图-12组分极性，合相麟长与'的关系 3.分配色谱流动相 极性最弱的组分先流出 反相色 普法则相反，是使用极 性或弱极性固定相和极性流动相，极性最强的组分最先流出，流动相是水和甲醇或水和乙腈 的混合物，增加流动相的极性将增加洗脱时间，即水的浓度加大，增加保留时间，甲醇或乙 腈的浓度增大，使保流时间减少。 正相和反相液液色谱的区别： 正相 反相 因定相极性 极性大或中等 极性小或中等 溶剂极性 极性小或中等 极性中等或大 样本洗脱次序 非极性先出来 极性强先出来 增加溶剂极性的效果 隆低洗脱时间 增加洗脱时间 反相色谱用的流动相是以水为基本溶剂，水的极性很大，用它分离非极性组分，保留值 太大，加入与 容或部分互溶的有机溶剂为调节剂，最常用的是乙睹和甲醇 ,因为它们 粘度较小，易于提纯，紫外吸收截止波长较低，见甲醇、乙腈作流动相时，洗出能力很强， 与水或水缓冲溶液配成混合液，可得到中等强度的流动相，改变水一甲醇或水一乙腈的配比， 可改变样品组分的K值，因而获得较好的分离。目前在农药分析中反相色谱用得最多，因 为甲醇、水笑流动相易得，价格便官，常用溶剂的性质见表5一 水是反相色谱的主要流功相 水中非极性有机物会被吸附在C1的填料上 不能用去 子水作流动相。可以采用二次蒸馏水或在L蒸馏水中加1g高锰酸钾一起蒸馏以除之有机 杂质。甲醇亦是反相色谱的主要流动相，共纯化方法是：1L甲醇加3g氢氧化钠和g硝酸 银回流h后蒸馏。 使用溶剂作流动相时必须注意以下问顾：①必须除去溶剂中任何小颗粒，所有溶剂在佛 用前必须通过0.5μm聚四氟乙烯过滤纸过滤。②所有溶剂必须除气，可使用超声波水浴除 气或在磁力搅拌下用真空泵抽气数分钟 4.离子对色谱各种强极性可电离的有机酸和有机碱的分离是液相色谱的重要课题， 如用吸附色谱法往往需用强极性的洗脱液，如用离子交换色谱又缺少合适的离子交换剂。而 强酸和强碱化合物在H2一8范围内完全离解，若在流动相中加入合适的带有与样品离子相3．分配色谱流动相 在常规液液色谱中，使用极性固定相和非极性或弱极性流动相， 极性最弱的组分先流出，增加流动相的极性将降低洗脱时间，反相色谱法则相反，是使用极 性或弱极性固定相和极性流动相，极性最强的组分最先流出，流动相是水和甲醇或水和乙腈 的混合物，增加流动相的极性将增加洗脱时间，即水的浓度加大，增加保留时间，甲醇或乙 腈的浓度增大，使保流时间减少。 正相和反相液液色谱的区别： 正相 反相 固定相极性 极性大或中等 极性小或中等 溶剂极性 极性小或中等 极性中等或大 样本洗脱次序 非极性先出来 极性强先出来 增加溶剂极性的效果 降低洗脱时间 增加洗脱时间 反相色谱用的流动相是以水为基本溶剂，水的极性很大，用它分离非极性组分，保留值 太大，加入与水互溶或部分互溶的有机溶剂为调节剂，最常用的是乙腈和甲醇，因为它们的 粘度较小，易于提纯，紫外吸收截止波长较低，见甲醇、乙腈作流动相时，洗出能力很强， 与水或水缓冲溶液配成混合液，可得到中等强度的流动相，改变水—甲醇或水—乙腈的配比， 可改变样品组分的 K’值，因而获得较好的分离。目前在农药分析中反相色谱用得最多，因 为甲醇、水等流动相易得，价格便宜，常用溶剂的性质见表 5—2。 水是反相色谱的主要流功相，水中非极性有机物会被吸附在 C18 的填料上，不能用去离 子水作流动相．可以采用二次蒸馏水或在 1L 蒸馏水中加 1g 高锰酸钾一起蒸馏以除之有机 杂质。甲醇亦是反相色谱的主要流动相，共纯化方法是：1L 甲醇加 3g 氢氧化钠和 lg 硝酸 银回流 lh 后蒸馏。 使用溶剂作流动相时必须注意以下问题：①必须除去溶剂中任何小颗粒，所有溶剂在使 用前必须通过 0.5μm 聚四氟乙烯过滤纸过滤。②所有溶剂必须除气，可使用超声波水浴除 气或在磁力搅拌下用真空泵抽气数分钟。 4．离子对色谱 各种强极性可电离的有机酸和有机碱的分离是液相色谱的重要课题， 如用吸附色谱法往往需用强极性的洗脱液，如用离子交换色谱又缺少合适的离子交换剂。而 强酸和强碱化合物在 pH 2—8 范围内完全离解，若在流动相中加入合适的带有与样品离子相