正在加载图片...
四、实验操作 1.点样 取层析滤纸一张(14×11cm),在距纸边1.2cm处划一基线:再将纸转90° 距纸边1.2cm处作一线与上线垂直。以毛细管吸取混合氨基酸溶液,点与二线交 点处(见图4-1),点的直径控制在2mm左右,不可过大。待样品干燥后再点 次。滤纸上点样斑点干燥后,把滤纸卷成圆筒形,纸的两边以铬丝相连,但不可 重叠相碰 2.展层 在层析缸中平稳的放入装有第一相层析溶剂的培养皿。将圆筒形滤纸放入, 点样一段接触溶剂,以点样处不浸入溶剂为准。待溶剂自下而上均匀展开,约2 小时后溶剂到达距纸边0.5cm处取出滤纸,悬挂于室温中,以电吹风充分吹尽溶 剂。然后裁去未走过溶剂的滤纸边缘,将滤纸转90°,卷成如前圆筒状,放入 盛第二相溶剂的层析缸内展开(操作同上),约1小时后溶剂展开到距纸边0.5cm 时取出,以电吹风吹尽溶剂使其干燥。 溶剂前沿 溶剂1 点样 结果 溶剂2 转90°裁去溶 剂前沿部分 单向上行 双向上行 纸层析点样、展层 (X,Y分别为云点至斑点中心和溶剂前沿的距离,x为点样原点) 3.显色 以喷雾器将茚三酮均匀地喷在滤纸上,然后悬滤纸于65℃烘箱内加热20分 钟,即可看到紫红色氨基酸斑点,将图谱上的斑点用铅笔圈出。8 四、实验操作 1.点样 取层析滤纸一张(14×11cm),在距纸边 1.2cm 处划一基线;再将纸转 90°, 距纸边 1.2cm 处作一线与上线垂直。以毛细管吸取混合氨基酸溶液,点与二线交 点处(见图 4-1),点的直径控制在 2mm 左右,不可过大。待样品干燥后再点一 次。滤纸上点样斑点干燥后,把滤纸卷成圆筒形,纸的两边以铬丝相连,但不可 重叠相碰。 2.展层 在层析缸中平稳的放入装有第一相层析溶剂的培养皿。将圆筒形滤纸放入, 点样一段接触溶剂,以点样处不浸入溶剂为准。待溶剂自下而上均匀展开,约 2 小时后溶剂到达距纸边 0.5cm 处取出滤纸,悬挂于室温中,以电吹风充分吹尽溶 剂。然后裁去未走过溶剂的滤纸边缘,将滤纸转 90°,卷成如前圆筒状,放入 盛第二相溶剂的层析缸内展开(操作同上),约 1 小时后溶剂展开到距纸边 0.5cm 时取出,以电吹风吹尽溶剂使其干燥。 3.显色 以喷雾器将茚三酮均匀地喷在滤纸上,然后悬滤纸于 65℃烘箱内加热 20 分 钟,即可看到紫红色氨基酸斑点,将图谱上的斑点用铅笔圈出。 纸层析点样、展层 (X, Y 分别为云点至斑点中心和溶剂前沿的距离,x 为点样原点)
<<向上翻页向下翻页>>
©2008-现在 cucdc.com 高等教育资讯网 版权所有