干扰粒的产生，使同种感染性病毒数量减少，在导致病毒的持续性感染中具有一定的作用。但疫苗中含有大量缺损干扰颗粒会影响活疫苗的 免疫效果。 出老 图216负链RNA病毒复制的主要步骤 第三节抵抗力与变异 一、病毒对理化因索的抵抗力 (一)物理因素 1.温度大多数病毒（除肝炎病毒外）耐冷而不耐热。病毒一旦离开机体，经加热56-60℃30分钟，由于表面蛋白变性，而丧失其感染 性，即被灭活，病毒对低温的抵抗力较强，通常在20一196℃仍不失去活性，但对反复冻融则敏感。一般可用低温真空干燥法 (yophilization)保存病毒，但在室温条件下干燥易使病毒灭活， 2.盐类对病毒的稳定作用克分子浓度的盐可提高病毒对热的抵抗力。MgCI2对脊液灰质炎病毒、MgS04对正粘和副粘病毒、N2S04对瓶 疹病毒具有稳定作用。因此在减毒活疫苗中须加这类稳定剂。有囊膜病毒即使在.90℃也不能长期保存，但加入保护剂如二甲基亚砜(DMS0) 可使之稳定。 3.pH病毒一般在pH5.0~9.0的环境是稳定的，但在某些病毒的血凝反应中，pH改变可影响改变试验的结果， 4.射线紫外线、X线和高能量粒子可杀活病毒，这是因为光量子可击毁病毒核酸的分子结构，不同病毒其敏感度不一。 某些活性染料（如甲苯胺兰、中性红、丫定橙）对病毒具有不同程度的渗透作用，这些染料与病毒核酸结合后，易被可见光灭活。 (二)化学因素 1.脂溶剂有囊膜病志可迅速被脂溶剂破坏，如乙碰、氯彷、去氧胆酸钠，这类病志通常不能在含有胆汁的肠道中引起感染。病毒对脂溶剂 的敏感性可作为忘满分类的依据之一。 2.甘油大多数病毒在50%甘油盐水中能活存较久。因病毒体中含游离水，不受甘油脱水作用的影响，故可用于保存病毒感染的组织. 3.化学消毒剂一般病毒对高锰酸钾、次氧酸盐等氧化剂都很敏感，升汞，酒精、强酸及强碱均能迅速杀灭病毒，但0.5%一1%石炭酸仅对 少数病毒有效.饮水中漂白粉浓宜对乙型肺炎，肠道病毒无效。B-丙内脂(B-Propiolacto)及环氧乙烷Ethylene oxide)可杀灭各种病毒， 4.抗生素抗生素及璃胺对病毒无效。利福平(Rifampin)能抑制痘病毒复制，干扰病毒DNA或RNA合成，但也干扰宿主细胞的代谢，有 较强的细胞毒性作用。 二、病毒的变异 (一)突变 病毒的突变(Mua是指基因组中核酸险基顺序上的化学变化，可以是一个核苷酸的改变，也可为上百上千个核营酸的缺失或易位 病毒复制中的自 种物理、 化学诱变剂 且度 射 消酸盐等的作用上 的野生 ype 表现为 的改会 后 后在特定 生代 原米 其中最主要是的是 度敏感条件致死突变件 夏敏感突受株(s 株)，在特定温(28~35℃)下孵育则能 住非 40℃)下期有则不 —最珠网时汉是减毒袜。靓已从许多动定的手中分出伟透传稳定性风好的品系用于制备就号活位面，如流病毒及新精灰新版炎 正品度 之具应有切 因此天 适应性交株例如狂犬病毒突变株适应在免脑内增殖，由“街毒变为“固定毒”，可制成狂犬病疫苗。 (仁)基因重组 干扰颗粒的产生，使同种感染性病毒数量减少，在导致病毒的持续性感染中具有一定的作用，但疫苗中含有大量缺损干扰颗粒会影响活疫苗的 免疫效果。 图21-6 负链RNA病毒复制的主要步骤 第三节 抵抗力与变异 一、病毒对理化因素的抵抗力 （一）物理因素 1．温度大多数病毒（除肝炎病毒外）耐冷而不耐热。病毒一旦离开机体，经加热56～60℃30分钟，由于表面蛋白变性，而丧失其感染 性 ， 即 被 灭 活 。 病 毒 对 低 温 的 抵 抗 力 较 强 ， 通 常 在 -20 ～ 196 ℃ 仍 不 失 去 活 性 ， 但 对 反 复 冻 融 则 敏 感 。 一 般 可 用 低 温 真 空 干 燥 法 （Lyophilization）保存病毒，但在室温条件下干燥易使病毒灭活。 2．盐类对病毒的稳定作用克分子浓度的盐可提高病毒对热的抵抗力。MgCl2对脊液灰质炎病毒、MgSO4对正粘和副粘病毒、Na2SO4对疱 疹病毒具有稳定作用。因此在减毒活疫苗中须加这类稳定剂。有囊膜病毒即使在-90℃也不能长期保存，但加入保护剂如二甲基亚砜（DMSO） 可使之稳定。 3． pH 病毒一般在pH5.0～9.0的环境是稳定的，但在某些病毒的血凝反应中，pH改变可影响改变试验的结果。 4．射线 紫外线、X线和高能量粒子可杀活病毒，这是因为光量子可击毁病毒核酸的分子结构，不同病毒其敏感度不一。 某些活性染料（如甲苯胺兰、中性红、丫啶橙）对病毒具有不同程度的渗透作用，这些染料与病毒核酸结合后，易被可见光灭活。 （二）化学因素 1．脂溶剂有囊膜病毒可迅速被脂溶剂破坏，如乙醚、氯彷、去氧胆酸钠。这类病毒通常不能在含有胆汁的肠道中引起感染。病毒对脂溶剂 的敏感性可作为病毒分类的依据之一。 2．甘油 大多数病毒在50%甘油盐水中能活存较久。因病毒体中含游离水，不受甘油脱水作用的影响，故可用于保存病毒感染的组织。 3．化学消毒剂一般病毒对高锰酸钾、次氯酸盐等氧化剂都很敏感，升汞、酒精、强酸及强碱均能迅速杀灭病毒，但0.5%～1%石炭酸仅对 少数病毒有效。饮水中漂白粉浓度对乙型肺炎，肠道病毒无效。β-丙内脂（β-Propiolactone)及环氧乙烷(Ethylene oxide)可杀灭各种病毒。 4．抗生素抗生素及磺胺对病毒无效。利福平（Rifampin）能抑制痘病毒复制，干扰病毒DNA或RNA合成，但也干扰宿主细胞的代谢，有 较强的细胞毒性作用。 二、病毒的变异 （一）突变 病毒的突变（Mutation）是指基因组中核酸硷基顺序上的化学变化，可以是一个核苷酸的改变，也可为上百上千个核苷酸的缺失或易位。 病毒复制中的自然突变率10-5～10-8，而各种物理、化学诱变剂(Mutagens)可提高突变率，如温度、射线、5-溴尿嘧啶、亚硝酸盐等的作用均 可诱发突变。突变株与原先的野生型病毒(Wild-type virus)特性不同，表现为病毒毒力、抗原组成、温度和宿主范围等方面的改变。 1．毒力改变有强毒株及弱毒株，后者可制成弱毒活病毒疫苗，如脊液灰质炎疫苗、麻疹疫苗等。 2．条件致死突变株指病毒突变后在特定条件下能生长，而在原来条件下不能繁殖而被致死。其中最主要是的是温度敏感条件致死突变株 （Temperature-sensitive conditional lethalmutant），简称温度敏感突变株(ts株)，在特定温（28～35℃）下孵育则能增殖，在非特定温度（37 ～40℃）下孵育则不能繁殖，而野生型在两种温度均能增殖。显然是由于在非特定温度下，突变基因所编码的蛋白缺乏其应有功能。因此大多 数ts株同时又是减毒株。现已从许多动物病毒中分离出ts株，选择遗传稳定性良好的品系用于制备碱毒活疫苗，如流感病毒及脊髓灰制裁炎病 毒ts 株疫苗。 3．宿主适应性突株例如狂犬病毒突变株适应在兔脑内增殖，由“街毒”变为“固定毒”，可制成狂犬病疫苗。 （二）基因重组