和在流动相中的浓度之比即为分配系数，以K表示： 组分在周定相中的浓度(c)=K二 组分在流动相中的浓度(c) (5-16) K值大，物质在柱中停留时间长，移动速度慢，保留体积大，保留时间长：反之K值小， 移动速度快，保留时间短。液液分配色谱的分离机理如图5一11。在动力学平衡状态下这个 过程是可逆的。 相 因定相 瓶分子 分子传质位 图5-11液液分配色进模型 交换， 相，称为 。所 宜的固定相 和流动相，可以对非常广泛的样品类型进行分离。 1.柱填充剂 (1)薄壳型填料：由30一40μm的玻璃微球表面涂覆1um的表面多孔物质如硅胶、氧 化铝 (2全多孔微粒型填料，包括硅胶、多孔硅球等。颗粒细度为3一10um,柱效高，试样 容量大，分析速度快 以上两种填料可作为载体，涂以适当的固定液即可作为固定相。正相液液色谱使用B, B'一氧二丙腈、聚乙二醇，反相液液色谱常用角鲨烷、氰乙基硅醇等固定液。 (3)化学键合周定相：液液分配色谱虽有较好的分离效果和温和的色普条件，但固定液 是以机械的方法涂覆在载体表面，很容易流失，缩短了柱子的使用寿命，并污染了分离后的 组分， 基线噪音大，因此其应用受到很大限制。化学健合固定相是为了克服以上这些问恩 产生的。化学键和固定相是利用化学反应的方法，通过化学键把有机分子结合到载体表面 它具有以下特点：①无液相流失，增加了柱子的稳定性和使用寿命，消除了试样被污染的 可能性：②消除了固体表面的活性点，使表面性质均一，减少了表面的催化作用：③表面 马有液坑，比 一般液体固定相传质快：④对各种溶剂及不是太强的酸都具有化学稳定性，应 用时受流动相 日有利于 表面可以键合各种不同的有机基团 有助于灵活改变选择性，适用于各种类型样本的分离。键合固定相最初于气相色谱中应用 很快就被用于液相色谱，并获得成功，被认为是高压液相色谱发展中的里程碑，占有极为重 要的地位。几乎80%左右的分离和分析工作可用它来解决，在农药分析中亦用得很多 2.化学健合固定相化学键合固定相一般都以全多孔微柱或薄壳型硅胶为基体，先将 硅胶进行酸洗，中和， 干燥活化，使其表面保持自由硅醇基，有机基团在硅胶 影面的合 主要有： (1)酯化键合(Si一OC型)，它是由硅醇基与各种醇如氯乙醇、正辛醇、聚乙二醇 等在一定温度下加热酯化后生成的单分子键合固定相。和在流动相中的浓度之比即为分配系数，以 K 表示： ( ) ( ) ' s m m s c V K K c V 组分在固定相中的浓度 ＝ ＝ 组分在流动相中的浓度 （5－16） K 值大，物质在柱中停留时间长，移动速度慢，保留体积大，保留时间长；反之 K 值小， 移动速度快，保留时间短。液液分配色谱的分离机理如图 5—11。在动力学平衡状态下这个 过程是可逆的。 液相色谱中采用极性固定相和非极性溶剂作流动相，称为正相液液色谱。该两相也可以 交换，即采用非极性固定相和极性流动相，称为反相液液色谱。所以通过选择适宜的固定相 和流动相，可以对非常广泛的样品类型进行分离。 1．柱填充剂 (1)薄壳型填料：由 30 一 40 μm 的玻璃微球表面涂覆 1μm 的表面多孔物质如硅胶、氧 化铝等。 (2)全多孔微粒型填料，包括硅胶、多孔硅球等。颗粒细度为 3－10μm，柱效高，试样 容量大，分析速度快。 以上两种填料可作为载体，涂以适当的固定液即可作为固定相。正相液液色谱使用β， β’－氧二丙腈、聚乙二醇，反相液液色谱常用角鲨烷、氰乙基硅醇等固定液。 (3)化学键合固定相：液液分配色谱虽有较好的分离效果和温和的色谱条件，但固定液 是以机械的方法涂覆在载体表面，很容易流失，缩短了柱子的使用寿命，并污染了分离后的 组分，基线噪音大，因此其应用受到很大限制。化学键合固定相是为了克服以上这些问题而 产生的。化学键和固定相是利用化学反应的方法，通过化学键把有机分子结合到载体表面， 它具有以下特点：①无液相流失，增加了柱子的稳定性和使用寿命，消除了试样被污染的 可能性；②消除了固体表面的活性点，使表面性质均一，减少了表面的催化作用；③表面 没有液坑，比一般液体固定相传质快；④对各种溶剂及不是太强的酸都具有化学稳定性，应 用时受流动相的限制较少，且有利于梯度洗脱；⑤载体表面可以键合各种不同的有机基团， 有助于灵活改变选择性，适用于各种类型样本的分离。键合固定相最初于气相色谱中应用， 很快就被用于液相色谱，并获得成功，被认为是高压液相色谱发展中的里程碑，占有极为重 要的地位。几乎 80％左右的分离和分析工作可用它来解决，在农药分析中亦用得很多。 2．化学健合固定相 化学键合固定相一般都以全多孔微柱或薄壳型硅胶为基体，先将 硅胶进行酸洗，中和，干燥活化，使其表面保持自由硅醇基，有机基团在硅胶表面的键合型 主要有； (1)酯化键合(Si—O—C 型)，它是由硅醇基与各种醇如氯乙醇、正辛醇、聚乙二醇 等在一定温度下加热酯化后生成的单分子键合固定相