1.6ml 3.3ml 4.9ml66ml 8.2ml 9.9ml 30%丙烯酰胺|20ml 4.0ml 12.0ml 1.5M Tris(pH 1.3ml 2.5ml38ml 6.3ml 10% SDS 0.05ml 10%过硫酸胺|005m01ml015ml 0.25ml 0.3ml TEMED 0.002ml|0.004ml|0.006ml0.008ml 0. 01ml 0.012ml 15% 1. Iml 2.3ml 3.4ml 4.6m 5.7ml 6.9ml 30%丙烯酰胺|2.5ml 5.0ml 7.5ml 100m 12.5ml 150ml 1.5M Tris(pH 1.3ml 2.5ml 3.8ml 5.0ml 6.3 7.5ml 10%SD 0 0.15ml 0.2m 0.3 0%过硫酸胺005ml01ml|0.15ml 0.25ml TEMED 0002m|0004m10006m0008m00lml 0.012m (3)迅速在两玻璃板的间隙中灌注丙烯酰胺溶液,留出灌注浓缩胶所需空间(梳子的 长再加0.5m)。再在胶液面上小心注入一层水(约2-3mm高),以阻止氧气进入凝胶溶液 (4)分离胶聚合完全后(约30分钟),倾出覆盖水层,再用滤纸吸净残留水。 (5)制备浓缩胶:按下表给出的数据,在另一小烧杯中制备一定体积及一定浓度的丙 烯酰胺溶液,一旦加入 TEMED,马上开始聚合,故应立即快速旋动混合物并进入下步操作。 配制Tris-甘氨酸SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳5%浓缩胶溶液 溶液成分 总体积3ml总体积4m总体积5ml总体积6ml总体积8ml 30%丙烯酰胺0.5ml 0.67ml 1|68m1om1m IM Tris(pH0.38ml 0.5ml 0.63ml 0.75ml191 12% 水 1.6ml 3.3ml 4.9ml 6.6ml 8.2ml 9.9ml 30%丙烯酰胺 2.0ml 4.0ml 6.0ml 8.0ml 10.0ml 12.0ml 1.5M Tris(pH 8.8) 1.3ml 2.5ml 3.8ml 5.0ml 6.3ml 7.5ml 10% SDS 0.05ml 0.1ml 0.15ml 0.2ml 0.25ml 0.3ml 10%过硫酸胺 0.05ml 0.1ml 0.15ml 0.2ml 0.25ml 0.3ml TEMED 0.002ml 0.004ml 0.006ml 0.008ml 0.01ml 0.012ml 15% 水 1.1ml 2.3ml 3.4ml 4.6ml 5.7ml 6.9ml 30%丙烯酰胺 2.5ml 5.0ml 7.5ml 10.0ml 12.5ml 15.0ml 1.5M Tris(pH 8.8) 1.3ml 2.5ml 3.8ml 5.0ml 6.3ml 7.5ml 10% SDS 0.05ml 0.1ml 0.15ml 0.2ml 0.25ml 0.3ml 10%过硫酸胺 0.05ml 0.1ml 0.15ml 0.2ml 0.25ml 0.3ml TEMED 0.002ml 0.004ml 0.006ml 0.008ml 0.01ml 0.012ml ⑶ 迅速在两玻璃板的间隙中灌注丙烯酰胺溶液,留出灌注浓缩胶所需空间(梳子的齿 长再加 0.5cm)。再在胶液面上小心注入一层水（约 2~3mm 高），以阻止氧气进入凝胶溶液。 ⑷ 分离胶聚合完全后（约 30 分钟），倾出覆盖水层，再用滤纸吸净残留水。 ⑸ 制备浓缩胶：按下表给出的数据，在另一小烧杯中制备一定体积及一定浓度的丙 烯酰胺溶液，一旦加入 TEMED，马上开始聚合，故应立即快速旋动混合物并进入下步操作。 配制 Tris-甘氨酸 SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳 5% 浓缩胶溶液 溶液成分 总体积 3ml 总体积 4ml 总体积 5ml 总体积 6ml 总体积 8ml 水 2.1ml 2.7ml 3.4ml 4.1ml 5.5ml 30%丙烯酰胺 0.5ml 0.67ml 0.83ml 1.0ml 1.3ml 1M Tris(pH 6.8) 0.38ml 0.5ml 0.63ml 0.75ml 1.0ml