合酶的特性见表11-3。现在一般认为DNA聚合酶a和6的作用是复制染色体DNA,主要的根 据是它们在细胞内活力水平的变化与DA复制有明显的平行关系，在分裂细胞的S期达到高 峰。聚合酶ā催化随后链的合成，而聚合酶6催化领头链的合成，它还具有3'→5'外切 酶的活力。NA聚合酶B的功能主要是修复作用。NA聚合爵Y是从线粒体中分离得到的， 推测它与线粒体DNA的复制有关。 4.DNA连接酶(DNM1 igase) 其作用是催化双链DNA中的切口处的相邻5'一磷酸基与3'一羟基之间形成磷酸酯键。 但是它不能将两条游离的DNA单链连接起来 大肠杆菌的DNA连接酶要求NAD提供能量，产物是AMP和烟酰胺单核苷酸（图11-5）。而在 高等生物中，则要求ATP提供能量，产物是AMP和焦磷酸。大肠杆菌的DNA连接酶是分子量为 75000的多肽链。在哺乳动物细胞中发现至少有两种连接酵，分别称为连接酶I和Ⅱ。连接 酶I的分子量为200000，连接酶Ⅱ的为85000。连接酶主要在正在繁殖的细胞中起作用。 连接酶Ⅱ则在停止分裂的细胞中起作用。DNA连接酶在DNA复制、修复、重组中均起重要作 用。 E+ATR或NAD EAMP+PP或NMN E-AMP+-5-DNA= E+AMP-(B-5'-DNA DNA-3-OH+AMP-5-DNA= =DNA-3-0-5'-DNA+AMP DNA-3OH+®-5DNA+ATP或NAD) =DNA-3O-⊙-S-DNA+AMP+PP或NMN 图11-5DNA连接酶催化反应的机理 5.拓扑异构酶(topoisomerase) 生物体内DNA分子通常处于超螺旋状态，而DNA的许多生物功能需要解开双链才能进 行。拓扑异构酶就是催化DNA的拓扑连环数发生变化的酶，它可分为拓扑异构酶和拓扑 异构酶Ⅱ（也称为旋转酶，gyrase)。1型酶可使双链DNA分子中的一条链发生断裂和再连接， 反应不需要提供能量，它们主要集中在活性转录区，同转录有关。Ⅱ型酶能使DN八的两条 链同时发生断裂和再连接，当它引入负超螺旋时需要由ATP提供能量。一个拓扑异构酶Ⅱ 的分子1mi分钟可引入100个负超螺旋。它们主要分布在染色质骨架蛋白和核基质部位， 同复制有关。拓扑异构酶可减少负超螺旋：拓扑异构酶红可引入负超螺旋，它们协同作用 控制着DNA的拓扑结构。拓扑异构酶在重组、修复和DNA的其他转变方面起着重要的作用。 6.解螺旋與helicase) 这类酶能通过水解ATP将DNA的两条链打开。ATP水解活力要有单链DNA存在时才表 现。大肠杆菌中的rep蛋白(rep基因的产物就是这样一种酶。由分子量为65000的一条多肽 链组成。每解开一对碱基需要水解2个ATP分子。 7.其他蛋白因子 (I)单链结合蛋白SSP)它的功能是稳定已被解开的DNA单链，阻止复性和保护单 链不被核酸酶降解。 (2)引发前体(preprimosome)它是由6种蛋白质即dnaB、dhaC、n、n'、n”和i组 成。引发前体再与RNA引物合成酶（引发酶）结合，组装成引发体(primosome)。引发体结 275275 合酶的特性见表11-3。现在一般认为DNA聚合酶α和δ的作用是复制染色体DNA，主要的根 据是它们在细胞内活力水平的变化与DNA复制有明显的平行关系，在分裂细胞的S期达到高 峰。聚合酶α催化随后链的合成，而聚合酶δ催化领头链的合成，它还具有3′→5′外切 酶的活力。DNA聚合酶β的功能主要是修复作用。DNA聚合酶γ是从线粒体中分离得到的， 推测它与线粒体DNA的复制有关。 4.DNA连接酶(DNA ligase) 其作用是催化双链DNA中的切口处的相邻5′—磷酸基与3′—羟基之间形成磷酸酯键。 但是它不能将两条游离的DNA单链连接起来。 大肠杆菌的DNA连接酶要求NAD+提供能量，产物是AMP和烟酰胺单核苷酸(图11-5)。而在 高等生物中，则要求ATP提供能量，产物是AMP和焦磷酸。大肠杆菌的DNA连接酶是分子量为 75 000的多肽链。在哺乳动物细胞中发现至少有两种连接酶，分别称为连接酶I和Ⅱ。连接 酶I的分子量为200 000，连接酶Ⅱ的为85 000。连接酶I主要在正在繁殖的细胞中起作用。 连接酶Ⅱ则在停止分裂的细胞中起作用。DNA连接酶在DNA复制、修复、重组中均起重要作 用。 图 11-5 DNA连接酶催化反应的机理 5．拓扑异构酶(topoisomerase) 生物体内DNA分子通常处于超螺旋状态，而DNA的许多生物功能需要解开双链才能进 行。拓扑异构酶就是催化DNA的拓扑连环数发生变化的酶，它可分为拓扑异构酶I和拓扑 异构酶Ⅱ(也称为旋转酶，gyrase)。I型酶可使双链DNA分子中的一条链发生断裂和再连接， 反应不需要提供能量，它们主要集中在活性转录区，同转录有关。Ⅱ型酶能使DNA的两条 链同时发生断裂和再连接，当它引入负超螺旋时需要由ATP提供能量。一个拓扑异构酶Ⅱ 的分子1min分钟可引入100个负超螺旋。它们主要分布在染色质骨架蛋白和核基质部位， 同复制有关。拓扑异构酶I可减少负超螺旋；拓扑异构酶II可引入负超螺旋，它们协同作用 控制着DNA的拓扑结构。拓扑异构酶在重组、修复和DNA的其他转变方面起着重要的作用。 6.解螺旋酶(helicase) 这类酶能通过水解ATP将DNA的两条链打开。ATP水解活力要有单链DNA存在时才表 现。大肠杆菌中的rep蛋白(rep基因的产物)就是这样一种酶。由分子量为65 000的一条多肽 链组成。每解开一对碱基需要水解2个ATP分子。 7．其他蛋白因子 （1）单链结合蛋白(SSP) 它的功能是稳定已被解开的DNA单链，阻止复性和保护单 链不被核酸酶降解。 （2）引发前体(preprimosome) 它是由6种蛋白质即dnaB、dnaC、n、n′、n″和i组 成。引发前体再与RNA引物合成酶(引发酶)结合，组装成引发体（primosome）。引发体结 NAD +） P P P P + AMP P NAD +） P +AMP + PPi(或NMN) E + AT（P 或 E·AMP + PPi(或NMN) E-AMP + 5'-DNA E + AMP 5'-DNA DNA-3'-OH + AMP 5'-DNA DNA-3'-O 5'-DNA DNA-3'-OH + 5'-DNA + AT（P 或 DNA-3'-O 5'-DNA