染色体可鉴定的表型特征有染色体数目、染色体形态、染色体分带等。进行核型分析有两类 方法：一类是研究有丝分裂时染色体的形态：另一类是研究减数分裂时染色体的形态和行为。 显示染色体形态和结构的技术，常用的有两种：压片技术和去壁低渗火焰干燥技术，主要操 作程序如图1-2。 压片法 取材 ·去壁低渗火焰干燥法 预处理 固定 前低渗 ↓ 酸（或加酶）解离 酸酶解 染色和压片 "厂 后低渗 固定、涂片 制备细胞悬液 火焰干燥 固定、滴片 Giemsa染色 火焰干燥 Giemsa染色 图1-2植物染色体常规制片技术 蛋白质水平在蛋白质水平上鉴定遗传多样性一般采用两种途径进行，一种是氨基序列 分析，另一种是等位酶或同工酶电泳分析。等位酶是等位基因编码的同工酶，其谱带可作为 等位基因的遗传标记。等位酶电泳分析己成为目前检测遗传多样性普遍的方法，并在采样原 则、实验方法、数据处理和结果分析方面形成了一套统一的标准。等位酶水平上衡量遗传多 样性的指标是多态位点比例(P,多态位点在总位点中所占的比例)和杂合度(H,在每个 位点上呈杂合状态的个体的比例)，据此计算群体间的遗传一致性(I)和遗传距离(D)。 等位酶电泳分析的方法很多，目前普遍应用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳，其原理是利用聚丙烯 酰胺凝胶孔径大小、缓冲液成分和pH值等不连续系统，在电场中形成不连续的电位梯度， 使样品浓缩成一个狭窄的起始区带，按等位酶分子量大小和所带电荷的不同，通过浓缩效应、 分子筛效应和电荷效应而被分开。植物不同品种、种类由于所具有的蛋白质或酶分子的大小、 结构和有效电荷存在差异，在凝胶上就会形成不同数目和迁移率的谱带，借此就可以计算多 态位点比例和杂合度，从蛋白质水平上鉴定种质材料的遗传多样性。 DNA水平在DNA水平上鉴定遗传多样性从原理上大致可分为两类：一类是直接测 序，主要是分析一些特定基因或DNA片段的核昔酸序列，度量这些片段DNA的变异性： 另一类是检测基因组的一批识别位点，从而估测基因组的变异性。分子标记(moleculor markers)技术如RFLP、RAPD、AFLP和染色体原位杂交等常被采用。 公15 染色体可鉴定的表型特征有染色体数目、染色体形态、染色体分带等。进行核型分析有两类 方法：一类是研究有丝分裂时染色体的形态；另一类是研究减数分裂时染色体的形态和行为。 显示染色体形态和结构的技术，常用的有两种：压片技术和去壁低渗火焰干燥技术，主要操 作程序如图 1-2。 图 1-2 植物染色体常规制片技术 蛋白质水平 在蛋白质水平上鉴定遗传多样性一般采用两种途径进行，一种是氨基序列 分析，另一种是等位酶或同工酶电泳分析。等位酶是等位基因编码的同工酶，其谱带可作为 等位基因的遗传标记。等位酶电泳分析已成为目前检测遗传多样性普遍的方法，并在采样原 则、实验方法、数据处理和结果分析方面形成了一套统一的标准。等位酶水平上衡量遗传多 样性的指标是多态位点比例（P，多态位点在总位点中所占的比例）和杂合度（He，在每个 位点上呈杂合状态的个体的比例），据此计算群体间的遗传一致性（I）和遗传距离（D）。 等位酶电泳分析的方法很多，目前普遍应用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳，其原理是利用聚丙烯 酰胺凝胶孔径大小、缓冲液成分和 pH 值等不连续系统，在电场中形成不连续的电位梯度， 使样品浓缩成一个狭窄的起始区带，按等位酶分子量大小和所带电荷的不同，通过浓缩效应、 分子筛效应和电荷效应而被分开。植物不同品种、种类由于所具有的蛋白质或酶分子的大小、 结构和有效电荷存在差异，在凝胶上就会形成不同数目和迁移率的谱带，借此就可以计算多 态位点比例和杂合度，从蛋白质水平上鉴定种质材料的遗传多样性。 DNA 水平 在 DNA 水平上鉴定遗传多样性从原理上大致可分为两类：一类是直接测 序，主要是分析一些特定基因或 DNA 片段的核昔酸序列，度量这些片段 DNA 的变异性； 另一类是检测基因组的一批识别位点，从而估测基因组的变异性。分子标记（moleculor markers）技术如 RFLP、RAPD、AFLP 和染色体原位杂交等常被采用。 压片法 取材 去壁低渗火焰干燥法 固定 酸(或加酶)解离 染色和压片 预处理 前低渗 酸酶解 后低渗 固定、涂片 制备细胞悬液 火焰干燥 固定、滴片 Giemsa 染色 火焰干燥 Giemsa 染色 II I