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有的是正三角形。棱镜又分透射井和反射镜两种。反射镜是在背面镀一层铝,使光射到铝面 上又反射回去。光栅的色散原理:光栅是在石英或玻璃表面上刻划许多等距离的平行线,大 约每245 m刻1500 30000条线 刻线处不这 光 光只能在两条刻线 间的平面 处透过 去。这些平面形成极微小的缝,光透过小缝时即产生绕射现象。较长的光波偏折的角度大 较短的光波偏折角度小:并对各小缝射出的光在传播过程中其干涉使用。刻的线愈密,色散 程度大,光栅也有透射和反射两种。 从棱镜或光橱射出的光经旋转反射镜就可依次射出狭缝,经聚焦后达到吸收池。旋转 速度与记录器扫描速度是同步的,因此,可将各种波长的光被吸收的情况连续记录下来,而 成为吸收 现代高级分光光度计往往采用双单色器,即包含两个光栅或两个棱镜,或一个棱镜一 个光梧,这样可以减少杂散光,提高仪器的分辨能力。 (三)吸收池 贵吸及修是用以路样秀高波行定的容乳·可见水区用支吸收设泡清度 紫外区需用石 池厚 般使用lcm的 定影响很大,透明光学面不得用手指拿,不得用毛刷等硬物擦洗,通常用擦镜纸擦洗。测定 时如遇挥发性液体或气体,需盖上池盖,以免溶液挥发影响测定浓度或产生气体损害仪器部 件。 检测器的功能是检测光信号并将其转变为电信号 检测器主要部件为光电池或光电倍 增管等。光电倍增管是当前应用最多的一种检测器,它的作用是利用二次电子发射以放大为 电流,放大倍数可达103倍。对检测器的要求是灵敏度高、对辐射相应时间短、对辐射能量 相应的线性关系良好、噪音小、性能稳定等。 (五)测量信号指示系统 用光电倍增管作检测器,需要将检测器信号放大以后用记录器记录下来,不同型号分 光光度计记录装置不同,目前许多由微处理机控制的紫外可见分光光度计,可自动调零,自 动筛选波长,自动设置参数、扫描与计算均自动完成,大大减少了人为误差。 三、分光光度法的基本定律 (一)光吸收定律 用分光光度法进行定量分析是以朗伯一比尔定律(Lambert-一Beer's Law)为依据的 它是描述各种类型的电磁辐射被介质吸收规律的基本定律,简称比尔定律,定律具体内容是 当一束平行的单色光()射入具有平行平面的吸光介质(溶液)时,一部分()透过介质 (溶液),一部分光被介质(溶液)所吸收。光的强度随介质的厚度及吸光物质的浓度的递 增而依指数规律递减。基本公式如下: 式中:A 吸光度(absorbence -透光度(transmittance)或称透射率 lo- 入射光强度: 一一诱过逼度: 光程长度即样品溶液的厚度(通常为吸收池的厚度) 样品溶液的浓度: A吸光系数(absorptivity)· 根据公式可见,当光程固定时,溶液的吸光度(A)与溶液的浓度(C)成正比关系。 当溶液浓度(C)周定时,吸光度(A)与光程长度(L)成正比关系。此公式一般适合于稀 有的是正三角形。棱镜又分透射井和反射镜两种。反射镜是在背面镀一层铝,使光射到铝面 上又反射回去。光栅的色散原理:光栅是在石英或玻璃表面上刻划许多等距离的平行线,大 约每 2.45cm 刻 15000-30000 条线。刻线处不透光,光只能在两条刻线中间的平面处透过 去。这些平面形成极微小的缝,光透过小缝时即产生绕射现象。较长的光波偏折的角度大, 较短的光波偏折角度小;并对各小缝射出的光在传播过程中其干涉使用。刻的线愈密,色散 程度大,光栅也有透射和反射两种。 从棱镜或光栅射出的光经旋转反射镜就可依次射出狭缝,经聚焦后达到吸收池。旋转 速度与记录器扫描速度是同步的,因此,可将各种波长的光被吸收的情况连续记录下来,而 成为吸收光谱图。 现代高级分光光度计往往采用双单色器,即包含两个光栅或两个棱镜,或一个棱镜一 个光栅,这样可以减少杂散光,提高仪器的分辨能力。 (三)吸收池 吸收池是用以盛装样品溶液进行测定的容器。可见光区用玻璃吸收池;紫外区需用石 英吸收池。池厚(内径)有 0.5,1,2cm 等几种,一般使用 1cm 的,吸收池的光洁度对测 定影响很大,透明光学面不得用手指拿,不得用毛刷等硬物擦洗,通常用擦镜纸擦洗。测定 时如遇挥发性液体或气体,需盖上池盖,以免溶液挥发影响测定浓度或产生气体损害仪器部 件。 (四)检测器 检测器的功能是检测光信号并将其转变为电信号。检测器主要部件为光电池或光电倍 增管等。光电倍增管是当前应用最多的一种检测器,它的作用是利用二次电子发射以放大光 电流,放大倍数可达 108 倍。对检测器的要求是灵敏度高、对辐射相应时间短、对辐射能量 相应的线性关系良好、噪音小、性能稳定等。 (五)测量信号指示系统 用光电倍增管作检测器,需要将检测器信号放大以后用记录器记录下来,不同型号分 光光度计记录装置不同,目前许多由微处理机控制的紫外可见分光光度计,可自动调零,自 动筛选波长,自动设置参数、扫描与计算均自动完成,大大减少了人为误差。 三、分光光度法的基本定律 (一)光吸收定律 用分光光度法进行定量分析是以朗伯-比尔定律(Lambert-Beer’s Law)为依据的, 它是描述各种类型的电磁辐射被介质吸收规律的基本定律,简称比尔定律。定律具体内容是: 当一束平行的单色光(I0)射入具有平行平面的吸光介质(溶液)时,一部分(I)透过介质 (溶液),一部分光被介质(溶液)所吸收。光的强度随介质的厚度及吸光物质的浓度的递 增而依指数规律递减。基本公式如下: 式中:A——吸光度(absorbence) T——透光度(transmittance)或称透射率; I0——入射光强度; I——透过强度; L——光程长度即样品溶液的厚度(通常为吸收池的厚度); C——样品溶液的浓度; K—— (absorptivity) A LC 吸光系数 。 根据公式可见,当光程固定时,溶液的吸光度(A)与溶液的浓度(C)成正比关系。 当溶液浓度(C)固定时,吸光度(A)与光程长度(L)成正比关系。此公式一般适合于稀
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