三重态的寿命长,使激发态分子发生T1>S0这种分子内部的内转化非辐射去 活化过程,以及激发态分子与周围的溶剂分子间发生碰撞和能量转移过程,或发生某些光化学 反应的几率增大,这些都将使磷光强度减弱、甚至完全消失,为减少这些去活化过程的影响, 通常应在低温下测量磷光。 95