的培养基上，称为钓菌。钓取一个菌落培养出来的细菌培养物，称为纯培养物。纯培养的目 的在于对分离出的病原菌进一步进行鉴定和其他试验研究。 (一)需氧菌的纯培养方法 首先用肉眼或放大镜观察并选择可疑的单个菌落，然后以蜡笔在可疑菌落下面的平皿底上 作一记号，用灭菌的接种环（针）轻轻接触菌落，蘸取菌料少许，作抹片、染色、镜检。若 其染色和形态与怀疑的致病菌一致，即接种于适当的培养基，置37℃恒温箱中培养。 (二)厌氧菌常用的培养基和纯培养方法 1熟肉培养基接种法熟肉培养基适用于第一代增菌培养。 原理：利用培养基中的熟肉有不饱和脂肪酸和戴氨酸能吸收培养基的氧，使氧化还原电 势下降，造成厌氧环境。 方法：接种前先将培养基加热至沸，并立即于流水中使之迅速冷却，以除去溶于液体中 的气体。接种后，加入灭菌液体石蜡少许，以隔绝空气并防其进入，效果更佳。 2高层琼脂穿刺接种法加热溶化葡萄糖高层琼脂，置流水中使之迅速冷却、凝固，以 排除内部空气。然后穿刺接种厌氧菌，并用烧灼接种环融封穿刺孔，置3790温箱中培养。 3.试管厌氧培养法(Buchner氏试管法)取一大试管，在管底放焦性没食子酸0.5g及 玻璃珠数个，将已接种的试管置大试管中，加入20%氢氧化钠，迅速塞封管口，置37℃温箱 中培养。 细菌移植方法 1接种环移植法按图实5-4，以左手拇指与食指持一支菌种试管，食指与中指持一支待接 种的琼脂斜面试管，斜面均向上，管口并齐，管底握于掌中：以右手执接种环，并进行火焰 灭菌：以右手的中指和无名指扭开并夹住第一管的棉塞，无名指和小指扭开并夹住第二管的 棉塞，或以小指同时扭开并夹住两管的棉塞：将管口通过火焰灭菌：然后用烧灼灭菌后冷却 的接种环伸入菌种管琼脂斜面上取少许菌，可按图实5-5中的一种方式接种于无茵的琼脂斜 面上；同样将管口通过火焰灭菌，塞好棉塞，最后将接种环烧灼灭菌，用蜡笔在试管上标记 菌名、日期，置3TC温箱中培养。厌氧菌移植的常用培养基和培 钓菌纯培养 被检材料经分离培养后，选择一个可疑菌落，用灭菌接种环（针）钓取少许，接种在新 的培养基上，称为钓菌。钓取一个菌落培养出来的细菌培养物，称为纯培养物。纯培养的目 的在于对分离出的病原菌进一步进行鉴定和其他试验研究。 (一)需氧菌的纯培养方法首先用肉眼或放大镜观察并选择可疑的单个菌落，然后以 蜡笔在可疑菌落下面的平皿底上作一记号，用灭菌的接种环（针）轻轻接触菌落，蘸取菌料 少许，作抹片、染色、镜检。若其染色和形态与怀疑的致病菌一致，即接种于适当的培养基， 1212 的培养基上，称为钓菌。钓取一个菌落培养出来的细菌培养物，称为纯培养物。纯培养的目 的在于对分离出的病原菌进一步进行鉴定和其他试验研究。 （一）需氧菌的纯培养方法 首先用肉眼或放大镜观察并选择可疑的单个菌落，然后以蜡笔在可疑菌落下面的平皿底上 作一记号，用灭菌的接种环（针）轻轻接触菌落，蘸取菌料少许，作抹片、染色、镜检。若 其染色和形态与怀疑的致病菌一致，即接种于适当的培养基，置 37℃恒温箱中培养。 （二）厌氧菌常用的培养基和纯培养方法 1.熟肉培养基接种法 熟肉培养基适用于第一代增菌培养。 原理：利用培养基中的熟肉有不饱和脂肪酸和戴氨酸能吸收培养基的氧，使氧化还原电 势下降，造成厌氧环境。 方法：接种前先将培养基加热至沸，并立即于流水中使之迅速冷却，以除去溶于液体中 的气体。接种后，加入灭菌液体石蜡少许，以隔绝空气并防其进入，效果更佳。 2.高层琼脂穿刺接种法 加热溶化葡萄糖高层琼脂，置流水中使之迅速冷却、凝固，以 排除内部空气。然后穿刺接种厌氧菌，并用烧灼接种环融封穿刺孔，置 3790 温箱中培养。 3．试管厌氧培养法（Buchner 氏试管法） 取一大试管，在管底放焦性没食子酸 0.5g 及 玻璃珠数个，将已接种的试管置大试管中，加入 20%氢氧化钠，迅速塞封管口，置 37℃温箱 中培养。 细菌移植方法 1.接种环移植法按图实 5-4，以左手拇指与食指持一支菌种试管，食指与中指持一支待接 种的琼脂斜面试管，斜面均向上，管口并齐，管底握于掌中；以右手执接种环，并进行火焰 灭菌；以右手的中指和无名指扭开并夹住第一管的棉塞，无名指和小指扭开并夹住第二管的 棉塞，或以小指同时扭开并夹住两管的棉塞；将管口通过火焰灭菌；然后用烧灼灭菌后冷却 的接种环伸入菌种管琼脂斜面上取少许菌，可按图实 5-5 中的一种方式接种于无菌的琼脂斜 面上；同样将管口通过火焰灭菌，塞好棉塞，最后将接种环烧灼灭菌，用蜡笔在试管上标记 菌名、日期，置 37`C 温箱中培养。厌氧菌移植的常用培养基和培 钓菌纯培养 被检材料经分离培养后，选择一个可疑菌落，用灭菌接种环（针）钓取少许，接种在新 的培养基上，称为钓菌。钓取一个菌落培养出来的细菌培养物，称为纯培养物。纯培养的目 的在于对分离出的病原菌进一步进行鉴定和其他试验研究。 （一）需氧菌的纯培养方法 首先用肉眼或放大镜观察并选择可疑的单个菌落，然后以 蜡笔在可疑菌落下面的平皿底上作一记号，用灭菌的接种环（针）轻轻接触菌落，蘸取菌料 少许，作抹片、染色、镜检。若其染色和形态与怀疑的致病菌一致，即接种于适当的培养基