园艺植物病害防治药剂筛选实验指导 (综合性实验) 本实验包括室内测定不同药剂对离体植物病原菌的毒力和田间比较不同农药的防病效 果。要求学生深入生产实际调杏，东分了解民艺作物生产中的灾害发生情况，拟定防治目标 通过实验筛选出有效的防治药剂。 历时30-50升 ,全过程如下 1、通过调查选定生产中某种常见的病害作为防治目标。 2、从发病的植株上分离这种病害的病原物，并进行纯化培养。 3、进行室内药剂毒力测定，选出几种对离体病原菌有明显抑制作用的药剂。 4、在田间栽培供试作物，人工诱发病吉，同时进行药剂防治处理 5、对不同 剂处理的 区进行发病严重程度的调查 6、对实验数据进行统计分析，筛选出有效的防病药剂，写出实验报告。 通过该项实验可激发学生对本专业课程的学习兴趣，了解园艺作物生产实际中的病虫害 发生情况，更好地理解植物病害发生和防治的理论，掌捉筛选植物病害防治药剂的方法。 培养基的配制及培养皿的灭菌 1.马铃薯葡萄糖（或糖）琼脂培养基：是培养真最常用的培养基 成分如下：去皮马铃薯 200 克 葡萄糖（或蔗糖）20 脂 17-20克 1000升 配置方法 将马铃薯洗净去皮 称取200克 ,切成小块，放入锅中加水1000毫升，煮 沸半小时，然后用双层洁净纱布过滤去渣，在滤液中加葡萄糖（或蔗糖）20克，加水补足 1000毫升。配成的培养液一般呈酸性，若用于培养真菌，可以不必矫正它的酸度。如配成 固体培养基，可加入琼脂17一20克，加热使琼脂完全融化，同时补足应有的水量。趁热分 装在试管或三角瓶中，加棉花塞后灭菌。每管约5熹升 2。牛肉浸青蛋白陈培养基：是培养细菌最常用的培养基 成分如下：牛肉浸青 蛋白胨 5一10克 葡萄糖或蔗糖 10 琼脂 17-20克 1000毫升 配置方法：先将牛肉浸膏、蛋白胨和糖溶于少量热水中，然后加水到1000毫升，矫正 其酸度到中性反应，加入琼脂溶化，趁热装入试管或三角瓶，加棉花塞后灭菌。 娇正培养基酸度的方法： 用刻度吸管吸取5毫升培养液于试管中，加入麝香兰指示剂5滴。如培养基呈黄色（表 示酸性)，则用有刻度的吸管加入NW20的NaOH调节：若培养基呈兰色（表示碱性），则加 NW20的HC 调节。最后，使培养基呈草绿色为止 记下所加NW20的NaOH或HC的量 以加入的量乘10，即为1000毫升培养基中应加1 N NaOH或HC1的量。例如5毫升的培养 基加N/20NaOH0.3毫升既达到中性反应，则在1000毫升培养基中应加入1 N NaOH3毫升。 3.培养基的灭菌 1 1 园艺植物病害防治药剂筛选实验指导 （综合性实验） 本实验包括室内测定不同药剂对离体植物病原菌的毒力和田间比较不同农药的防病效 果。要求学生深入生产实际调查，充分了解园艺作物生产中的病害发生情况，拟定防治目标， 通过实验筛选出有效的防治药剂。 实验历时 30-50 天，全过程如下： 1、通过调查选定生产中某种常见的病害作为防治目标。 2、从发病的植株上分离这种病害的病原物，并进行纯化培养。 3、进行室内药剂毒力测定，选出几种对离体病原菌有明显抑制作用的药剂。 4、在田间栽培供试作物，人工诱发病害，同时进行药剂防治处理。 5、对不同药剂处理的小区进行发病严重程度的调查。 6、对实验数据进行统计分析，筛选出有效的防病药剂，写出实验报告。 通过该项实验可激发学生对本专业课程的学习兴趣，了解园艺作物生产实际中的病虫害 发生情况，更好地理解植物病害发生和防治的理论，掌握筛选植物病害防治药剂的方法。 一、 培养基的配制及培养皿的灭菌 1. 马铃薯葡萄糖（或蔗糖）琼脂培养基：是培养真菌最常用的培养基 成分如下：去皮马铃薯 200 克 葡萄糖（或蔗糖） 20 克 琼 脂 17—20 克 水 1000 毫升 配置方法：将马铃薯洗净去皮，称取 200 克，切成小块，放入锅中加水 1000 毫升，煮 沸半小时，然后用双层洁净纱布过滤去渣，在滤液中加葡萄糖（或蔗糖）20 克，加水补足 1000 毫升。配成的培养液一般呈酸性，若用于培养真菌，可以不必矫正它的酸度。如配成 固体培养基，可加入琼脂 17—20 克，加热使琼脂完全融化，同时补足应有的水量。趁热分 装在试管或三角瓶中，加棉花塞后灭菌。每管约 5 毫升。 2. 牛肉浸膏蛋白胨培养基：是培养细菌最常用的培养基 成分如下：牛肉浸膏 3 克 蛋白胨 5—10 克 葡萄糖或蔗糖 10 克 琼 脂 17—20 克 水 1000 毫升 配置方法：先将牛肉浸膏、蛋白胨和糖溶于少量热水中，然后加水到 1000 毫升，矫正 其酸度到中性反应，加入琼脂溶化，趁热装入试管或三角瓶，加棉花塞后灭菌。 矫正培养基酸度的方法： 用刻度吸管吸取 5 毫升培养液于试管中，加入麝香兰指示剂 5 滴。如培养基呈黄色（表 示酸性），则用有刻度的吸管加入 N/20 的 NaOH 调节；若培养基呈兰色（表示碱性），则加 N/20 的 HCl 调节。最后，使培养基呈草绿色为止，记下所加 N/20 的 NaOH 或 HCl 的量， 以加入的量乘 10，即为 1000 毫升培养基中应加 1N NaOH 或 HCl 的量。例如 5 毫升的培养 基加N/20 NaOH 0.3毫升既达到中性反应，则在1000毫升培养基中应加入1N NaOH 3 毫升。 3. 培养基的灭菌