-04卡 0.34◆NaD 02 氧 -0.07 还原 0 +0.05- 的 +02 +0.25 伏特 +028 +04 +06 +0.8+0.82 图6-3血红素A结构式 铁卟啉辅基所含Fe2+可有Fε2+←一Fe3+e的互变,因此起到传递电子的作用。铁原子可以和酶蛋白及卟啉环形成6个配位键。细胞色素 a3和P?450铺基中的铁原子只形成5个配位键,还能与氧再形成一个配位键,将电子直接传递给氧,也可与CO、氰化物、H2S或叠氨化合物形 成一个配位键。细胞色素aa3与氰化物结合就阻断了整个呼吸链的电子传递,引起氰化物中毒。 二、呼吸链中各种传递体的排列顺序 (一确定排列顺序的方法 1标准氧化还原电位的数值表示氧化还原能力的大小,标准氧化还原电位负值越大,其还原性越强,容易被氧化:标准氧化还原电位正值 越大,其氧化性越强,容易被还原。因此呼吸链中各种组分的排列顺序应当由低电位依次向高电位排列(图·4)。 100 00 分数 2 NAD FP b c NAD FP b 图64各种传递体的标准氧化还原电位 2.还原程度来确定。Chance和Williams使用分光光度法测定离体的线粒体在有氧条件下三羧酸循环反应达到平衡时,呼吸链中各种传递体 的还原程度。反应达到平衡时从底物一侧到氧一侧的各种传递体的还原程度应当是递减的,底物的一侧最高,氧一侧最低,如下表中数据所 示。 表6.1有氧动态平衡时电子传递体的还原程度 传递体 NAD FP Cytb Cyte Cty aa3 还原型% 53 20 16 6 1 FP:黄素蛋白 这种情况好象物理学上的联通管,图6?中,若进水量等于出水量,即流量达到平衡时,离进水口最近的水管中水位最高,离出水管最近 的水管中水位最低,从进水管到出水管水位逐渐减低,若把水流视为电子流,就是上述实验中的情况。 3使用特异的抑制剂特异的抑制剂能阻断呼吸链中的特定环节,阻断部位的底物一侧的各种传递体应为还原型,阻断部位的氧一侧的各 种传递体应为氧化型,正象我们阻断联通管的底部一样,阻断部位以前的各水管中水是满的,而阻断部位以后的各水管中水均流光(见图6-5, B). 2H* FMNH SH/NAD*AL(Fe-S) CoQ2Ct-Fe“ 0 FMN 1 Fe-s) CoQH 2-F2八0H,0 +H* 图6-5有氧氧化稳定时各种传递体的还原太分数 A.不加抑制剂B.加入抗霉A阻断 复合物I:催化NADH氧化、CoQ还原。 复合物:催化琥珀酸氧化、CoQ还原图6-3 血红素A结构式 铁卟啉辅基所含Fe2+可有Fe2+←→Fe3++e的互变,因此起到传递电子的作用。铁原子可以和酶蛋白及卟啉环形成6个配位键。细胞色素 aa3和P?450辅基中的铁原子只形成5个配位键,还能与氧再形成一个配位键,将电子直接传递给氧,也可与CO、氰化物、H2S或叠氮化合物形 成一个配位键。细胞色素aa3与氰化物结合就阻断了整个呼吸链的电子传递,引起氰化物中毒。 二、呼吸链中各种传递体的排列顺序 (一)确定排列顺序的方法 1.标准氧化还原电位的数值表示氧化还原能力的大小,标准氧化还原电位负值越大,其还原性越强,容易被氧化;标准氧化还原电位正值 越大,其氧化性越强,容易被还原。因此呼吸链中各种组分的排列顺序应当由低电位依次向高电位排列(图-4)。 图6-4 各种传递体的标准氧化还原电位 2.还原程度来确定。Chance和Williams使用分光光度法测定离体的线粒体在有氧条件下三羧酸循环反应达到平衡时,呼吸链中各种传递体 的还原程度。反应达到平衡时从底物一侧到氧一侧的各种传递体的还原程度应当是递减的,底物的一侧最高,氧一侧最低,如下表中数据所 示。 表6-1 有氧动态平衡时电子传递体的还原程度 传递体 NAD FP Cyt b Cyt c Cty aa3 还原型% 53 20 16 6 1 FP:黄素蛋白 这种情况好象物理学上的联通管,图6?A中,若进水量等于出水量,即流量达到平衡时,离进水口最近的水管中水位最高,离出水管最近 的水管中水位最低,从进水管到出水管水位逐渐减低,若把水流视为电子流,就是上述实验中的情况。 3.使用特异的抑制剂 特异的抑制剂能阻断呼吸链中的特定环节,阻断部位的底物一侧的各种传递体应为还原型,阻断部位的氧一侧的各 种传递体应为氧化型,正象我们阻断联通管的底部一样,阻断部位以前的各水管中水是满的,而阻断部位以后的各水管中水均流光(见图6-5, B)。 图6-5 有氧氧化稳定时各种传递体的还原太分数 A.不加抑制剂 B.加入抗霉A阻断 复合物Ⅰ:催化NADH氧化、CoQ还原。 复合物Ⅱ:催化琥珀酸氧化、CoQ还原