置37℃恒温箱中培养。 (二)厌氧菌常用的培养基和纯培养方法 1熟肉培养基接种法熟肉培养基适用于第一代增菌培养。 原理：利用培养基中的熟肉有不饱和脂肪酸和麸氨酸能吸收培养基的氧，使氧化还原电 势下降，造成厌氧环境。 方法：接种前先将培养基加热至沸，并立即于流水中使之迅速冷却，以除去溶于液体中 的气体。接种后，加入灭菌液体石蜡少许，以隔绝空气并防其进入，效果更佳。 2.高层琼脂穿刺接种法加热溶化葡萄糖高层琼脂，置流水中使之迅速冷却、凝固，以 排除内部空气。然后穿刺接种厌氧菌，并用烧灼接种环融封穿刺孔，置37℃温箱中培养。 3.试管厌氧培养法(Buchner氏试管法)取一大试管，在管底放焦性没食子酸0.Sg及 玻璃珠数个，将已接种的试管置大试管中，加入20%氢氧化钠，迅速塞封管口，置37℃温箱 中培养。 细菌移植方法 1接种环移植法按图实5-4，以左手拇指与食指持一支菌种试管，食指与中指持一支待 接种的琼脂斜面试管，斜面均向上，管口并齐，管底握于掌中：以右手执接种环，并进行火 焰灭菌：以右手的中指和无名指扭开并夹住第一管的棉塞，无名指和小指扭开并夹住第二管 的棉塞，或以小指同时扭开并夹住两管的棉塞；将管口通过火焰灭菌：然后用烧灼灭菌后冷 却的接种环伸入菌种管琼脂斜面上取少许菌，可按图实55中的一种方式接种于无菌的琼脂 斜面上：同样将管口通过火焰灭菌，塞好棉塞，最后将接种环烧灼灭菌，用蜡笔在试管上标 记菌名、日期，置37℃温箱中培养。厌氧菌移植的常用培养基和培养方法如三、（二）项。 图实54试管移植 图实55斜面接种线方 2.吸管或注射器移植法欲移植定量的液体培养物或表面有液体石蜡油的厌氧菌培养 物，也可以利用吸管或注射器移植，其操作方法系以无菌吸管或无菌注射器吸取培养物，代 替接种环进行移植。 四、作业 1.试述细菌分离培养的目的。 2观察记录实验结果。 13 13 置 37℃恒温箱中培养。 （二）厌氧菌常用的培养基和纯培养方法 1.熟肉培养基接种法 熟肉培养基适用于第一代增菌培养。 原理：利用培养基中的熟肉有不饱和脂肪酸和麸氨酸能吸收培养基的氧，使氧化还原电 势下降，造成厌氧环境。 方法：接种前先将培养基加热至沸，并立即于流水中使之迅速冷却，以除去溶于液体中 的气体。接种后，加入灭菌液体石蜡少许，以隔绝空气并防其进入，效果更佳。 2.高层琼脂穿刺接种法 加热溶化葡萄糖高层琼脂，置流水中使之迅速冷却、凝固，以 排除内部空气。然后穿刺接种厌氧菌，并用烧灼接种环融封穿刺孔，置 37℃温箱中培养。 3．试管厌氧培养法（Buchner 氏试管法） 取一大试管，在管底放焦性没食子酸 0.5g 及 玻璃珠数个，将已接种的试管置大试管中，加入 20%氢氧化钠，迅速塞封管口，置 37℃温箱 中培养。 细菌移植方法 1.接种环移植法 按图实 5-4，以左手拇指与食指持一支菌种试管，食指与中指持一支待 接种的琼脂斜面试管，斜面均向上，管口并齐，管底握于掌中；以右手执接种环，并进行火 焰灭菌；以右手的中指和无名指扭开并夹住第一管的棉塞，无名指和小指扭开并夹住第二管 的棉塞，或以小指同时扭开并夹住两管的棉塞；将管口通过火焰灭菌；然后用烧灼灭菌后冷 却的接种环伸入菌种管琼脂斜面上取少许菌，可按图实 5-5 中的一种方式接种于无菌的琼脂 斜面上；同样将管口通过火焰灭菌，塞好棉塞，最后将接种环烧灼灭菌，用蜡笔在试管上标 记菌名、日期，置 37℃温箱中培养。厌氧菌移植的常用培养基和培养方法如三、（二）项。 2.吸管或注射器移植法 欲移植定量的液体培养物或表面有液体石蜡油的厌氧菌培养 物，也可以利用吸管或注射器移植，其操作方法系以无菌吸管或无菌注射器吸取培养物，代 替接种环进行移植。 四、作 业 1.试述细菌分离培养的目的。 2.观察记录实验结果