李军等:草鱼出血病病毒的研究进展 殖,此时病毒的滴度最高,以后逐渐趋于平缓(曾令兵等、1993 现已建立起多株对GCHⅤ敏感的细胞系/株(表2)。对于野生毒株,一开始对培养 细胞的感染力较弱,往往没有CPE,盲传吒代甚至十几代后,病毒感染力随传代逐渐增 强、才出现明显而稳定的 CPE. GCHⅣⅤ感染细胞,有的毒株可感染单层培养细胞产生 CPE而有的毒株不产生CPE但能在培养细胞中复制(李军等,1998),GCHV感染细胞 的能力与其感染鱼体的毒力并不都是一致的:其一,有的毒株(如GCHV873)对培养细胞 的感染力较强,但是对鱼体的毒力却较弱;有的毒株恰恰相反(如GCHv861)(李军等 对草鱼出血病病毒敏感的细胞系 Tah. 2 Sensitve cell hnes to Grass Carp of Haemorrhage Virus zC-79 草鱼呦端组织张念慈等(19861 CF-84 草鱼鳍条组织王迎喜等(198611 草鱼肾脏组织左文功等(1984) 草鱼囊胚组织Wang等(1993) CCK-8 草鱼肾脏组织邓初夏等(1985) 稀有鯽囊胚组织王铁辉u1995) GCCF-2 草鱼尾鳍组织魏彦章等(1987) GAB-80 鲫鱼胚胎组织陈敏容等(1985) GCG 草鱼卵巢组织陈蕪新等(y86)2 BCC 团头鲂尾蜱组织邓初夏等(985 1)王迎喜、1%86.草鱼呼肠孤病毒( Reovirus)感染鳍条细胞株、鱼病简讯,4:2-5 )阵燕新,李正秋,198,草鱼呼畅孤病毒的离体培养及超微病变,鱼病简讯2:1-2 1998)其二,GCHV对培养细胞的特异性往住较对鱼体的特异性差,例如,GCHV不能感 染团头鲂但能感染其组织细胞系BCC(邓初夏等.1985) 7草鱼出血病病毒的致病机理及宿主范围 围草鱼鱼种感染GCHV后,在潜伏期和发展期,鱼体红血球、血浆总蛋白、血和尿素 氮明显减少,病鱼乳酸脱氢酶(SLDH)同功酶紊乱。在某些感染鱼中,SLDH明显多出 条区带(朱心玲等,1987)。在出血病流行期间,其它血液学指标也有相似的变化,如:血 清钾含量增加,钙含量减少;病鱼白细胞和淋巴细胞百分率降低,单核细胞和中性粒细胞 百分率增高,各脏器小血管内皮广泛受损,引起弥散性血管内凝血并形成微血栓,耗去 大量凝血因子,引起出血,使循环血量大为减少,由于微血栓形成和血液淤带,阻闭了局 部的微循环,使正常代谢发生障碍.导致脏器组织病变(郑崇德等,1986 组织病理学研究结果表明,病毒能在草鱼血管及微血管内皮细胞、脾网状细胞、肾、 肠道等组织中复制.而在肝脏、肌肉和鳃未发现病毒颗粒(中国科学院水生生物研究所三 室病毒组.1980;丁清泉等、1990)。但是王铁辉等(1993)在研究感染出血病的稀有餉鲫 的细胞病理中发现,鳃是GCV侵袭的主要组织,并认为也可能是GCHV感染草鱼及其 它鱼类的主要人侵途径。另外,毛树坚等(1988)通过电镜也有关于在病鱼的肌内等组织 中观察到GCH颗粒的报道,李军等(1997应用 RT-PCR技术对人工感染的草鱼出血 病病鱼的不同组织进行了检测,结果显示,肝脏、肾脏和肠道的扩增条带较亮,肌肉和鳃 次之,睥脏最弱。说明前几种组织中GCHⅣV含量较高。邰鄙健忠等(1996)应用 Dof--ELISA 技术对患出血病草鱼的不同组织进行检测.也得到类似的结果,都说明肝脏中含有较多 的病毒颗粒,证实肝脏也是GCHV侵染的主要器官.这同以往电镜观察结果不一致,其 原因可能是其它组织中的病毒颗粒释放到血液中,随血液循环抵达这些器官并在这些组4 期 李 军 等 ：草鱼 出血 病病 毒 的研 究 进展 殖 ，此 时病 毒的滴 度最高 ，以后逐渐 趋于 平缓 (曾令兵等 ，1993)。 现 已建 立起 多 株 对 GCHV 敏 感 的 细 胞 系 ／株 (表 2)。 对 于 野 生 毒 株 ，一 开 始 对 培 养 细 胞 的 感 染 力 较 弱 ，往 往 没 有 CPE，盲传 几 代 甚 至 十 几 代 后 ，病 毒 感 染 力 随 传 代 逐 渐 增 强 ，才 出 现 明 显 而 稳 定 的 CPE。 GCHv感 染 细 胞 ，有 的 毒 株 可 感 染 单 层 培 养 细 胞 产 生 CPE，而有 的毒株 不产 生 CPE但能 在培养 细胞 中复 制 (李军 等，l998) GCHV 感染 细胞 的 能 力 与其 感 染 鱼 体 的 毒 力 并 不 都 是 一 致 的 ：其 一 ，有 的毒 株 (如 GCHV873)对 培 养 细 胞 的感 染 力 较强 ，但是 对鱼 体 的 毒力 却较 弱 ；有 的 毒株恰 恰 相 反 (如 GCHV861)(李 军等 ， 表2 对草 鱼出血 病病 毒敏 赔的 细胞 系 Tab2 Settsitive celllines to Grass Carp of Haem orrhagic v irus 细胞 系 组 织 来源 文 献 细胞 系 组织 来源 文 寿} zC_19O】 草鱼 吻端组 织 张念 慈等 (】986) CF-84 草鱼鳍 条组织 壬迎 喜 等 (1986)” CIK 草鱼 肾脏 组织 左支 功等 (1984】 GCB 草鱼 囊胚组 织 Wang~ (】993) CCK-84 草鱼 肾脏 组织 邓初 夏等 (1985) GRE 稀有鲫 囊胚组 织 王铁 辉 【1995) GCCY~2 草鱼尾 晴组 织 魏 彦 章等 【I987j GAB 8O 鲫 鱼胚胎 组织 陈敏奢等 (1985】 GCO 草 鱼卵 巢组 织 陈燕 新等 (1986) BCC 团头鲔 尾鳍组 织 邓 韧夏等 【I985) 1) 王 迎 喜 ，】986．草 鱼 呼 肠 孤 病 毒 (Reovirus)感 染 鳍 条 蛔 胞 株 ，量 腑 伺 讯 ，4：2- 5 2)陈燕新 ，李 正秋 ．1986 草鱼 呼肠 孤病 毒的 离体培养 厦超诱 病变 鱼病 简讯 ，2 I- 2 1998)；其 二 ，GCHV 对 培 养 细 胞 的 特 异 性 往 往 较 对 鱼 体 的 特 异 性 差 ，例 如 ，GCHV 不 能 感 染 团 头 鲂 但 能感 染 其 组 织 细 胞 系 BCC(邓 初 夏 等 ，1985)。 7 草 鱼出血病 病毒的致病机理及宿主范围 围草鱼 鱼种感 染 GCHV后 ，在 潜伏期和 发展期 ，鱼 体红血球 、血浆 总蛋 白、血 和尿素 氮 明显减 少 ，病 鱼乳 酸脱氢 酶 (sLDH)同功酶紊 乱。在某 些感 染鱼 中，SLDH明显多 出一 条 区带 (朱心 玲等 ，1987)。 在 出血 病流 行期 间 ，其它血 液 学指标 也有相 似 的变化 ，如 ：血 清钾含 量增加 ，钙含量 减少 ；病鱼 白细 胞和淋 巴细胞 百分 率降低 ，单核 细胞和 中性粒 细胞 百 分 率 增 高 各 脏 器 小 血 管 内 皮 广 泛 受 损 ，引 起 弥 散 性 血 管 内 凝 血 并 形 成 微 血 栓 ，耗 去 大 量 凝 血 因 子 ，引 起 出 血 ，使 循 环 血 量 大 为 减 少 ，由 于 微 血 栓 形 成 和 血 液 淤 带 ，阻 闭 了 局 部的微循 环，使 正常代谢 发生 障碍，导致脏 器组 织病变 (郑崇德等 ，1986)。 组 织 病 理 学 研 究 结 果 表 明 ，病 毒 能 在 草 鱼 血 管 及 微 血 管 内 皮 细 胞 、脾 网状 细 胞 、肾 、 肠 道等组织 中复制 ，而在肝 脏、肌 肉和鳃未 发现病 毒颗粒 (中 国科学 院水生 生物 研究所 三 室病毒 组，l980；丁清泉 等 ，1990)。但是 王铁辉 等 (1993)在 研究 感染 出血 病的稀有 壹句鲫 的细胞病理 中发现 ，鳃是 GCHV侵袭 的主要 组织 ，并认 为也可 能是 GCHV感染 草鱼及其 它鱼 类的主要人 侵途径 。另外 ，毛树坚 等 (1988)通 过 电镜也 有关于在病鱼 的肌 内等组织 中观 察 到 GCH~ 颗 粒 的 报 道 李 军 等 (1997)应 用 RT—PCR技 术 对 人 工 感 染 的 草 鱼 出血 病 病 鱼 的 不 同 组 织 进 行 了 检 测 结 果 显 示 ，肝 脏 、肾 脏 和 肠 道 的 扩增 条 带 较 亮 ，肌 肉和 鳃 次 之 ，脾 脏 最 弱 。说 明 前 几 种 组 织 中 GCHV 含 量 较 高 。邵 健 忠 等 (1996)应 用 Dot-ELISA 技 术 对 患 出 血 病 草 鱼 的 不 同 组 织 进 行 检 测 ，也 得 到 类 似 的 结 果 ，都 说 明肝 脏 中 含 有 较 多 的病 毒颗 粒 证 实肝脏也是 GCHV侵染 的主要器官 。这 同以往 电镜观察结 果不一致 ，其 原 因 可 能 是 其 它 组织 中 的病 毒 颗 粒 释 放 到 血 液 中 ，随血 液 循 环抵 达 这 些 器 官 并 在 这 些 组 维普资讯 http://www.cqvip.com