实验四细菌的生化试验 一、实验目的要求 了解各种常用的细菌生化试验原理、方法和结果判断 二、实验用品 隔水式恒温培养箱、电冰箱、高压蒸汽灭菌器、天平、接种环、酒精灯、试管、营养琼 脂、甲萘粉、浓盐酸、95%酒精、葡萄糖、乳糖、麦芽糖、蔗糖、甲基红、氢氧化钾、对二 甲氨基苯甲醛、精密pH试纸、试管架、二甲苯、火柴。 三、实验方法及步骤 基本原理 不同种类的细菌产生的酶类活性不同，因此，在代谢过程中产生分解产物和合成产物各 不相同。细菌学检验工作中利用细菌生化特性，以生物化学方法来鉴别细菌，称为生化试验。 此类试验，特别是细菌分解各种碳水化合物、蛋白质、氨基酸以及生物氧化（呼吸）的酶和 产物的测定，在细菌的鉴定中极为重要，方法也很多，以下介绍一些基本的生化试验方法。 近年来出现的各类细菌快速微量系列生化检验的方法，都是在这些基本方法的基础上发展起 来的。各项生化试验的具体原理分别见各试验。 常用生化试验 (一)糖发酵试验 1.原理各种细菌具有的酶不同，有的细菌能分解某些糖类而产酸产气，有的细菌虽能 分解某种糖类，但只产酸不产气，有的细菌则不能分解。借此特点，可以鉴别细菌。 2方法将需要鉴别的细菌纯培养物，分别接种在各种含指示剂的糖发酵管内，将发酵 管倒置于37℃温箱中培养，培养的时间随试验的要求及细菌分解能力而定，可按各类细菌鉴 定方法所规定的时间进行。 常用的单糖发酵管主要有葡萄糖、阿拉伯糖、甘露糖、果糖、木糖及半乳糖等：双糖主 要有乳糖、麦芽糖、蔗糖及草糖等：多糖发酵管主要有菊糖、肝糖、糊精、淀粉等：醇类发 酵管主要有甘露醇、卫矛醇、山梨醇、侧金盏花醇（福寿草醇）、肌醇、甘油等。糖甙发酵管 主要有水杨甙、七叶甙、松柏苷等。 3结果产酸产气时，可使培养基的指示剂变色，并可在发酵管内顶端出现气泡：只产 酸时仅见发酵管内培养基颜色改变，不见气泡：不分解者无反应。如大肠杆菌分解乳糖产酸 产气：用“⊕”表示，金黄色葡萄球菌虽能分解乳糖，但产酸不产气，用“+”表示：马流产 1414 实验四 细菌的生化试验 一、实验目的要求 了解各种常用的细菌生化试验原理、方法和结果判断。 二、实验用品 隔水式恒温培养箱、电冰箱、高压蒸汽灭菌器、天平、接种环、酒精灯、试管、营养琼 脂、甲萘粉、浓盐酸、95%酒精、葡萄糖、乳糖、麦芽糖、蔗糖、甲基红、氢氧化钾、对二 甲氨基苯甲醛、精密 pH 试纸、试管架、二甲苯、火柴。 三、实验方法及步骤 基本原理 不同种类的细菌产生的酶类活性不同，因此，在代谢过程中产生分解产物和合成产物各 不相同。细菌学检验工作中利用细菌生化特性，以生物化学方法来鉴别细菌，称为生化试验。 此类试验，特别是细菌分解各种碳水化合物、蛋白质、氨基酸以及生物氧化（呼吸）的酶和 产物的测定，在细菌的鉴定中极为重要，方法也很多，以下介绍一些基本的生化试验方法。 近年来出现的各类细菌快速微量系列生化检验的方法，都是在这些基本方法的基础上发展起 来的。各项生化试验的具体原理分别见各试验。 常用生化试验 （一）糖发酵试验 1.原理 各种细菌具有的酶不同，有的细菌能分解某些糖类而产酸产气，有的细菌虽能 分解某种糖类，但只产酸不产气，有的细菌则不能分解。借此特点，可以鉴别细菌。 2.方法 将需要鉴别的细菌纯培养物，分别接种在各种含指示剂的糖发酵管内，将发酵 管倒置于 37℃温箱中培养，培养的时间随试验的要求及细菌分解能力而定，可按各类细菌鉴 定方法所规定的时间进行。 常用的单糖发酵管主要有葡萄糖、阿拉伯糖、甘露糖、果糖、木糖及半乳糖等；双糖主 要有乳糖、麦芽糖、蔗糖及蕈糖等；多糖发酵管主要有菊糖、肝糖、糊精、淀粉等；醇类发 酵管主要有甘露醇、卫矛醇、山梨醇、侧金盏花醇（福寿草醇）、肌醇、甘油等。糖甙发酵管 主要有水杨甙、七叶甙、松柏苷等。 3.结果 产酸产气时，可使培养基的指示剂变色，并可在发酵管内顶端出现气泡；只产 酸时仅见发酵管内培养基颜色改变，不见气泡；不分解者无反应。如大肠杆菌分解乳糖产酸 产气；用“⊕”表示，金黄色葡萄球菌虽能分解乳糖，但产酸不产气，用“+”表示；马流产