全自动基酸分析仪的测定原理。 (2)厦基酸序列的测定 ①端基标记法 DNFB法(Sanger法)N-端卤代烃的亲核取代 O2NF+H2NCHCONHCHCO NO2 R HNCHCONHCHCO NO2 R R -HNCHCOOH H2NCHCOOH +.... NO2 R Edman法N-端—异氰酸的劬加成 R 0 C6H5N=C=S HHNCHC-NHCHC OH- 异硫酸酯 0 -NHCH HCL C6HSNH NH H2NCHC- R' 0=C CH-R R 苯基乙内酰硫脲 缩短后的肽链可以继续进行第二个、第三个…N-端标记 一多肽顺序自动分析仪。 次可连续测出60个以上氨基酸顺序。 酶解法C端—逐步水解 用羧肽酶A水解氨基酸。如果氨基酸的侧链为芳香环或比较大的烃基，水解反应更容易 进行。 测定出多肽的结构，就可以在实验室里进行多肽的人工合成。但由于复基酸分子中可发 生反应的部位很多，所以对于不希望发生反应的基团腰加以保护，对希望反应的县团要使其 活化。所加的活化试剂和保护试济剂必须易于和被活化、被保护部位反应，又不与其它基团反 应，反应后易于除去，除去时又不影响其它基团和已形成的太键。由此可见，多肽的人工合 成比起氨基酸的顺序测定更为复杂。 四、多肽的性质