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(7)0.005m0l/L疏酸铵标准液准确称取0.6610g硫酸铵,水溶后 定客至1000ml (8)30%乙髯 60ml95%乙醇,加水130ml,摇匀, (9)奈氏试剂 ①甲8.75gKI溶于50ml水中。 ②乙8.75gK1溶于50ml水中。 ③丙 7.5gHgC12溶于150ml水中 2.5g HgCl 2溶于50ml水中 ⑤甲与丙混合,生成朱红色沉淀。用蒸馏水以倾泻法洗沉淀几次,洗好 后将乙液倒入,令沉淀溶解。然后将丁液逐滴加入,至红色沉淀出现摇动也 不消失为止。定容至250ml。 ⑤称NaOH525g,溶于200ml蒸馏水中,放冷 混合(5)、(6),并定容至50Oml。上清液转入棕色瓶中。存暗处备用 材 3. 豆粉 四、操作步骤 (1)尿裤提取称大豆粉1g,加30%乙醇25ml,振荡提取1h。4000r/min 离心10min, 上清液备用 (2)取试管5支编号,按下表操作: 3 5 浓度(moL 1201/30 140 1/50160 脲液 加入量(ml) 各05 pH7磷酸缓冲液(m) 各2 37℃保温 5min 加入脲酶(ml) 0.50.5 05 080 並糖酶溶液(m 0 0 0 0 0.5 蒸馏水ml 37℃保温 10 min 加入10%ZNS0(ml) 各0.5 加蒸馏水(ml) 各10 加入0.smo/LaOH(ml) 客0.5 在旋涡振荡器上混匀各管,静置5min后过滤, (3)另取试管5支编号,与上述各管对应,按下表加入试剂(ml): 管号 1 3 4 滤液 各0.5 加蒸馏水(ml) %05 10%酒石酸钾钠ml) 各0.5 0.5molLNaOH (ml) 各0.5 奈氏试剂(ml) 各1(7)0.005 mol/L 硫酸铵标准液 准确称取 0.6610g 硫酸铵,水溶后 定客至 1000ml。 (8)30%乙醇 60ml 95%乙醇,加水 130ml,摇匀。 (9)奈氏试剂 ①甲 8.75g KI 溶于 50ml 水中。 ②乙 8.75g KI 溶于 50ml 水中。 ③丙 7.5g HgC12 溶于 150ml 水中。 ④丁 2.5g HgC12 溶于 50ml 水中。 ⑤甲与丙混合,生成朱红色沉淀。用蒸馏水以倾泻法洗沉淀几次,洗好 后将乙液倒入,令沉淀溶解。然后将丁液逐滴加入,至红色沉淀出现摇动也 不消失为止。定容至 250ml。 ⑤称 NaOH 52.5g,溶于 200ml 蒸馏水中,放冷。 ①混合(5)、(6),并定容至 500ml。上清液转入棕色瓶中。存暗处备用。 3.材料 大豆粉 四、操作步骤 (1)脲酶提取 称大豆粉 1g,加 30%乙醇 25ml,振荡提取 lh。4000r/min 离心 10min,取上清液备用。 (2)取试管 5 支编号,按下表操作: 管 号 1 2 3 4 5 脲液 浓度(mol/L) 加入量(ml) 1 /20 1/30 1/40 1/50 1/60 各 0.5 pH7 磷酸缓冲液(ml) 各 2 37℃保温 5min 加入脲酶(ml) 0.5 0.5 0.5 0.5 0 蔗糖酶溶液(ml) 0 0 0 0 0.5 蒸馏水(ml) 0 0 0 0 1 37℃保温 10 min 加入 10%ZNSO4(ml) 各 0.5 加蒸馏水(ml) 各 10 加入 0.5mol/LnaOH(ml) 各 0.5 在旋涡振荡器上混匀各管,静置 5min 后过滤。 (3)另取试管 5 支编号,与上述各管对应,按下表加入试剂(ml): 管 号 1 2 3 4 5 滤 液 各 0.5 加蒸馏水(ml) 各 9.5 10%酒石酸钾钠(ml) 各 0.5 0.5mol/LNaOH(ml) 各 0.5 奈氏试剂(ml) 各 1
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