Si-OH+R-H019=0r Si-OR+H2O 酯化后的有机基团像刷毛一样排列在硅胶表面，又称刷状固定相。这类固定相的$一 C键容易断裂，当用极性强的溶剂如水、醇等、键合的有机基团易被水解或醇解，所以只 能在正相色谱中使用极性小的溶剂。 (2)硅烷化键合(Si一0一Si一C型)是以氯硅烷与硅胶表面羟基作用并聚合交联成网状结 构而得。 Si-OH -0 一 R R R 0 CIiR HO- -OH 0 O OH -SI-OH -Si-OH -0-Si-0-Si-0- 如使用较大的硅烷化试剂时，硅胶表面的硅醇基不能完全参与键合反应，在非极性键合 相中硅醇基使极性化合物色谱峰拖尾，为此可在键合反应后，用小分子的三甲基氯硅烷进行 补充硅烷化，以尽量减少硅醇基。S一0一S一C型是目前应用最厂泛的键合相，具有相当 的耐热性与化学稳定性，在70℃以下和pH2一8范围内都可工作。为了比较键合相的性能 常用表面键合相浓度a来评价： 达(umol/m2)】 式中W为1g基体上键合的有机基团的重员（μg,M为键合有机基团的分子量，S为基体的 比表面积。 反相键合相色兽用的固定相表面部是极性小的经基，如十八烷基、辛烷基和装基等，而 采用强极性溶剂如水、甲醇、乙腈或无机盐的缓冲液作为流动相。其洗脱次序与正相色谱相 反、极性大的化合物先洗脱(K'小)，极性小的化合物不易洗脱(K大)，十八烷基键合相（荷彩 C或ODS)用得最多，可用于各种类型样品的分析，辛基和苯基键合相适用于分析极性样 品。 固定相表面辩合极性右机基团称为极性键合相，最常用的右氢基(C)键合相，其性质 与硅胶相似，极性较硅胶弱，在正相色谱中使用，以非极性或极性小的溶剂如烃类)加入 量极性溶剂（如氯仿、甲醇、乙睛等）以调节控制洗脱液的强度，极性弱的先出峰， 反相键合相的机理已有不少研究，曾有人认为单分子层刷状的健合固定相以吸附为主， 但目前多偏向于分配色谱的作用机理，以疏溶剂理论来解释，认为非极性烷基键合相是在硅 胶表面键合一层非极性十八烷基（或其他烃基），具有强的硫水特性，而极性溶剂与要分离分 析的非极性组分相互间有排斥力，组分与键合相的结合是为了 减少受溶剂的排斥，即组分的 保留主要是由于疏水溶剂效应，组分S与键合相烷基L之间的缔合是可逆过程： S+L≌SL (5-18) 缔合作用的强度和组分的色谱保留值取决于以下三个因素：①组分分子中非极性部分的 总表面积，总表面积越大，缔合作用越强，在一定洗脱液和温度下1oK与它的总面积成正 比，如增加极性基团，增加了组分分子与洗脱液极性分子间的作用而使及K减小。② 合相上烷基的总表面积，烷基越长，K大。图 一2为几种酚类化 公韧 午不 司碳链的非极 性键合相上所得到1ogK'。组分上一OH增多，增加了极性，使K'减少，即易于洗脱。而键 合相上的烷基碳链越长，则K·值亦越大。③洗脱液的表面张力也是影响保留的因素。组分 的保留随表面张力的增加而增加。 Si OH＋R HO 150－250℃ 3－8h Si OR＋H2O 酯化后的有机基团像刷毛一样排列在硅胶表面，又称刷状固定相。这类固定相的 Si—O —C 键容易断裂，当用极性强的溶剂如水、醇等、键合的有机基团易被水解或醇解，所以只 能在正相色谱中使用极性小的溶剂。 (2)硅烷化键合(Si—O—Si 一 C 型)是以氯硅烷与硅胶表面羟基作用并聚合交联成网状结 构而得。 Si O OH Si O Si OH OH Cl3SiR Si O O Si Si O O OH Si OH R Cl3SiR HO Si R O OH Si O Si O O Si O O Si O O Si O O Si Si OH R Si R R 如使用较大的硅烷化试剂时，硅胶表面的硅醇基不能完全参与键合反应，在非极性键合 相中硅醇基使极性化合物色谱峰拖尾，为此可在键合反应后，用小分子的三甲基氯硅烷进行 补充硅烷化，以尽量减少硅醇基。Si—O—Si—C 型是目前应用最厂泛的键合相，具有相当 的耐热性与化学稳定性，在 70℃以下和 pH 2—8 范围内都可工作。为了比较键合相的性能， 常用表面键合相浓度α来评价： ( ) W 2 a mol m MS =  式中 W 为 1g 基体上键合的有机基团的重员(μg)，M 为键合有机基团的分子量，S 为基体的 比表面积。 反相键合相色谱用的固定相表面部是极性小的烃基，如十八烷基、辛烷基和苯基等，而 采用强极性溶剂如水、甲醇、乙腈或无机盐的缓冲液作为流动相。其洗脱次序与正相色谱相 反、极性大的化合物先洗脱(K’小)，极性小的化合物不易洗脱(K’大)，十八烷基键合相(简称 C18 或 ODS)用得最多，可用于各种类型样品的分析，辛基和苯基键合相适用于分析极性样 品。 固定相表面键合极性有机基团称为极性键合相，最常用的有氰基(CN)键合相，其性质 与硅胶相似，极性较硅胶弱，在正相色谱中使用，以非极性或极性小的溶剂(如烃类)加入适 量极性溶剂(如氯仿、甲醇、乙腈等)以调节控制洗脱液的强度，极性弱的先出峰。 反相键合相的机理已有不少研究，曾有人认为单分子层刷状的键合固定相以吸附为主， 但目前多偏向于分配色谱的作用机理，以疏溶剂理论来解释，认为非极性烷基键合相是在硅 胶表面键合一层非极性十八烷基(或其他烃基)，具有强的疏水特性，而极性溶剂与要分离分 析的非极性组分相互间有排斥力，组分与键合相的结合是为了减少受溶剂的排斥，即组分的 保留主要是由于疏水溶剂效应，组分 S 与键合相烷基 L 之间的缔合是可逆过程： S L SL ＋ （5－18） 缔合作用的强度和组分的色谱保留值取决于以下三个因素：①组分分子中非极性部分的 总表面积，总表面积越大，缔合作用越强，在一定洗脱液和温度下 logK’与它的总面积成正 比，如增加极性基团，增加了组分分子与洗脱液极性分子间的作用力而使及 K’减小。②键 合相上烷基的总表面积，烷基越长，K’大。图 5—12 为几种酚类化公物在不同碳链的非极 性键合相上所得到 logK’。组分上－OH 增多，增加了极性，使 K’减少，即易于洗脱。而键 合相上的烷基碳链越长，则 K’值亦越大。③洗脱液的表面张力也是影响保留的因素。组分 的保留随表面张力的增加而增加