物化学:核酸的生物合成 山农大生物化学与分子生物学系 第6页共14页 迅速生长的细菌,第一轮复制未完成就启动第二次复制 DNA链的合成与延伸 (1)在引发的复制叉上,DNA聚合酶Ⅲ组装形成,然后按照DNA模板链的指令, 自RNA引物33-OH末端依次添加新的脱氧核苷酸残基,新生成的DNA链按5→33方 向不断延伸,同时新链与模板链反向平行,碱基配对 (2)由于两条模板链反向平行,若以走向3→5的亲代链为模板,子代链就能 连续合成,称为前导链,若以走向5→3的亲代链为模板时,DNA聚合酶Ⅲ只能按5 的方向合成许多小片段(称为冈崎片段),然后由DNA聚合酶I切除片段上的引 物,填补片段之间的空缺,最后由连接酶把它们连接成一条完整的子代链,称为滞 后链 (3)半不连续复制 象这样,在复制叉上新生的DNA链一条按5→3'的方向(与复制叉移动方向 致)连续合成;另一条则按5→3°的方向(与复制叉移动方向相反)不连续合成 称为半不连续复制。 终止 复制叉从两端进入ter位点后,复制终止。由DNA聚合酶Ⅰ填补空隙,连接 DNA复制的高保真度主要是靠DNA聚合酶实现的。 (1)53→3ˆ聚合活性部位对底物的选择性,添加的新dNTP碱基必须与模板链碱基 正确匹配 (2)3→5外切活性具有校对或编辑功能,可及时切除参入新链3-末端的错误 另外,U-糖苷酸,脱碱基核酸内切酶(AP内切酶)等也参于校对。 综上所述:大肠杆菌复制是在几十种酶和蛋白质因子精确配合下完成的,定点起 始,两个复制叉双向等速前进,进行半保留,半不连续的复制。 (四)真核细胞DNA的复制 1、染色质复制 (1)真核细胞染色体DNA分子为线性的。比原核细胞DNA分子大,复制更为复 杂。也包括不同的DNA聚合酶、拓扑异构酶、解螺旋酶、连接酶、单链结合蛋白和生物化学: 核酸的生物合成 山农大生物化学与分子生物学系 第 6 页 共 14 页 6 迅速生长的细菌，第一轮复制未完成就启动第二次复制。 2、DNA 链的合成与延伸 （1）在引发的复制叉上，DNA 聚合酶Ⅲ组装形成，然后按照 DNA 模板链的指令， 自 RNA 引物 3’-OH 末端依次添加新的脱氧核苷酸残基，新生成的 DNA 链按 5’→3’方 向不断延伸，同时新链与模板链反向平行，碱基配对。 （2）由于两条模板链反向平行，若以走向 3’→5’的亲代链为模板，子代链就能 连续合成，称为前导链，若以走向 5’→3’的亲代链为模板时，DNA 聚合酶Ⅲ只能按 5’ →3’的方向合成许多小片段（称为冈崎片段），然后由 DNA 聚合酶 I 切除片段上的引 物，填补片段之间的空缺，最后由连接酶把它们连接成一条完整的子代链，称为滞 后链。 （3）半不连续复制 象这样，在复制叉上新生的 DNA 链一条按 5’→3’的方向（与复制叉移动方向一 致）连续合成；另一条则按 5’→3’的方向（与复制叉移动方向相反）不连续合成， 称为半不连续复制。 3、终止 复制叉从两端进入 ter 位点后，复制终止。由 DNA 聚合酶Ⅰ填补空隙，连接 E 封口。 DNA 复制的高保真度主要是靠 DNA 聚合酶实现的。 （1）5’→3’聚合活性部位对底物的选择性，添加的新 dNTP 碱基必须与模板链碱基 正确匹配。 （2）3’→5’外切活性具有校对或编辑功能，可及时切除参入新链 3’-末端的错误 残基。 另外，U-糖苷酸，脱碱基核酸内切酶（AP 内切酶）等也参于校对。 综上所述：大肠杆菌复制是在几十种酶和蛋白质因子精确配合下完成的，定点起 始，两个复制叉双向等速前进，进行半保留，半不连续的复制。 （四）真核细胞 DNA 的复制 1、染色质复制 （1）真核细胞染色体 DNA 分子为线性的。比原核细胞 DNA 分子大，复制更为复 杂。也包括不同的 DNA 聚合酶、拓扑异构酶、解螺旋酶、连接酶、单链结合蛋白和