层析溶剂要求: (1)被分离物质在该溶剂系统中R在0.05~0.8之间,各组分之R值相差 最好能大于0.05,以免斑点重叠。 (2)溶剂系统中任一组分与分离物之间不能起化学反应 (3)分离物质在溶剂系统中的分配较恒定,不随温度而变化,且易迅速达 到平衡,这样所得斑点较圆整 本实验采用八种混合氨基酸为样品,用酸性和碱性两种溶剂进行双向层析, 以茚三酮为显色剂,可获得分离清晰的层析图谱。图谱示意如下 时…冖 原点 Ⅱ相正酶::9别乙醇:水=5:1:l:1 三、材料、仪器与试剂 (一)实验材料 标准氨基酸混合溶液:亮氨酸、缬氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、丙氨酸、天门 冬氨酸、组氨酸、丝氨酸各100ng溶于50m10.01M盐酸中。 (二)仪器设备 层析缸25×40cm(×2);培养皿15cm(×2);喷雾器:毛细管内径0.lcm; 电吹风;烘箱。层析滤纸14×1lcm:;铅笔,尺。 (三)试剂 0.1%(w/V)茚三酮溶丙酮液; 溶剂系统:第一相:正丁醇:88%甲酸:水=15:3:2(V/V 第二相:正丁醇:吡啶:95%乙醇:水=5:1:1:1(V/)。7 层析溶剂要求： （1）被分离物质在该溶剂系统中 Rf在 0.05～0.8 之间，各组分之 Rf值相差 最好能大于 0.05，以免斑点重叠。 （2）溶剂系统中任一组分与分离物之间不能起化学反应。 （3）分离物质在溶剂系统中的分配较恒定，不随温度而变化，且易迅速达 到平衡，这样所得斑点较圆整。 本实验采用八种混合氨基酸为样品，用酸性和碱性两种溶剂进行双向层析， 以茚三酮为显色剂，可获得分离清晰的层析图谱。图谱示意如下： 三、材料、仪器与试剂 （一）实验材料 标准氨基酸混合溶液：亮氨酸、缬氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、丙氨酸、天门 冬氨酸、组氨酸、丝氨酸各 100mg 溶于 50ml 0.01M 盐酸中。 （二）仪器设备 层析缸 25×40cm（×2）；培养皿 15cm（×2）；喷雾器；毛细管内径 0.1cm； 电吹风；烘箱。层析滤纸 14×11cm；铅笔，尺。 （三）试剂 0.1%（W/V）茚三酮溶丙酮液; 溶剂系统：第一相：正丁醇∶88%甲酸∶水＝15∶3∶2（V/V）； 第二相：正丁醇∶吡啶∶95%乙醇∶水＝5∶1∶1∶1（V/V）