的往复式摇床上振荡培养12h,培养温度33~34℃ (3)级种子质量要求 种龄:12h,pH值:64±0.1 光密度:净增OD值0.5以上 残糖:0.5%以下无菌检查:(-) 噬菌体检查:(-) 镜检:菌体生长均匀、粗壮,排列整齐 革兰氏阳性反应。 3,二级种子培养 为了获得发酵所需要的足够数量的菌体,在一级种子培养的基础上进而扩大到 种子罐的二级种子培养。种子罐容积大小取决于发酵罐大小和种量比例。 (1)培养基组成 培养基组成(%)T613B91738AS1299 水解糖 2.5 玉米浆 2.5-3.52.5-3 .52.5-3.52.5 磷酸氢二钾 0.15 0.15 0.2 硫酸镁 0.04 0.05 尿素 0.4 0.5 0.5 ppm 6.8-7.06.8-7.0 7.0 6.5-6.8 (2)培养条件 接种量:0.8-10% 培养温度:32~34℃ 培养时间:7~8h 通风量: 5OL种子罐10.5 搅拌转速340r/min; 250L种子罐1:03 搅拌转速300r/min 50L种子罐1:025 搅拌转速230r/min的往复式摇床上振荡培养 12h，培养温度 33~34℃。 (3)一级种子质量要求 种龄：12h，pH 值：6.4±0.1 光密度：净增 OD 值 0.5 以上 残糖：0.5％以下 无菌检查：(-) 噬菌体检查：(-) 镜检：菌体生长均匀、粗壮，排列整齐 革兰氏阳性反应。 3，二级种子培养 为了获得发酵所需要的足够数量的菌体，在一级种子培养的基础上进而扩大到 种子罐的二级种子培养。种子罐容积大小取决于发酵罐大小和种量比例。 (1)培养基组成 培养基组成（%） T6-13 B9 T738 AS1.299 水解糖 玉米浆 磷酸氢二钾 硫酸镁 尿素 Fe++（ppm） Mn++（ppm） pH 2.5 2.5-3.5 0.15 0.04 0.4 2 2 6.8-7.0 2.5 2.5-3.5 0.15 0.04 0.4 2 2 6.8-7.0 2.5 2.5-3.5 0.2 0.05 0.5 2 2 7.0 2.5 2.5 0.1 0.04 0.5 2 2 6.5-6.8 (2)培养条件 接种量：0.8~1.0％ 培养温度：32~34℃ 培养时间：7~8h 通风量： 50L 种子罐 1:0.5 搅拌转速 340r／min； 250L 种子罐 1:0.3 搅拌转速 300r／ min 500L 种子罐 1:0.25 搅拌转速 230r／ min