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DNA片段只要相差1个碱基, 就可以在这种凝胶中被分成两 个条带。电泳完成后,用X光 胶片进行曝光,最后得到一张由 不同条带组成的序列图。从这张 图上就可以读出待测DNA片段 的碱基序列。5端的第一个碱 基G读不出来,可以通过测定 互补链的序列测出这个碱基 32.2酸法测序与测序的 自动化 dda ddr ddc 另外一种得到长度只差 个碱基的DNA分子的方法是英 国科学家桑格发明的,这种方法 利用DNA聚合酶以待测序的 DNA单链分子为模版合成互补 的新链。在合成新链时,合成原 料除了4种脱氧核糖核苷酸外 还加入一种2和3位上的羟基 都脱除的核苷酸。由于缺少3 羟基,当这种核苷酸被结合到链 上后,它的后面不能再结合其他 核苷酸,链的合成就此终止。与 化学法测序类似,我们可以准备 4种反应物,加入的核苷酸类似 物分别携带A,G,C,T碱基, 每种反应物里包含在一种碱基 处终止链延伸的长短不同的 DNA片段。这些DNA片段也DNA 片段只要相差 1 个碱基, 就可以在这种凝胶中被分成两 个条带。电泳完成后,用 X 光 胶片进行曝光,最后得到一张由 不同条带组成的序列图。从这张 图上就可以读出待测 DNA 片段 的碱基序列。 5'端的第一个碱 基 G 读不出来,可以通过测定 互补链的序列测出这个碱基 3.2.2 酸法测序与测序的 自动化 另外一种得到长度只差一 个碱基的 DNA 分子的方法是英 国科学家桑格发明的,这种方法 利用 DNA 聚合酶以待测序的 DNA 单链分子为模版合成互补 的新链。在合成新链时,合成原 料除了 4 种脱氧核糖核苷酸外 还加入一种 2'和 3'位上的羟基 都脱除的核苷酸。由于缺少 3' 羟基,当这种核苷酸被结合到链 上后,它的后面不能再结合其他 核苷酸,链的合成就此终止。与 化学法测序类似,我们可以准备 4 种反应物,加入的核苷酸类似 物分别携带 A,G,C,T 碱基, 每种反应物里包含在一种碱基 处终止链延伸的长短不同的 DNA 片段。这些 DNA 片段也
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