胰蛋白酶在亲和柱上的分离曲线 六、实验结果处理 绘制亲和柱层析洗脱曲线。 2.计算鸡卵粘蛋白的比活力 3.计算鸡卵蛋白的偶联量 4.绘制酶促反应动力学曲线(求初速度) 5.计算亲和层析纯化胰蛋白酶的比活力及纯化效率。 最后将亲和层析过程中的各项数据详细列入下表中。 亲和层析实验数据 亲和柱床体积(ml) 洗脱的胰蛋白酶溶液体积(ml) 洗脱的胰蛋白酶溶液吸光值A280 洗脱的胰蛋白酶溶液蛋白浓度(mg/ml) 匚亲和柱吸附率(mg/m凝胶 亲和柱洗脱酶液活力(u/ml) 亲和柱洗脱酶液比活力(u/mg) 上柱前样品比活力(u/mg) 亲和柱纯化效率(倍数) 附录一:用溴化氯活化载体及偶联配基方法 载体 Sepharose4B的活化:取15ml沉淀体积的 Sepharose4B,抽滤成半干物,用约 10倍体积0.5mo/ L Nacl洗,再用10~15倍蒸馏水洗去其中的保护剂和防腐剂。抽干约得253 胰蛋白酶在亲和柱上的分离曲线 六、实验结果处理 1. 绘制亲和柱层析洗脱曲线。 2. 计算鸡卵粘蛋白的比活力。 3. 计算鸡卵蛋白的偶联量。 4. 绘制酶促反应动力学曲线（求初速度）。 5. 计算亲和层析纯化胰蛋白酶的比活力及纯化效率。 最后将亲和层析过程中的各项数据详细列入下表中。 亲和层析实验数据 参数 数据 亲和柱床体积（ml） 洗脱的胰蛋白酶溶液体积 ( ml ) 洗脱的胰蛋白酶溶液吸光值 A280 洗脱的胰蛋白酶溶液蛋白浓度 ( mg / ml ) 亲和柱吸附率 ( mg / ml 凝胶) 亲和柱洗脱酶液活力 ( u / ml ) 亲和柱洗脱酶液比活力 ( u / mg ) 上柱前样品比活力 ( u / mg ) 亲和柱纯化效率（倍数） 附录一 ： 用溴化氰活化载体及偶联配基方法 1. 载体 Sepharose4B 的活化：取 15ml 沉淀体积的 Sepharose4B,抽滤成半干物，用约 10 倍体积 0.5mol/L NaCl 洗，再用 10~15 倍蒸馏水洗去其中的保护剂和防腐剂。抽干约得