反电荷的离子，使它与样品离子缔合成中性离子对化合物，可增大保留并取得良好的分离效 离子对色谱是离 子对萃取法的原理在液相色谱中的应用和 发展 又称离子 付分配色 分为正相和反相离子对色谱，正相离子对色谱是将离子对试剂涂覆在硅胶或纤维素上，以 极性溶剂为流动相。但离子对试剂易流失，已不常使用。反相离子对色谱采用非极性烷基键 合相为固定相，低浓度反离子的水/有机溶剂缓冲溶液为流动相，不存在离子对试剂的流失 问题，操作简便，适用范围广 般都用离子对模型解释，认为样品离子与反离子先在流 可采用在键合相和流动相之间分配的 液液分配方法进行分离，是先形成离子对，再进行分配。 一般情况下。样品离子和反离子都易溶于水相，而形成的离子对复合物，易溶于有机相 中。一价阳离子R和反离子C在流动相中先形成离子对，再在两相中进行分配： Rt+CRCRC 式中下标m和s分别表示流动相和固定相，此反应的总平衡常数为： RC.] K-[RTC-] (5-19) (2)离子对试剂：选择合适的离子对试剂是很重要的。农药样品为阳离子，则采用烃基 磺酸盐，若样品为阴离子，则采用季胺盐。反离子的类别如下： ①季胺类：常用的有四甲基胺、四丁基胺和十六烷基三甲胺离子等，它们适用于强酸和 弱酸混和物的分离。②叔胺类：如三辛胺等，适用于磺酸盐化合物的分离。③烷基磺酸盐： 如甲基和庚基磺酸盐，萘一2一磺酸盐等适用于强碱和弱碱混合物的分离。④高氯酸：可与 减性化合物形成离子对」 般说来，反离子的烷基增大，保留增大，所以对性质相似的样品离子，应选用烷基较 少的反离子。 反离子浓度是控制保留的重要因素，在一定范围内增加反离子浓度可使保留增加。流动 相一般采用甲醇/水溶液，流动相的H值亦是控制保留的因素，适宜的p山值是使样品完 全离解，以获得最大的保留，但出的选择受烷基合相稳定性的限制，只能在2 1. 范围内选择。烷基键合相都可用作反相离子对色谱的固定相，常用C和C,烷基 (三)离子交换色谐 1.原理离子交换色谱是基于离子交换剂上可电离的离子与流动相中具有相同电荷的 组分离子间进行可逆交换。凡是能在流动相中离解的组分都可以用离子交换色谱法进行分离 和分析。离子交换剂是由一个不溶性的骨架()为基质，其突出部位带有共价链合的可以离 解的官能团、根据官能团的性质分类，带有磺酸基和羧基的， 为阳离子交换剂：带有季胺基 或胶基的，为阴离子交换剂。当样本解离后产生的离子与离子交换剂上带相同电荷的离子交 换而达到平衡时，可用下式表示： 阳离子交换剂其骨架带负电荷，能吸引或保留带正电荷的离子： R。X++M(洗脱液中)=R。M+X*(洗脱液中 RSOH+MRSOM+H(强酸性) R.COO H+M=R·COOM+H(弱酸性) 反电荷的离子，使它与样品离子缔合成中性离子对化合物，可增大保留并取得良好的分离效 果。 离子对色谱是离子对萃取法的原理在液相色谱中的应用和发展。又称离子对分配色谱。 分为正相和反相离子对色谱，正相离子对色谱是将离子对试剂涂覆在硅胶或纤维素上，以非 极性溶剂为流动相。但离子对试剂易流失，已不常使用。反相离子对色谱采用非极性烷基键 合相为固定相，低浓度反离子的水／有机溶剂缓冲溶液为流动相，不存在离子对试剂的流失 问题，操作简便，适用范围广。 (1)分离机理：一般都用离子对模型解释，认为样品离子与反离子先在流动相中缔合成 离子对，离子对复合分子如同中性分子或弱极性分子，可采用在键合相和流动相之间分配的 液液分配方法进行分离，是先形成离子对，再进行分配。 一般情况下。样品离子和反离子都易溶于水相，而形成的离子对复合物，易溶于有机相 中。一价阳离子 R ＋和反离子 C —在流动相中先形成离子对，再在两相中进行分配： R C RC RC m m m s ＋＋ － 式中下标 m 和 s 分别表示流动相和固定相，此反应的总平衡常数为：  s  m m RC K     R C     ＝ ＋ － （5－19） (2)离子对试剂：选择合适的离子对试剂是很重要的。农药样品为阳离子，则采用烃基 磺酸盐，若样品为阴离子，则采用季胺盐。反离子的类别如下： ①季胺类：常用的有四甲基胺、四丁基胺和十六烷基三甲胺离子等，它们适用于强酸和 弱酸混和物的分离。②叔胺类：如三辛胺等，适用于磺酸盐化合物的分离。③烷基磺酸盐： 如甲基和庚基磺酸盐，萘—2—磺酸盐等适用于强碱和弱碱混合物的分离。④高氯酸：可与 碱性化合物形成离子对。 一般说来，反离子的烷基增大，保留增大，所以对性质相似的样品离子，应选用烷基较 少的反离子。 反离子浓度是控制保留的重要因素，在一定范围内增加反离子浓度可使保留增加。流动 相一般采用甲醇／水溶液，流动相的 pH 值亦是控制保留的因素，适宜的 pH 值是使样品完 全离解，以获得最大的保留，但 pH 的选择受烷基键合相稳定性的限制，pH 只能在 2—7.5 范围内选择。烷基键合相都可用作反相离子对色谱的固定相，常用 C8 和 C18 烷基。 (三)离子交换色谱 1．原理 离子交换色谱是基于离子交换剂上可电离的离子与流动相中具有相同电荷的 组分离子间进行可逆交换。凡是能在流动相中离解的组分都可以用离子交换色谱法进行分离 和分析。离子交换剂是由一个不溶性的骨架(R)为基质，其突出部位带有共价键合的可以离 解的官能团、根据官能团的性质分类，带有磺酸基和羧基的，为阳离子交换剂；带有季胺基 或胺基的，为阴离子交换剂。当样本解离后产生的离子与离子交换剂上带相同电荷的离子交 换而达到平衡时，可用下式表示： 阳离子交换剂其骨架带负电荷，能吸引或保留带正电荷的离子： R X M ( ) R M X ( ) 0 0 － ＋＋ ＋ 洗脱液中 － ＋＋ ＋ 洗脱液中 R SO H M R SO M H ( ) 3 3 － ＋＋ ＋ － ＋＋ ＋ 强酸性 R COO H M R COO M H ( ) － ＋＋ ＋ － ＋＋ ＋ 弱酸性