常数，只适合于该特定条件下，而不是对各种试剂均可通用。 根据以上叙述可以看出，在这种方法中阴性对照和阳性对照也起到试验的质控作用，试剂变质和操 作不当均会产生“试验无效“的后果。 b.标本/阴性对照比值 在实验条件（包括试剂）较难保证恒定的情况下，这种判断法较为合适。在得出标本(S)和阴性对 照(N)的A值后，计算S/N值.也有写作P/N的，这里的P不代表阳性(positive),而是病人(patient) 的缩写，不应误解。为避免混酒，更宜用S/N表示。在早期的间接法LIS中，有些作者定出S/N 为阳性标准，现多为各种测定所沿用。实际上每一测定系统应该用实验求出各自的S小的阀值。更 应注意的是，N所代表的阴性对照是不含受检物质的人血清。有的试剂盒中所设阴性对照为不含蛋 白质或蛋白质含量较底的缓冲液，以致反应后产生的本底可能较正常人血清的本底低得多。因此， 这类试剂盒规，如N<0.05(或其他数值)，则按0.05计算，否则将出现假阳性结果。 (2)竞争法 在竞争法LISA中，阴性孔呈色深于阳性孔。阴性呈色的强度取决于反应中醇结合物的浓度和加入 竞争抑制物的量，一般调节阴性对照的吸光度在1.0-1.5之间，此时反应最为敏感 竞争法LISA不易用自视判断结果，因肉眼很难辨别弱阳性反应与阴性对照的显色差异，一般均用 比色计测定，读出S、P和N的吸光值。计算方法主要也有两种，即阳性判定值法和抑制率法。 a。阳性判定值法 与间接法和夹心法中的阳性判定值法基本相同，但在计算公式中引入阳性对照A值，现举某种检测 抗Bc的试剂盒为例。试剂盒中的阴性对照为不含抗Bc的复钙人血浆，阳性对照中抗Bc含量为 125士100u/ml。每次试验设2个阳性对照和3个阴性对照。测得A值后，先计算阴性对照A值的平 均值(CX)和阳性对照A值的平均数(PCX),两个平均数的差(N-P)必须大于一个特定的数值（例 如0.300)，试验才有效。3个阴性对照A值均应小于2.000，而且应≥0.5×NCX并≤1.5×CX,如 其中之一超出此范围，则弃去，而以另2个阴性对照重新计算×NCX:如有2个阴性对照A超出以上 范围，则该次实验无效。阳性判定值按下式计算： 阴性判定值=0.4XNCX+0.6×PCX 标本A值≤阳性判定值的反应为阳性，A>阳性判定值的反应为阴性。 b.抑制率法 抑制率表示标本在竞争结合中标本对阴性反应显色的抑制程度，按下式计算： 抑制率(%)=（阴性对照A值-标本A值）X100%/阴性对照A值 一般规定抑制率≥50%为阳性，<50%为阴性。常数，只适合于该特定条件下，而不是对各种试剂均可通用。 根据以上叙述可以看出，在这种方法中阴性对照和阳性对照也起到试验的质控作用，试剂变质和操 作不当均会产生"试验无效"的后果。 b.标本/阴性对照比值 在实验条件（包括试剂）较难保证恒定的情况下，这种判断法较为合适。在得出标本（S）和阴性对 照（N）的 A 值后，计算 S/N 值。也有写作 P/N 的，这里的 P 不代表阳性(positive)，而是病人（patient） 的缩写，不应误解。为避免混淆，更宜用 S/N 表示。在早期的间接法 ELISA 中，有些作者定出 S/N 为阳性标准，现多为各种测定所沿用。实际上每一测定系统应该用实验求出各自的 S/N 的阈值。更 应注意的是，N 所代表的阴性对照是不含受检物质的人血清。有的试剂盒中所设阴性对照为不含蛋 白质或蛋白质含量较底的缓冲液，以致反应后产生的本底可能较正常人血清的本底低得多。因此， 这类试剂盒规，如 N<0.05（或其他数值），则按 0.05 计算，否则将出现假阳性结果。 （2）竞争法 在竞争法 ELISA 中，阴性孔呈色深于阳性孔。阴性呈色的强度取决于反应中酶结合物的浓度和加入 竞争抑制物的量，一般调节阴性对照的吸光度在 1.0-1.5 之间，此时反应最为敏感。 竞争法 ELISA 不易用自视判断结果，因肉眼很难辨别弱阳性反应与阴性对照的显色差异，一般均用 比色计测定，读出 S、P 和 N 的吸光值。计算方法主要也有两种，即阳性判定值法和抑制率法。 a. 阳性判定值法 与间接法和夹心法中的阳性判定值法基本相同，但在计算公式中引入阳性对照 A 值，现举某种检测 抗 HBc 的试剂盒为例。试剂盒中的阴性对照为不含抗 HBc 的复钙人血浆，阳性对照中抗 HBc 含量为 125±100u/ml。每次试验设 2 个阳性对照和 3 个阴性对照。测得 A 值后，先计算阴性对照 A 值的平 均值（NCX）和阳性对照 A 值的平均数（PCX），两个平均数的差（N-P）必须大于一个特定的数值（例 如 0.300）,试验才有效。3 个阴性对照 A 值均应小于 2.000，而且应≥0.5×NCX 并≤1.5×NCX，如 其中之一超出此范围，则弃去，而以另 2 个阴性对照重新计算×NCX；如有 2 个阴性对照 A 超出以上 范围，则该次实验无效。阳性判定值按下式计算： 阴性判定值=0.4×NCX+0.6×PCX 标本 A 值≤阳性判定值的反应为阳性，A＞阳性判定值的反应为阴性。 b. 抑制率法 抑制率表示标本在竞争结合中标本对阴性反应显色的抑制程度，按下式计算： 抑制率（%）= （阴性对照 A 值-标本 A 值）×100%/阴性对照 A 值 一般规定抑制率≥50%为阳性，＜50%为阴性