在上述已挥干的蒸发皿中准确加入02mL5%香草醛冰乙酸溶液,转动蒸发皿,使残渣溶解,再加O.8mL 高氯酸,混匀后移入0mL比色管中,塞紧盖子于60℃以下水浴上加温15mn取出,冷却后准确加入冰乙 酸50mL,摇匀后以1.0cm比色皿、于560nm处与人参皂苷Re标准管同时比色 4标准曲线的绘制 吸取人参皂苷Re标准溶液(2.0mg/mL)0、20、40、60、80、1004L(相当于人参皂苷Re0、40、80 120、160、200μg),于10mL比色管中,用氮气吹干,同4.(3)显色步骤测定吸光度。并绘制标准曲线 人参总皂苷浓度为20~200g/mL之间与吸光度值呈线性关系,相关系数(r)0.999 五、结果计算 X= x V1×1000 mxl×1000×1000 式中X一样品中总皂苷(以人参皂苷Re计)(gkg或g/L); m一试样质量或试液体积(g或mL) V1-一样品提取液总体积(mL) 2一样品提取液测定用体积(mL) m——从标准曲线查得待测液中人参皂苷Re量(pg) 六、注释 1.人参系五加科植物是人参 Panax ginseng C A Meyer的根,含有多种人参皂苷( ginsenoside),多数为达 玛烷型皂苷,如人参皂苷Ra、Ra、Rb、Rb2、Rb3、Re、Rd等:;少数为齐墩果酸型(C型)皂苷,如人 参皂苷Re。由于苷元不同,达玛烷型皂苷又分为:20S一原人参二醇类皂苷(A型)和20S—原人参三醇 类皂苷(B型)。其中,A型和B型皂苷酸水解后,分别得到人参二醇( Panaxadiol)和人参三醇( panaxatriol) 除人参外,五加科的西洋参、三七、刺人参、刺五加和葫芦科的绞股蓝中亦含有与人参皂苷类似的化合物。 当保健食品原料配方中含有上述多种原料时,即以本法“总皂苷(以人参皂苷Re计)”报告检测结果。 2.对于人参、西洋参、绞股蓝纯品或以其为主要原料加工的保健食品,按《中华人民共和国药典》2000 年版一部第99页,以薄层色谱法进行鉴定试验,将受试品色谱与对照药材色谱及对照品色谱进行比较确 定其主要原料后,人参、西洋参制品仍以人参皂苷Re为对照品进行检测,而绞股蓝制品以绞股蓝总皂苷 (中国药品生物制品检定所)为对照品进行检测,分别以“人参总皂苷”、“西洋参总皂苷”、“绞股蓝总皂 苷”报告检测结果 3回收率:90%~105% 第四节褪黑素的测定方法(高效液相色谱法 本方法适用于功能性食品中褪黑素片剂的测定,非添加褪黑素的天然食品可参照此法。 本方法褪黑素的最低检出量为25ng。 、方法提要 样品中的褪黑素用甲醇提取后,经高效液相色谱分离,在紫外检测器上检测,波长260mm,用外标 法定量,根据峰面积值计算样品中褪黑素的含量。10 在上述已挥干的蒸发皿中准确加入0.2mL 5％香草醛冰乙酸溶液，转动蒸发皿，使残渣溶解，再加0.8mL 高氯酸，混匀后移入 l0mL 比色管中，塞紧盖子于 60℃以下水浴上加温 15min 取出，冷却后准确加入冰乙 酸 5.0mL，摇匀后以 1.0cm 比色皿、于 560nm 处与人参皂苷 Re 标准管同时比色。 4 标准曲线的绘制： 吸取人参皂苷 Re 标准溶液（2.0mg/mL）0、20、40、60、80、100μL（相当于人参皂苷 Re0、40、80、 120、160、200μg），于 10mL 比色管中，用氮气吹干，同 4.（3）显色步骤测定吸光度。并绘制标准曲线。 人参总皂苷浓度为 20～200μg/mL 之间与吸光度值呈线性关系，相关系数（r）0.999。 五、结果计算 1000 1000 1000 2 1 1      = m V m V X 式中 X——样品中总皂苷（以人参皂苷 Re 计）（g/kg 或 g/L）； m——试样质量或试液体积（g 或 mL）； V1——样品提取液总体积（mL）； V2——样品提取液测定用体积（mL）； m1——从标准曲线查得待测液中人参皂苷 Re 量（μg）。 六、注释 1.人参系五加科植物是人参 Panax ginseng C A Meyer 的根，含有多种人参皂苷(ginsenoside)，多数为达 玛烷型皂苷，如人参皂苷 Ral、Ra2、Rbl、Rb2、Rb3、Re、Rd 等；少数为齐墩果酸型（C 型）皂苷，如人 参皂苷 Re。由于苷元不同，达玛烷型皂苷又分为：20S—原人参二醇类皂苷（A 型）和 20S—原人参三醇 类皂苷（B 型）。其中，A 型和 B 型皂苷酸水解后，分别得到人参二醇（Panaxadial）和人参三醇（panaxatriol）。 除人参外，五加科的西洋参、三七、刺人参、刺五加和葫芦科的绞股蓝中亦含有与人参皂苷类似的化合物。 当保健食品原料配方中含有上述多种原料时，即以本法“总皂苷（以人参皂苷 Re 计）”报告检测结果。 2.对于人参、西洋参、绞股蓝纯品或以其为主要原料加工的保健食品，按《中华人民共和国药典》2000 年版一部第 99 页，以薄层色谱法进行鉴定试验，将受试品色谱与对照药材色谱及对照品色谱进行比较确 定其主要原料后，人参、西洋参制品仍以人参皂苷 Re 为对照品进行检测，而绞股蓝制品以绞股蓝总皂苷 （中国药品生物制品检定所）为对照品进行检测，分别以“人参总皂苷”、“西洋参总皂苷”、“绞股蓝总皂 苷”报告检测结果。 3.回收率：90%～105%。 第四节 褪黑素的测定方法（高效液相色谱法） 本方法适用于功能性食品中褪黑素片剂的测定，非添加褪黑素的天然食品可参照此法。 本方法褪黑素的最低检出量为 25ng。 一、方法提要 样品中的褪黑素用甲醇提取后，经高效液相色谱分离，在紫外检测器上检测，波长 260mm，用外标 法定量，根据峰面积值计算样品中褪黑素的含量