沙门氏杆菌不能分解乳糖，用“_”表示。 (二)伏一普(Voges-proskauer)氏试验（简称V-P试验） 1原理某些细菌（如产气杆菌、阴沟杆菌等），能分解葡萄糖产生丙酮酸，再进一步将 丙酮酸脱羧，变为乙酰甲基甲醇。加KO州溶液后，在碱性环境下，乙酰甲基甲醇被空气中 的氧氧化为二乙酰，二乙酰与培养基内蛋白胨中精氨酸所含的肌基发生反应，生成红色的化 合物。在培养基中加入少量含胍基的化合物（如肌酸或肌配等），可以加速这个反应。在加 KOH前，先加入a萘酚，也可提高试验的敏感性。 2.试剂 甲液50gL α-萘酚无水乙醇溶液（含3gL肌酸) 乙液400gL 氢氧化钾溶液 3.方法将被检菌接种于葡萄糖蛋白胨水培养管中，经37℃培养48。加入甲液、乙液 各一滴，充分摇动培养管，观察结果。 4.结果如立即或于数分钟内出现橙红色或红色反应者为阳性。不变色者，将培养管放 37℃中4h后再进行观察，若仍不变色或仅呈淡褐色者为阴性。产气杆菌为阳性，大肠杆菌为 阴性。 (三)甲基红试验(MR试验) 1原理某些细菌能分解葡萄糖产生丙酮酸、丙酮酸再被分解，则可产生甲酸、乙酸、 琥珀酸、乳酸等，这样使培养基的pH降至4.5以下，这时加入甲基红指示剂呈红色。甲基红 指示剂变色范围为pH44(红色)6.2（黄色）。若细菌分解葡萄糖产酸量少，或产生的酸进 一步转化为其他物质（如醇、酮、醛、气体和水等），则培养基的酸度仍在pH6.2以上，故加 入甲基红指示剂呈黄色为阴性。 2.试剂甲基红0.02g溶于60ml95%乙醇中，加蒸馏水至100ml. 3.方法将细菌接种在葡萄糖蛋白陈水中，在37℃培养3-4，加入MR试剂1-2滴，观 察反应结果。 4.结果红色反应为阳性，无色反应为阴性。例如，大肠杆菌为阳性，产气杆菌为阴性。 (四)石蕊牛乳试验 1原理牛乳中含有大量的乳糖和酪蛋白，营养丰富，一般细菌均可在其中生长。但各 种细菌对这些物质的分解能力不同，可观察的反应也不同。有的细菌如产气荚膜杆菌，对牛 乳具有强烈发酵反应，产酸、产气、凝固、胨化几乎同时发生，所产生的气体，可将培养基 表层的凡士林冲至管口，牛乳可全被胨化变清，这种现象被称为“汹涌发酵”，为该菌所特有。 有的细菌不发酵乳糖，而分解含氨物质，生成氨及胺，使培养基变为碱性，石蕊指示剂变为 蓝紫色。 2.方法将被检细菌接种于石蕊牛乳培养基中，置37℃温箱中培养1-7。 3.结果出现“汹涌发酵”，牛乳陈化变清，为产气荚膜杆菌。无变化或出现蓝紫色为其 15 15 沙门氏杆菌不能分解乳糖，用 “＿”表示。 （二）伏—普（Voges-proskauer）氏试验（简称 V-P 试验） 1.原理 某些细菌（如产气杆菌、阴沟杆菌等），能分解葡萄糖产生丙酮酸，再进一步将 丙酮酸脱羧，变为乙酰甲基甲醇。加 KOH 溶液后，在碱性环境下，乙酰甲基甲醇被空气中 的氧氧化为二乙酰，二乙酰与培养基内蛋白胨中精氨酸所含的肌基发生反应，生成红色的化 合物。在培养基中加入少量含胍基的化合物（如肌酸或肌配等），可以加速这个反应。在加 KOH 前，先加入 α-萘酚，也可提高试验的敏感性。 2．试剂 甲液 50g/L α-萘酚无水乙醇溶液（含 3g/L 肌酸） 乙液 400g/L 氢氧化钾溶液 3.方法 将被检菌接种于葡萄糖蛋白胨水培养管中，经 37℃培养 48h。加入甲液、乙液 各一滴，充分摇动培养管，观察结果。 4.结果 如立即或于数分钟内出现橙红色或红色反应者为阳性。不变色者，将培养管放 37℃中 4h 后再进行观察，若仍不变色或仅呈淡褐色者为阴性。产气杆菌为阳性，大肠杆菌为 阴性。 （三）甲基红试验（MR 试验） 1.原理 某些细菌能分解葡萄糖产生丙酮酸、丙酮酸再被分解，则可产生甲酸、乙酸、 琥珀酸、乳酸等，这样使培养基的 pH 降至 4.5 以下，这时加入甲基红指示剂呈红色。甲基红 指示剂变色范围为 pH4.4（红色）-6.2（黄色）。若细菌分解葡萄糖产酸量少，或产生的酸进 一步转化为其他物质（如醇、酮、醛、气体和水等），则培养基的酸度仍在 pH6.2 以上，故加 入甲基红指示剂呈黄色为阴性。 2.试剂 甲基红 0.02g,溶于 60ml 95 %乙醇中，加蒸馏水至 l00ml。 3.方法 将细菌接种在葡萄糖蛋白陈水中，在 37℃培养 3-4d，加入 MR 试剂 1-2 滴，观 察反应结果。 4.结果红色反应为阳性，无色反应为阴性。例如，大肠杆菌为阳性，产气杆菌为阴性。 （四）石蕊牛乳试验 1.原理 牛乳中含有大量的乳糖和酪蛋白，营养丰富，一般细菌均可在其中生长。但各 种细菌对这些物质的分解能力不同，可观察的反应也不同。有的细菌如产气荚膜杆菌，对牛 乳具有强烈发酵反应，产酸、产气、凝固、胨化几乎同时发生，所产生的气体，可将培养基 表层的凡士林冲至管口，牛乳可全被胨化变清，这种现象被称为“汹涌发酵”，为该菌所特有。 有的细菌不发酵乳糖，而分解含氮物质，生成氨及胺，使培养基变为碱性，石蕊指示剂变为 蓝紫色。 2.方法 将被检细菌接种于石蕊牛乳培养基中，置 37℃温箱中培养 1-7d。 3.结果 出现“汹涌发酵”，牛乳胨化变清，为产气荚膜杆菌。无变化或出现蓝紫色为其